英文縮写词表 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
引言 | 第10-14页 |
一 实验材料 | 第14-16页 |
1. 细胞株 | 第14页 |
2. 实验药物 | 第14页 |
3. 主要试剂 | 第14页 |
4. 主要实验仪器 | 第14-15页 |
5. 主要溶液配制 | 第15页 |
6. 软件 | 第15-16页 |
二 实验方法 | 第16-24页 |
1. 细胞培养 | 第16页 |
2. 应用Western-blot检测GAA对人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1、MGMT基因蛋白水平变化 | 第16-19页 |
·Western-blot原理 | 第16页 |
·Western-blot测定步骤 | 第16-19页 |
·试剂配置 | 第16-17页 |
·细胞总蛋白的提取 | 第17页 |
·电泳 | 第17-19页 |
3. 免疫共沉淀法检测人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1、MGMT基因蛋白相互用 | 第19-20页 |
·免疫共沉淀原理 | 第19页 |
·免疫共沉淀检测步骤 | 第19-20页 |
4. 实时荧光定量RT-PCR(real-time fluorescence quantitative RT-PCR)法检测不同浓度的GAA处理后的人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1、MGMT基因及DNA甲基转移酶(DNMT1)mRNA表达的变化 | 第20-23页 |
·Real-time PCR的原理 | 第20页 |
·Real-time PCR相对定量分析方法 | 第20页 |
·RNA提取 | 第20-21页 |
·反转录反应第一链cDNA合成 | 第21-22页 |
·Real-time PCR | 第22页 |
·设计引物序列 | 第22-23页 |
·Real-time PCR扩增的热循环条件 | 第22-23页 |
5. 数据分析 | 第23-24页 |
三 实验结果 | 第24-38页 |
1. Western-blot检测GAA对人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1、MGMT基因蛋白水平变化 | 第24-29页 |
·hMLH1蛋白表达 | 第24-27页 |
·MGMT蛋白表达 | 第27-29页 |
2. 免疫共沉淀法检测人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1及MGMT基因蛋白相互作用 | 第29-30页 |
3. RT-PCR法检测不同浓度的GAA处理后的人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1、MGMT基因及DNA甲基转移酶(DNMT1)mRNA表达检测结果 | 第30-38页 |
·hMLH1 mRNA表达 | 第30-32页 |
·MGMT mRNA表达 | 第32-35页 |
·DNMT1 mRNA表达 | 第35-38页 |
四 讨论 | 第38-44页 |
五 问题与展望 | 第44-45页 |
六 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
文献综述:棉酚及其衍生物抗肿瘤作用的研究进展 | 第53-64页 |
参考文献 | 第60-64页 |
攻读学位期间发表的文章 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |