| 内容提要 | 第1-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-21页 |
| ·细胞周期与肿瘤 | 第8-14页 |
| ·细胞周期概述 | 第8页 |
| ·细胞周期调控 | 第8-11页 |
| ·CDK4 与肿瘤 | 第11-13页 |
| ·针对 CDK4 的肿瘤治疗研究现状 | 第13-14页 |
| ·单链抗体与肿瘤 | 第14-19页 |
| ·单链抗体概述 | 第14-15页 |
| ·单链抗体的获得 | 第15-16页 |
| ·单链抗体的修饰 | 第16-18页 |
| ·单链抗体的表达 | 第18页 |
| ·单链抗体在肿瘤治疗中的应用 | 第18-19页 |
| ·本研究的立题依据和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-40页 |
| ·实验材料 | 第21-28页 |
| ·质粒、菌株及细胞株 | 第21页 |
| ·主要试剂，缓冲液及培养基 | 第21-28页 |
| ·实验仪器 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-40页 |
| ·重组人CDK4 蛋白的制备 | 第29-35页 |
| ·抗CDK4 单链抗体的可溶性表达与纯化 | 第35-36页 |
| ·抗CDK4 单链抗体的活性分析 | 第36-40页 |
| 第三章 实验结果 | 第40-52页 |
| ·重组人CDK4 蛋白的制备 | 第40-41页 |
| ·pET28a-CDK4 重组表达载体的构建及鉴定 | 第40页 |
| ·人CDK4 基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第40页 |
| ·重组人CDK4 蛋白的纯化与复性 | 第40-41页 |
| ·重组人CDK4 蛋白的鉴定 | 第41页 |
| ·抗CDK4 单链抗体的可溶性表达与纯化 | 第41-45页 |
| ·ELISA 法检测诱导上清与重组人 CDK4 结合活性 | 第41-45页 |
| ·抗CDK4 单链抗体的可溶性表达、纯化与鉴定 | 第45页 |
| ·抗CDK4 单链抗体的活性分析 | 第45-52页 |
| ·Western blot分析纯化的抗CDK4 单链抗体与重组人CDK4 的结合活性 | 第45-46页 |
| ·ELISA法检测抗CDK4 单链抗体与抗CDK4 多克隆抗体竞争性结合实验 | 第46页 |
| ·抗CDK4 单链抗体亲和力的测定 | 第46-49页 |
| ·抗CDK4 单链抗体与肿瘤细胞内CDK4 蛋白的相互作用分析 | 第49-52页 |
| 第四章 讨论 | 第52-56页 |
| ·人重组 CDK4 蛋白的原核表达、纯化及复性 | 第52-53页 |
| ·抗CDK4 单链抗体的制备 | 第53-54页 |
| ·抗CDK4 单链抗体的体外活性测定 | 第54页 |
| ·抗CDK4 单链抗体与细胞内 CDK4 相互作用分析 | 第54-56页 |
| 第五章 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 中文摘要 | 第64-66页 |
| Abstract | 第66-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
