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CTNNAL1表达的应答性调控及其在哮喘及气道上皮中的作用

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-13页
缩略词表第13-14页
第一章 前言第14-17页
第二章 CTNNAL1与哮喘相关性分析第17-31页
   ·材料和方法第18-22页
     ·材料第18页
     ·主要仪器设备第18页
     ·病例第18-19页
     ·荧光定量RT-PCR检测哮喘病人外周血CTNNAL1表达水平第19页
     ·免疫组化检测人支气管粘膜CTNNAL1水平第19-20页
     ·哮喘动物模型的制备第20页
     ·肺功能检测第20页
     ·支气管肺泡灌洗(bronchoalvage lavage,BAL)第20页
     ·肺组织病理变化第20-21页
     ·原位杂交检测肺组织CTNNAL1 mRNA的表达第21页
     ·荧光定量RT-PCR检测小鼠肺组织CTNNAL1表达水平第21-22页
     ·统计学处理第22页
   ·结果第22-28页
     ·哮喘病人外周血白细胞CTNNAL1表达下调第22-23页
     ·哮喘病人支气管粘膜CTNNAL1表达降低第23页
     ·哮喘动物模型检测第23-26页
     ·CTNNAL1在小鼠支气管肺组织的表达第26页
     ·小鼠支气管肺组织CTNNAL1表达水平与气道阻力相关第26-28页
   ·讨论第28-31页
第三章 CTNNAL1在气道上皮中的生物学效应第31-56页
   ·材料与方法第32-40页
     ·材料第32页
     ·主要仪器设备第32-33页
     ·臭氧应激的气道高反应动物模型的制备第33页
     ·荧光定量RT-PCR检测应激动物支气管肺组织及人支气管上皮细胞株CTNNAL1 mRNA表达水平第33页
     ·永生化人支气管上皮细胞株的培养第33页
     ·原位杂交检测支气管上皮细胞CTNNAL1 mRNA的表达第33-34页
     ·CTNNAL1绿色荧光蛋白表达载体的构建第34-37页
     ·生物信息学分析CTNNAL1细胞内定位,荧光显微镜观察验证第37-38页
     ·反义寡核苷酸(ASO)设计第38页
     ·人支气管上皮细胞转染第38页
     ·测量BEC的损伤修复指数RI[4,59]第38页
     ·细胞活性测定第38-39页
     ·Western blot检测细胞FAK磷酸化第39-40页
     ·统计学处理第40页
   ·结果第40-56页
     ·CTNNAL1在应激的小鼠支气管肺组织及培养的人BEC表达上调第40-42页
     ·pEGFP/CTNNAL1表达载体的鉴定第42-56页
第四章 CTNNAL1基因表达调控研究第56-78页
   ·材料和方法第56-66页
     ·材料第56-57页
     ·细胞培养第57页
     ·凝胶阻滞电泳(Electrophoretic mobility shift assays,EMSA)第57-59页
     ·染色质免疫共沉淀技术(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)第59-60页
     ·荧光定量RT-PCR第60-61页
     ·基因定点突变第61-65页
     ·统计分析第65-66页
   ·结果第66-75页
     ·核转录因子对CTNNAL1的表达调控的体外筛选第66-70页
     ·核转录因子对CTNNAL1的表达调控的体内验证第70页
     ·LEF-1与AP-2α结合位点突变对荧光素酶活性的影响第70-74页
     ·臭氧应激的BEC LEF-1和AP-2α的活性检测第74-75页
   ·讨论第75-78页
第五章 结论第78-79页
参考文献第79-95页
综述第95-104页
致谢第104-105页
在读期间主要的研究成果第105-106页

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