中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-13页 |
缩略词表 | 第13-14页 |
第一章 前言 | 第14-17页 |
第二章 CTNNAL1与哮喘相关性分析 | 第17-31页 |
·材料和方法 | 第18-22页 |
·材料 | 第18页 |
·主要仪器设备 | 第18页 |
·病例 | 第18-19页 |
·荧光定量RT-PCR检测哮喘病人外周血CTNNAL1表达水平 | 第19页 |
·免疫组化检测人支气管粘膜CTNNAL1水平 | 第19-20页 |
·哮喘动物模型的制备 | 第20页 |
·肺功能检测 | 第20页 |
·支气管肺泡灌洗(bronchoalvage lavage,BAL) | 第20页 |
·肺组织病理变化 | 第20-21页 |
·原位杂交检测肺组织CTNNAL1 mRNA的表达 | 第21页 |
·荧光定量RT-PCR检测小鼠肺组织CTNNAL1表达水平 | 第21-22页 |
·统计学处理 | 第22页 |
·结果 | 第22-28页 |
·哮喘病人外周血白细胞CTNNAL1表达下调 | 第22-23页 |
·哮喘病人支气管粘膜CTNNAL1表达降低 | 第23页 |
·哮喘动物模型检测 | 第23-26页 |
·CTNNAL1在小鼠支气管肺组织的表达 | 第26页 |
·小鼠支气管肺组织CTNNAL1表达水平与气道阻力相关 | 第26-28页 |
·讨论 | 第28-31页 |
第三章 CTNNAL1在气道上皮中的生物学效应 | 第31-56页 |
·材料与方法 | 第32-40页 |
·材料 | 第32页 |
·主要仪器设备 | 第32-33页 |
·臭氧应激的气道高反应动物模型的制备 | 第33页 |
·荧光定量RT-PCR检测应激动物支气管肺组织及人支气管上皮细胞株CTNNAL1 mRNA表达水平 | 第33页 |
·永生化人支气管上皮细胞株的培养 | 第33页 |
·原位杂交检测支气管上皮细胞CTNNAL1 mRNA的表达 | 第33-34页 |
·CTNNAL1绿色荧光蛋白表达载体的构建 | 第34-37页 |
·生物信息学分析CTNNAL1细胞内定位,荧光显微镜观察验证 | 第37-38页 |
·反义寡核苷酸(ASO)设计 | 第38页 |
·人支气管上皮细胞转染 | 第38页 |
·测量BEC的损伤修复指数RI[4,59] | 第38页 |
·细胞活性测定 | 第38-39页 |
·Western blot检测细胞FAK磷酸化 | 第39-40页 |
·统计学处理 | 第40页 |
·结果 | 第40-56页 |
·CTNNAL1在应激的小鼠支气管肺组织及培养的人BEC表达上调 | 第40-42页 |
·pEGFP/CTNNAL1表达载体的鉴定 | 第42-56页 |
第四章 CTNNAL1基因表达调控研究 | 第56-78页 |
·材料和方法 | 第56-66页 |
·材料 | 第56-57页 |
·细胞培养 | 第57页 |
·凝胶阻滞电泳(Electrophoretic mobility shift assays,EMSA) | 第57-59页 |
·染色质免疫共沉淀技术(Chromatin immunoprecipitation,ChIP) | 第59-60页 |
·荧光定量RT-PCR | 第60-61页 |
·基因定点突变 | 第61-65页 |
·统计分析 | 第65-66页 |
·结果 | 第66-75页 |
·核转录因子对CTNNAL1的表达调控的体外筛选 | 第66-70页 |
·核转录因子对CTNNAL1的表达调控的体内验证 | 第70页 |
·LEF-1与AP-2α结合位点突变对荧光素酶活性的影响 | 第70-74页 |
·臭氧应激的BEC LEF-1和AP-2α的活性检测 | 第74-75页 |
·讨论 | 第75-78页 |
第五章 结论 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-95页 |
综述 | 第95-104页 |
致谢 | 第104-105页 |
在读期间主要的研究成果 | 第105-106页 |