缩略语表 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-15页 |
Abstract | 第15-22页 |
前言 | 第22-25页 |
文献回顾 | 第25-41页 |
正文 | 第41-92页 |
实验一 重组人wtCREG/myc-His融合蛋白及mCREG/myc-His蛋白的表达及纯化 | 第41-58页 |
1 材料 | 第41-45页 |
·主要仪器. | 第41-42页 |
·主要试剂 | 第42-44页 |
·细胞和质粒载体 | 第44页 |
·试剂配制 | 第44-45页 |
2 方法 | 第45-50页 |
·pcDNA 3.1 myc-His/wtCREG真核表达载体的构建及鉴定 | 第45-47页 |
·pcDNA 3.1 myc-His/mCREG真核表达载体的构建及鉴定 | 第47页 |
·wt/mCREG/myc-His融合蛋白的表达及鉴定 | 第47-49页 |
·wt/mCREG/myc-His融合蛋白的纯化 | 第49-50页 |
·统计学方法 | 第50页 |
3 结果 | 第50-55页 |
·pcDNA 3.1 myc-His/wtCREG真核表达载体的鉴定 | 第50-51页 |
·pcDNA 3.1 myc-His/mCREG真核表达载体的鉴定 | 第51-52页 |
·wt/mCREG/myc-His融合蛋白的表达及鉴定 | 第52-54页 |
·wt/mCREG/myc-His融合蛋白的纯化 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-58页 |
实验二 重组wt/mCREG蛋白对VSMC生物学功能的 调控作用 | 第58-76页 |
1 材料 | 第59-60页 |
·实验细胞株 | 第59页 |
·主要试剂 | 第59-60页 |
·主要设备 | 第60页 |
2 方法 | 第60-64页 |
·重组CREG蛋白对VSMC最适效应浓度的确定 | 第60-61页 |
·重组CREG蛋白对VSMC的生物学效应分析 | 第61-63页 |
·M6P/IGF2R在重组CREG蛋白的生物学功能中的调控作用的研究 | 第63-64页 |
·统计学分析 | 第64页 |
3 结果 | 第64-73页 |
·wt/mCREG/myc-His融合蛋白最适宜作用浓度 | 第64页 |
·外源性重组CREG蛋白对VSMC的生物学效应 | 第64-68页 |
·M6P/IGF2R在重组CREG蛋白的生物学功能中的调控作用 | 第68-73页 |
4 讨论 | 第73-76页 |
实验三 重组CREG蛋白与M6P/IGF2R结构域相互作用分析 | 第76-92页 |
1 材料 | 第76-80页 |
·主要仪器和试剂 | 第76-77页 |
·主要试剂 | 第77-79页 |
·质粒载体和宿主菌 | 第79页 |
·主要试剂配制 | 第79-80页 |
2 方法 | 第80-84页 |
·M6P/IGF2R结构域蛋白引物的设计 | 第80页 |
·原核表达载体的制备 | 第80-82页 |
·IGF2R结构域片段蛋白表达和纯化 | 第82-83页 |
·ELISA分析重组CREG与蛋白IGF2R结构域结合力 | 第83页 |
·竞争抑制实验 | 第83-84页 |
·统计学分析 | 第84页 |
3 结果 | 第84-90页 |
·IGF2R结构域蛋白载体构建 | 第84-85页 |
·IGF2R1-3 各结构域纯化及鉴定 | 第85-86页 |
·重组wt/mCREG蛋白与M6P/IGF2R各结构域片段亲和力的研究 | 第86-87页 |
·竞争抑制实验 | 第87-90页 |
4 讨论 | 第90-92页 |
小结 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-104页 |
个人简历和研究成果 | 第104-107页 |
致谢 | 第107页 |