| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1. 引言 | 第12-27页 |
| ·小麦多酚氧化酶研究进展 | 第13-16页 |
| ·PPO 在小麦中的分布和变化 | 第13-14页 |
| ·PPO 的生理生化功能 | 第14页 |
| ·小麦籽粒中PPO 活性对品质的影响 | 第14-15页 |
| ·小麦籽粒PPO 基因的遗传特性 | 第15页 |
| ·小麦籽粒PPO 活性分子标记开发的现状 | 第15-16页 |
| ·小麦黄色素的研究进展 | 第16-20页 |
| ·黄色素的生物学特性 | 第17页 |
| ·小麦籽粒黄色素含量的遗传特性 | 第17-18页 |
| ·黄色素合成途径基因的克隆与标记开发 | 第18-20页 |
| ·基因表达载体构建策略 | 第20-22页 |
| ·启动子与终止子的选择 | 第20页 |
| ·内含子与转录调控序列 | 第20-22页 |
| ·RNA 干扰机理及其应用 | 第22-26页 |
| ·RNA 干涉在植物中的应用 | 第22-25页 |
| ·瞬时性的RNA 沉默 | 第23-24页 |
| ·持久性的RNA 沉默 | 第24-25页 |
| ·RNA 干扰在作物品质改良中的应用 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 2 实验材料与方法 | 第27-36页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·分子检测用实验材料 | 第27页 |
| ·构建载体用实验材料 | 第27页 |
| ·基因及质粒载体 | 第27页 |
| ·菌株 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-36页 |
| ·分子检测实验方法 | 第27-30页 |
| ·所需溶液的配制 | 第27-28页 |
| ·PPO 活性测定方法 | 第28页 |
| ·小麦叶片基因组DNA 的提取 | 第28-29页 |
| ·引物序列 | 第29页 |
| ·PCR 扩增及琼脂糖凝胶电泳 | 第29-30页 |
| ·构建载体的实验方法 | 第30-36页 |
| ·外源DNA 的扩增 | 第30-32页 |
| ·过量表达载体所用 psy 基因的扩增 | 第30-31页 |
| ·Intron4 片段的扩增 | 第31页 |
| ·ppo 基因干涉片段的扩增 | 第31-32页 |
| ·PSY 基因干涉片段的扩增 | 第32页 |
| ·DNA 片段的回收与纯化 | 第32-33页 |
| ·质粒及DNA 的酶切 | 第33页 |
| ·粘性末端连接 | 第33页 |
| ·LB 培养基的配制 | 第33-34页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第34页 |
| ·热击法质粒转化 | 第34页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第34-35页 |
| ·克隆子的快速鉴定 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-48页 |
| ·分子检测的结果与分析 | 第36-40页 |
| ·ppo 不同基因等位变异类型在山东育成及主栽品种中的分布 | 第36-37页 |
| ·ppo 基因型与PPO 活性的关系 | 第37-38页 |
| ·YP7A 在山东农家品种、育成品种及当前主栽品种中的分布 | 第38-40页 |
| ·ppo 和psy 基因不同组合的分布 | 第40页 |
| ·构建psy 过量表达载体pOEPSY 的结果与分析 | 第40-43页 |
| ·基础质粒pZLBx17 的图谱及酶切鉴定 | 第40-41页 |
| ·psy 过量表达载体pOEPSY 的构建 | 第41-42页 |
| ·psy 过量表达载体pOEPSY 的鉴定 | 第42-43页 |
| ·构建RNAi 载体的结果与分析 | 第43-48页 |
| ·中间载体pZLBxIN 的构建 | 第43页 |
| ·RNAi 中间载体pZLBxIN 的鉴定 | 第43-44页 |
| ·ppo 基因RNAi 干涉载体pRNAiPPO 的构建 | 第44-45页 |
| ·ppo 基因RNAi 干涉载体pRNAiPPO 的鉴定 | 第45-46页 |
| ·psy 基因RNA 干涉载体pRNAiPSY 的构建及其鉴定 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| ·ppo 和psy 基因的分子检测 | 第51页 |
| ·构建完成过量表达载体pOEPSY、RNA 干涉中间载体 pZLBxIN、RNA 干涉表达载体pRNAiPPO 和pRNAiPSY | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第68页 |
