| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-10页 |
| 英文缩写说明 | 第10-15页 |
| 前言 | 第15-23页 |
| 1 研究背景与项目情况 | 第15页 |
| 2 miRNA的一般情况 | 第15-16页 |
| ·miRNA的生物合成过程 | 第15页 |
| ·miRNA的作用机制 | 第15页 |
| ·miRNA的生物学功能 | 第15-16页 |
| ·miRNA与恶性肿瘤的关系 | 第16页 |
| 3 课题研究的提出 | 第16-18页 |
| 4 miRNA的常用研究方法及其局限性 | 第18-19页 |
| 5 问题的提出及本文创新点 | 第19-21页 |
| ·问题的提出 | 第19-20页 |
| ·本文的创新点和贡献 | 第20-21页 |
| 6 论文的组织结构 | 第21-23页 |
| 第一部分 miRNA在结直肠癌组织中的异常表达 | 第23-37页 |
| ·结直肠癌相关miRNA的查寻 | 第24-25页 |
| ·材料和方法 | 第24页 |
| ·结果 | 第24-25页 |
| ·结直肠癌相关miRNA的表达 | 第25-34页 |
| ·主要试剂、材料 | 第25页 |
| ·仪器设备 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-29页 |
| ·动物组织标本的采集 | 第26页 |
| ·结直肠癌标本的收集 | 第26页 |
| ·结直肠癌标本的病理学检查 | 第26-27页 |
| ·组织样品总RNA抽提 | 第27-28页 |
| ·miRNA表达测序 | 第28页 |
| ·RNA核酸印迹(Northern Blot) | 第28-29页 |
| ·结果 | 第29-34页 |
| ·miR-143和miR-145在各器官组织内的正常表达 | 第29-30页 |
| ·结直肠癌标本相关信息 | 第30-32页 |
| ·结直肠癌标本的病理学确认 | 第32页 |
| ·miR-143/145等在结直肠癌组织中的异常表达 | 第32-33页 |
| ·miR-143/miR-145基因测序结果 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-37页 |
| 第二部分 miR143/miR-145在结直肠癌发病中的作用及靶标预测 | 第37-47页 |
| ·miR-145对结直肠癌细胞凋亡的调节作用 | 第37-40页 |
| ·主要试剂、材料 | 第37-38页 |
| ·仪器设备 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-39页 |
| ·结直肠癌细胞培养及转染 | 第38页 |
| ·流式细胞分析 | 第38-39页 |
| ·统计学分析 | 第39页 |
| ·结果 | 第39-40页 |
| ·miR-143对结直肠癌细胞增殖的调节作用 | 第40-41页 |
| ·主要试剂、材料 | 第40页 |
| ·仪器设备 | 第40页 |
| ·方法 | 第40页 |
| ·细胞培养及转染 | 第40页 |
| ·流式细胞分析 | 第40页 |
| ·统计学分析 | 第40页 |
| ·结果 | 第40-41页 |
| ·miR-145和miR-143靶标的预测 | 第41-43页 |
| ·材料与方法 | 第41-42页 |
| ·仪器设备 | 第41-42页 |
| ·生物信息学分析方法 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-43页 |
| ·KeyTar预测的mir-145靶标 | 第42页 |
| ·KeyTar预测的miR-143靶标 | 第42-43页 |
| ·KeyTar预测miR-145和miR-143靶标的准确率 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-47页 |
| 第三部分 miR-145对结直肠癌细胞中N-ras表达的调节作用 | 第47-57页 |
| ·试剂和材料 | 第48-49页 |
| ·仪器设备 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-52页 |
| ·pGL3-N-ras-CS、pGL3-N-ras-mutant-CS报告质粒的构建 | 第49-50页 |
| ·细胞培养及质粒转染 | 第50页 |
| ·读取荧光值 | 第50-51页 |
| ·统计学分析 | 第51页 |
| ·N-ras蛋白印迹(Western blot) | 第51-52页 |
| ·结果 | 第52-55页 |
| ·3UTR Luciferase实验结果 | 第52-53页 |
| ·N-ras 在结直肠癌组织及细胞系内表达水平上调 | 第53-54页 |
| ·miR-145下调N-ras的表达 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 第四部分 miR-143对结直肠癌细胞中ErbB3和K-ras表达的调节作用 | 第57-67页 |
| ·试剂、材料 | 第58页 |
| ·仪器设备 | 第58-59页 |
| ·方法 | 第59-60页 |
| ·pGL3-ErbB3-CS、pGL3-ErbB3-mutant-CS报告质粒的构建 | 第59页 |
| ·细胞培养及质粒转染 | 第59页 |
| ·读取荧光值 | 第59-60页 |
| ·ErbB3和K-ras蛋白印迹(Western blot) | 第60页 |
| ·结果 | 第60-64页 |
| ·3UTR Luciferase 实验结果 | 第60-61页 |
| ·ErbB3在结直肠癌中的表达水平 | 第61-62页 |
| ·miR-143下调ErbB3的表达 | 第62-63页 |
| ·K-ras在结直肠癌中的表达水平 | 第63页 |
| ·miR-143下调K-ras的表达 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-67页 |
| 论文小结 | 第67-73页 |
| 1 肿瘤相关miRNA研究存在的主要问题 | 第67-68页 |
| 2 本课题研究的内容和意义. | 第68-71页 |
| 3 后续工作 | 第71-73页 |
| 结直肠癌相关miRNA的研究综述 | 第73-87页 |
| 1 miRNA的生物合成及功能 | 第74-77页 |
| ·miRNA的生物合成过程 | 第74-75页 |
| ·miRNA的作用机制 | 第75页 |
| ·miRNA的生物学功能 | 第75-77页 |
| 2 miRNA的研究方法 | 第77-78页 |
| ·miRNA的鉴定 | 第77页 |
| ·miRNA表达水平的检测 | 第77-78页 |
| ·miRNA靶标的寻找 | 第78页 |
| ·miRNA靶标的验证 | 第78页 |
| 3 miRNA与肿瘤发生、发展的关系 | 第78-83页 |
| ·肿瘤细胞中存住着miRNA的异常表达 | 第79页 |
| ·miRNA的异常表达对肿瘤细胞活性的影响 | 第79-80页 |
| ·miRNA的异常表达与肿瘤发生的关系密切 | 第80页 |
| ·miRNA具有癌基因或抑癌基因的作用 | 第80-81页 |
| ·miRNA的异常表达与肿瘤诊断预后密切相关 | 第81-82页 |
| ·miRNA的异常表达与肿瘤浸润和转移相关 | 第82-83页 |
| 4 肿瘤细胞中miRNA表达水平改变的机制 | 第83-84页 |
| ·肿瘤细胞miRNA表达异常的一般机制 | 第83页 |
| ·表观遗传引起miRNA的表达异常 | 第83-84页 |
| 5 miRNA在结直肠癌中的研究概况 | 第84-87页 |
| 参考文献 | 第87-96页 |
| 致谢信 | 第96-98页 |
