| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-35页 |
| ·引言 | 第16-18页 |
| ·研究背景 | 第16-17页 |
| ·研究目的与意义 | 第17页 |
| ·项目来源与经费支持 | 第17-18页 |
| ·DNA甲基化研究现状 | 第18-23页 |
| ·胚性细胞系的DNA甲基化 | 第19页 |
| ·转座子与DNA甲基化变化 | 第19-20页 |
| ·DNA甲基化抑制剂 | 第20-21页 |
| ·基因编码区甲基化对转录的影响 | 第21页 |
| ·与DNA甲基化相关的组蛋白修饰 | 第21-22页 |
| ·基于大规模测序的DNA序列甲基化研究 | 第22页 |
| ·DNA甲基化影响转录机制 | 第22-23页 |
| ·DNA甲基转移酶研究进展 | 第23-32页 |
| ·MET1(DNA METHYLTRANSFERASE 1) | 第25-27页 |
| ·CMT3(Chromomethylase 3) | 第27-28页 |
| ·DRM(domains rearranged methylase) | 第28页 |
| ·DDM1(decrease in DNA methylation1) | 第28-31页 |
| ·DDM1 与DNA甲基化及MET1 的相互作用 | 第31-32页 |
| ·研究目标和主要研究内容 | 第32-34页 |
| ·研究目标 | 第32-33页 |
| ·主要研究内容 | 第33-34页 |
| ·研究技术路线 | 第34-35页 |
| 第二章 落叶松体细胞胚发生过程中DNA甲基化水平变化分析 | 第35-54页 |
| ·材料与方法 | 第35-39页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-39页 |
| ·实验结果 | 第39-49页 |
| ·DNA提取及检测结果 | 第39页 |
| ·双酶切结果 | 第39-40页 |
| ·预扩增结果 | 第40页 |
| ·筛选引物 | 第40-41页 |
| ·条带统计与分析 | 第41页 |
| ·体细胞胚发生时期对应总甲基化率的变化情况 | 第41-45页 |
| ·甲基化率的离差分析 | 第45-49页 |
| ·讨论 | 第49-52页 |
| ·与胚发育相关的DNA甲基化 | 第49-50页 |
| ·与位点有关的DNA甲基化 | 第50-51页 |
| ·DNA复制中的甲基化缺失机制 | 第51-52页 |
| ·其他影响DNA甲基化的因素 | 第52页 |
| ·小结 | 第52-54页 |
| 第三章 落叶松体细胞胚胎发生过程中DNA甲基化模式变化分析 | 第54-67页 |
| ·材料与方法 | 第54-57页 |
| ·实验材料 | 第54-55页 |
| ·主要试剂及配制 | 第55-56页 |
| ·差异条带回收测序 | 第56-57页 |
| ·实验结果 | 第57-64页 |
| ·相邻两时期的甲基化模式比较 | 第57-60页 |
| ·与原胚团时期相比甲基化模式变化分析 | 第60-64页 |
| ·讨论 | 第64-66页 |
| ·落叶松体细胞胚胎发生过程中存在着频繁的甲基化和去甲基化事件 | 第64-65页 |
| ·与原胚团时期相比，各体细胞胚胎发生时期也存在着频繁的超甲基化和去甲基化事件 | 第65页 |
| ·差异条带回收结果 | 第65-66页 |
| ·小结 | 第66-67页 |
| 第四章 落叶松体细胞胚DNA甲基转移酶MET1 全长cDNA克隆与系统进化分析 | 第67-87页 |
| ·材料与方法 | 第67-75页 |
| ·实验材料 | 第67-68页 |
| ·实验方法 | 第68-75页 |
| ·实验结果 | 第75-84页 |
| ·RNA提取 | 第75-76页 |
| ·UBQ验证反转录结果 | 第76页 |
| ·MET1 基因特异片段分析 | 第76-77页 |
| ·3' RACE和5' RACE扩增结果 | 第77-78页 |
| ·序列拼接与比对结果 | 第78-84页 |
| ·讨论 | 第84-85页 |
| ·反转录结果验证方法 | 第84页 |
| ·菌液PCR快速鉴定 | 第84页 |
| ·DNA甲基转移酶基因MET1 的分离方法 | 第84-85页 |
| ·DNA甲基转移酶基因MET1 的序列同源性 | 第85页 |
| ·小结 | 第85-87页 |
| 第五章 落叶松体细胞胚染色质重塑因子DDM1 全长cDNA克隆与系统进化分析 | 第87-94页 |
| ·材料与方法 | 第87-89页 |
| ·实验材料 | 第87页 |
| ·实验方法 | 第87-89页 |
| ·实验结果 | 第89-92页 |
| ·5' RACE结果 | 第89页 |
| ·序列拼接与ORF查找 | 第89-90页 |
| ·蛋白序列比对结果 | 第90-91页 |
| ·PFAM蛋白结构预测 | 第90页 |
| ·CDD蛋白结构域预测 | 第90-91页 |
| ·系统进化树构建 | 第91-92页 |
| ·讨论 | 第92页 |
| ·搜索SSH差减文库发现与DNA甲基化相关的基因片段 | 第92页 |
| ·DDM1 与MET1 的相互作用研究 | 第92页 |
| ·小结 | 第92-94页 |
| ·落叶松DDM1 蛋白结构域预测 | 第92-93页 |
| ·DDM1 系统进化树构建 | 第93-94页 |
| 第六章 结论 | 第94-96页 |
| ·结论 | 第94页 |
| ·创新点 | 第94-95页 |
| ·展望 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-103页 |
| 附录A 缩略词 | 第103-105页 |
| 附录B 回收差异片段的详细信息 | 第105-108页 |
| 在读期间的学术研究 | 第108-109页 |
| 致谢 | 第109页 |
