| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 1 前言 | 第8-21页 |
| ·基因治疗与基因载体 | 第8-10页 |
| ·非病毒载体 | 第10-19页 |
| ·裸DNA | 第10-11页 |
| ·脂质体以及其复合物 | 第11-12页 |
| ·阳离子多聚物 | 第12-13页 |
| ·壳聚糖作为基因递送载体的研究概况 | 第13-19页 |
| ·本课题的研究目的与意义 | 第19-20页 |
| ·实验流程图 | 第20-21页 |
| 2 壳聚糖/聚乳酸接枝共聚物的制备与表征 | 第21-32页 |
| ·实验材料与仪器 | 第21-22页 |
| ·主要实验材料 | 第21-22页 |
| ·实验仪器 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-25页 |
| ·壳聚糖的纯化与分子量的测定 | 第22-23页 |
| ·硅烷化壳聚糖的制备 | 第23-24页 |
| ·聚乳酸-g-硅烷化壳聚糖的制备 | 第24页 |
| ·硅烷基的脱除 | 第24页 |
| ·接枝共聚物的表征 | 第24-25页 |
| ·结果与讨论 | 第25-31页 |
| ·壳聚糖的分子量 | 第25页 |
| ·产物的结构分析 | 第25-31页 |
| ·本章小结 | 第31-32页 |
| 3 PLA-g-CS/DNA复合物颗粒的制备与表征 | 第32-48页 |
| ·实验材料与仪器 | 第32-34页 |
| ·实验材料 | 第32-33页 |
| ·溶液与微生物培养基的配制 | 第33页 |
| ·实验仪器 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-36页 |
| ·pEGFP-N1保护菌的复壮及扩大培养 | 第34页 |
| ·质粒的提取与纯化 | 第34-35页 |
| ·质粒DNA浓度及纯度的测定 | 第35页 |
| ·PLA-g-CS/DNA颗粒的制备 | 第35-36页 |
| ·PLA-g-CS/DNA颗粒激光散射分析与Zeta电位的测定 | 第36页 |
| ·PLA-g-CS/DNA颗粒原子力显微镜的测定 | 第36页 |
| ·PLA-g-CS/DNA颗粒粒径分析表征 | 第36-47页 |
| ·激光散射粒径分析 | 第36-42页 |
| ·PLA-g-CS/DNA复合物Zeta电位分析 | 第42-45页 |
| ·原子力显微镜粒径与形貌观察 | 第45-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 4 PLA-g-CS/DNA纳米颗粒的稳定性与细胞相容性 | 第48-59页 |
| ·实验材料与仪器 | 第48-49页 |
| ·实验试剂 | 第48页 |
| ·溶液的配制 | 第48-49页 |
| ·实验仪器 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·PLA-g-CS/DNA琼脂糖凝胶阻滞实验 | 第49页 |
| ·PLA-g-CS对DNA的保护作用 | 第49-50页 |
| ·PLA-g-CS/DNA的体外释放实验 | 第50页 |
| ·冻存细胞的培养与扩增 | 第50页 |
| ·PLA-g-CS的细胞毒性实验 | 第50-51页 |
| ·统计学处理 | 第51页 |
| ·结果分析 | 第51-57页 |
| ·琼脂糖凝胶阻滞实验 | 第51-53页 |
| ·PLA-g-CS/DNA复合物的体外释放实验 | 第53-54页 |
| ·PLA-g-CS的细胞毒性评价 | 第54-57页 |
| ·本章小结 | 第57-59页 |
| 5 PLA-g-CS/pEGFP-N1的细胞转染试验 | 第59-63页 |
| ·实验材料与设备 | 第59页 |
| ·实验材料 | 第59页 |
| ·实验仪器 | 第59页 |
| ·实验步骤 | 第59-60页 |
| ·PLA-g-CS/pEGFP-N1的细胞转染试验 | 第59-60页 |
| ·流式细胞仪检测转染效率 | 第60页 |
| ·结果分析 | 第60-62页 |
| ·流式细胞仪检测 | 第60-62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 6 结论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 附录 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
