| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-30页 |
| ·HBV及耐药 | 第13-15页 |
| ·HBV耐LAM/ADV机制及BCP区突变的临床意义 | 第15-22页 |
| ·LAM耐药 | 第15-18页 |
| ·ADV耐药 | 第18-20页 |
| ·HBV BCP区突变的临床意义 | 第20-22页 |
| ·HBV突变检测的方法 | 第22-29页 |
| ·直接测序法 | 第22-23页 |
| ·错配PCR和限制性片段长度多态·性分析技术 | 第23页 |
| ·基因芯片技术 | 第23-24页 |
| ·焦磷酸测序技术 | 第24页 |
| ·变性高效液相色谱 | 第24-25页 |
| ·荧光定量PCR技术与Allglo~(TM)探针 | 第25-29页 |
| ·本项研究的目的和意义 | 第29-30页 |
| 第二章 HBVLAM耐药突变多重荧光定量方法的建立及初步应用(模块一) | 第30-67页 |
| ·引言 | 第30-32页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·检测样本 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·主要耗材 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-52页 |
| ·样本处理及DNA提取 | 第33页 |
| ·LAM耐药位点 | 第33页 |
| ·LAM引物及Allglo~(TM)探针的设计 | 第33-37页 |
| ·对rtL180M、rtM204I/rtM204V探针和引物的分析 | 第37-48页 |
| ·PCR及DNA测序 | 第48-50页 |
| ·rt180L/rt180M和YMDD/YIDD/YVDD多重荧光定量PCR方法的建立 | 第50-52页 |
| ·实验结果 | 第52-65页 |
| ·rtL180M和rtM204I/rtM204V PCR产物测序 | 第52-54页 |
| ·rtL180M和rtM204I/rtM204V重组质粒鉴定 | 第54-58页 |
| ·rtL180M和rtM204I/rtM204V多重荧光定量方法的特异性 | 第58页 |
| ·rtL180M和rtM204I/rtM204V多重荧光定量方法的重复性 | 第58-59页 |
| ·rtL180M和rtM204I/rtM204V多重荧光定量方法的标准曲线和灵敏度 | 第59-61页 |
| ·rtL180M和rtM204I/rtM204V多重荧光定量方法的稳定性 | 第61-62页 |
| ·临床应用与方法评价 | 第62-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| 第三章 HBV ADV耐药突变多重荧光定量方法的建立及初步应用(模块二) | 第67-100页 |
| ·引言 | 第67-68页 |
| ·材料 | 第68-69页 |
| ·检测样本 | 第68页 |
| ·主要仪器 | 第68页 |
| ·主要耗材 | 第68-69页 |
| ·方法 | 第69-86页 |
| ·样本处理及DNA提取 | 第69页 |
| ·ADV耐药位点 | 第69页 |
| ·ADV引物及Allglo~(TM)探针的设计 | 第69-72页 |
| ·对rtA181V/T或rtN236T探针和引物的分析 | 第72-84页 |
| ·PCR及DNA测序 | 第84-85页 |
| ·基于Allglo~(TM)探针的多重荧光定量方法建立 | 第85页 |
| ·方法的性能试验 | 第85页 |
| ·方法的评价 | 第85-86页 |
| ·结果 | 第86-98页 |
| ·rt181A/rt181V/rt181T及rt236N/rt236T的PCR产物测序 | 第86-88页 |
| ·rt181A/rt181V/rt181T及rt236N/rt236T重组质粒鉴定 | 第88-91页 |
| ·rt181A/rt181V/rt181T和rt236N/rt236T多重荧光定量的特异性 | 第91-92页 |
| ·rt181A/rt181V/rt181和Trt236N/rt236T多重荧光定量的重复性 | 第92页 |
| ·rt181A/rt181V/rt181T和rt236N/rt236T多重荧光定量标准曲线 | 第92-95页 |
| ·rt181A/rt181V/rt181T和rt236N/rt236T多重荧光定量的稳定性 | 第95页 |
| ·临床应用与方法评价 | 第95-98页 |
| ·讨论 | 第98-100页 |
| 第四章 HBV BCP位点突变多重荧光定量方法的建立及初步应用(模块三) | 第100-119页 |
| ·引言 | 第100页 |
| ·材料 | 第100-101页 |
| ·检测样本 | 第100-101页 |
| ·主要仪器 | 第101页 |
| ·主要耗材 | 第101页 |
| ·方法 | 第101-111页 |
| ·样本处理及DNA提取 | 第101页 |
| ·BCP区的突变位点 | 第101-102页 |
| ·BCP区A1762T/G1764A引物及Allglo~(TM)探针的设计 | 第102-103页 |
| ·对BCP区A1762T/G1764A探针和引物的分析 | 第103-109页 |
| ·PCR及DNA测序 | 第109-110页 |
| ·基于Allglo~(TM)探针的多重荧光定量方法建立 | 第110页 |
| ·方法的性能试验 | 第110页 |
| ·方法的评价 | 第110-111页 |
| ·结果 | 第111-117页 |
| ·1762A/1764G和1762T/1764A的PCR产物测序 | 第111-112页 |
| ·1762A/1764G和1762T/1764A重组质粒鉴定 | 第112-113页 |
| ·1762A/1764G和1762T/1764A多重荧光定量方法的特异性 | 第113-114页 |
| ·1762A/1764G和1762T/1764A多重荧光定量方法的精密度 | 第114页 |
| ·1762A/1764G和1762T/1764A多重荧光定量标准曲线 | 第114-115页 |
| ·1762A/1764G和1762T/1764A多重荧光定量方法的稳定性 | 第115-116页 |
| ·临床应用与方法评价 | 第116-117页 |
| ·讨论 | 第117-119页 |
| 第五章 荧光定量模块化、多重、超灵敏检测平台技术的应用及展望 | 第119-122页 |
| ·技术简介 | 第119页 |
| ·应用实例 | 第119-121页 |
| ·技术难点 | 第121页 |
| ·创新与展望 | 第121-122页 |
| 参考文献 | 第122-134页 |
| 研究生期间发表的论文 | 第134页 |
| 研究生期间申请的专利 | 第134-135页 |
| 致谢 | 第135页 |
