| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-22页 |
| 引言 | 第22-26页 |
| 第一部分 脐带血神经干细胞的分离培养与鉴定 | 第26-42页 |
| 材料与方法 | 第26-31页 |
| 1 实验材料 | 第26-28页 |
| ·主要仪器设备 | 第26-27页 |
| ·主要实验材料 | 第27页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第27-28页 |
| ·主要试剂的配制 | 第28页 |
| 2.实验方法 | 第28-31页 |
| ·人脐血的收集及神经干细胞的分离 | 第29页 |
| ·神经干细胞的传代 | 第29页 |
| ·神经干细胞的鉴定 | 第29-30页 |
| ·神经干细胞增殖能力的检测 | 第30页 |
| ·神经干细胞分化的检测 | 第30-31页 |
| 结果 | 第31-32页 |
| 1 人脐血神经干细胞的原代及传代细胞形态学观察 | 第31页 |
| 2 脐血神经干细胞的鉴定 | 第31-32页 |
| 3 脐血神经干细胞增殖与分化的检测 | 第32页 |
| 讨论 | 第32-37页 |
| 1 神经干细胞的来源 | 第32-33页 |
| 2 神经干细胞的分离纯化 | 第33页 |
| 3 神经干细胞的扩增培养 | 第33-35页 |
| 4 神经干细胞的传代 | 第35页 |
| 5 神经干细胞的鉴定 | 第35-36页 |
| 6 神经干细胞的诱导分化 | 第36-37页 |
| 小结 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 第二部分 基因工程神经干细胞NSCs-IGF-1的获得与鉴定 | 第42-60页 |
| 材料与方法 | 第43-52页 |
| 1 实验材料 | 第43-46页 |
| ·主要仪器设备 | 第43-44页 |
| ·主要实验材料 | 第44页 |
| ·质粒、菌株及细胞 | 第44页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第44-45页 |
| ·主要试剂的配制 | 第45-46页 |
| 2 实验方法 | 第46-52页 |
| ·重组质粒pcDNA3.1-IGF-1的构建 | 第46-50页 |
| ·脐血神经干细胞G418最佳筛选浓度的测定 | 第50-51页 |
| ·重组质粒pcDNA3.1-IGF-1转染P3代脐血神经干细胞 | 第51页 |
| ·转基因神经干细胞的检测 | 第51-52页 |
| 结果 | 第52-53页 |
| 1 抽提的肝脏总RNA及PCR产物的鉴定 | 第52页 |
| 2 质粒pcDNA3.1和PCR产物分别双酶切 | 第52页 |
| 3 重组体pcDNA3.1-IGF-1测序及双酶切鉴定结果 | 第52-53页 |
| 4 G418最佳筛选浓度 | 第53页 |
| 5 重组质粒转染神经干细胞 | 第53页 |
| 6 RT-PCR检测IGF-1在基因转染神经干细胞中的表达 | 第53页 |
| 7 免疫荧光细胞化学检测基因转染NSCs | 第53页 |
| 讨论 | 第53-57页 |
| 小结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-60页 |
| 第三部分 基因工程神经干细胞NSCs-IGF-1移植对新生鼠缺氧缺血性脑损伤的影响 | 第60-76页 |
| 材料和方法 | 第61-65页 |
| 1 实验材料 | 第61页 |
| ·主要仪器设备 | 第61页 |
| ·主要实验材料 | 第61页 |
| ·主要试剂 | 第61页 |
| 2 实验方法 | 第61-65页 |
| ·新生大鼠缺血缺氧性脑损伤模型的建立 | 第61-62页 |
| ·动物模型基因工程神经干细胞NSCs-IGF-1的移植 | 第62页 |
| ·移植效果检测 | 第62-65页 |
| ·统计学分析 | 第65页 |
| 结果 | 第65-70页 |
| 1 移植细胞在宿主脑内存活情况 | 第65页 |
| 2.移植后脑组织病理形态学改变 | 第65-66页 |
| 3 SVZa区免疫阳性细胞表达情况 | 第66-68页 |
| 4 大鼠学习记忆能力测试结果 | 第68-69页 |
| 5 运动功能检测结果 | 第69-70页 |
| 讨论 | 第70-73页 |
| 小结 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-76页 |
| 全文总结 | 第76-77页 |
| 附图 | 第77-85页 |
| 综述 基因工程神经干细胞治疗缺氧缺血性脑损伤研究进展 | 第85-110页 |
| 参考文献 | 第103-110页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第110-112页 |
| 致谢 | 第112页 |
