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腺病毒介导诱导型一氧化氮合酶基因转染对膀胱移行细胞癌细胞的影响

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-16页
英文缩略词第16-18页
前言第18-21页
第一章 诱导型一氧化氮合酶重组腺病毒的构建及鉴定第21-52页
   ·引言第21-22页
   ·材料第22-24页
     ·菌种、质粒及细胞株第22页
     ·实验仪器第22页
     ·主要实验试剂第22-23页
     ·主要溶液配制第23-24页
   ·方法第24-39页
     ·pReceive-M29-iNOS质粒的鉴定第24-27页
     ·iNOS基因亚克隆至腺病毒穿梭载体pYr-adshuttle-1第27-32页
     ·采用LR体外同源重组将iNOS表达框克隆至腺病毒表达载体pAd/BL-DEST第32-35页
     ·重组腺病毒rAd-iNOS的包装第35-38页
     ·重组腺病毒rAd-iNOS的PCR鉴定第38-39页
     ·重组腺病毒rAd-iNOS的滴度测定第39页
   ·结果第39-48页
     ·pReceive-M29-iNOS质粒的鉴定结果第39-41页
     ·pYr-adshuttle-1-iNOS质粒的鉴定第41-43页
     ·重组腺病毒载体pAd-iNOS的鉴定第43-46页
     ·重组腺病毒载体rAd-iNOS的鉴定第46-47页
     ·重组腺病毒rAd-iNOS的扩增及滴度测定第47-48页
   ·讨论第48-51页
   ·结论第51-52页
第二章 重组腺病毒RAD-INOS对T24细胞凋亡的影响第52-71页
   ·引言第52-53页
   ·材料第53-54页
     ·细胞株及病毒第53页
     ·仪器第53页
     ·试剂及耗材第53-54页
   ·方法第54-62页
     ·细胞培养第54页
     ·重组腺病毒对T24细胞最适感染复数的测定第54-55页
     ·重组腺病毒rAd-iNOS感染膀胱癌细胞T24第55页
     ·RT-PCR检测各组细胞iNOS、p53的mRNA水平第55-58页
     ·Western检测各组细胞中INOS的表达第58-60页
     ·细胞培养液上清中总一氧化氮浓度的测定第60-61页
     ·细胞凋亡与坏死检测第61-62页
     ·Annexin V/PI流式细胞分析法检测细胞凋亡第62页
   ·结果第62-67页
     ·重组腺病毒对T24细胞的最适MOI第63页
     ·RT-PCR检测iNOS、p53基因mRNA的表达第63-64页
     ·Western检测iNOS、p53蛋白的表达第64页
     ·细胞培养液上清中NO浓度第64页
     ·细胞凋亡与坏死检测第64-67页
   ·讨论第67-70页
   ·结论第70-71页
第三章 重组腺病毒RAD-INOS对膀胱移行细胞癌细胞化疗药物敏感性研究第71-82页
   ·引言第71-72页
   ·材料第72页
     ·细胞株第72页
     ·仪器第72页
     ·试剂及耗材第72页
   ·方法第72-74页
     ·细胞培养第72-73页
     ·重组腺病毒rAd-iNOS联合HCPT对膀胱癌的杀伤作用第73页
     ·重组腺病毒rAd-iNOS联合THP对膀胱癌的杀伤作用第73页
     ·MTT法检测细胞生长情况第73-74页
     ·统计学方法第74页
   ·结果第74-79页
     ·重组腺病毒联合HCPT对人膀胱癌的体外杀伤作用第74-76页
     ·重组腺病毒联合THP对人膀胱癌的体外杀伤作用第76-79页
   ·讨论第79-81页
   ·结论第81-82页
小结第82-84页
参考文献第84-106页
在读期间发表论文及获奖情况第106-107页
致谢第107页

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