中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-16页 |
英文缩略词 | 第16-18页 |
前言 | 第18-21页 |
第一章 诱导型一氧化氮合酶重组腺病毒的构建及鉴定 | 第21-52页 |
·引言 | 第21-22页 |
·材料 | 第22-24页 |
·菌种、质粒及细胞株 | 第22页 |
·实验仪器 | 第22页 |
·主要实验试剂 | 第22-23页 |
·主要溶液配制 | 第23-24页 |
·方法 | 第24-39页 |
·pReceive-M29-iNOS质粒的鉴定 | 第24-27页 |
·iNOS基因亚克隆至腺病毒穿梭载体pYr-adshuttle-1 | 第27-32页 |
·采用LR体外同源重组将iNOS表达框克隆至腺病毒表达载体pAd/BL-DEST | 第32-35页 |
·重组腺病毒rAd-iNOS的包装 | 第35-38页 |
·重组腺病毒rAd-iNOS的PCR鉴定 | 第38-39页 |
·重组腺病毒rAd-iNOS的滴度测定 | 第39页 |
·结果 | 第39-48页 |
·pReceive-M29-iNOS质粒的鉴定结果 | 第39-41页 |
·pYr-adshuttle-1-iNOS质粒的鉴定 | 第41-43页 |
·重组腺病毒载体pAd-iNOS的鉴定 | 第43-46页 |
·重组腺病毒载体rAd-iNOS的鉴定 | 第46-47页 |
·重组腺病毒rAd-iNOS的扩增及滴度测定 | 第47-48页 |
·讨论 | 第48-51页 |
·结论 | 第51-52页 |
第二章 重组腺病毒RAD-INOS对T24细胞凋亡的影响 | 第52-71页 |
·引言 | 第52-53页 |
·材料 | 第53-54页 |
·细胞株及病毒 | 第53页 |
·仪器 | 第53页 |
·试剂及耗材 | 第53-54页 |
·方法 | 第54-62页 |
·细胞培养 | 第54页 |
·重组腺病毒对T24细胞最适感染复数的测定 | 第54-55页 |
·重组腺病毒rAd-iNOS感染膀胱癌细胞T24 | 第55页 |
·RT-PCR检测各组细胞iNOS、p53的mRNA水平 | 第55-58页 |
·Western检测各组细胞中INOS的表达 | 第58-60页 |
·细胞培养液上清中总一氧化氮浓度的测定 | 第60-61页 |
·细胞凋亡与坏死检测 | 第61-62页 |
·Annexin V/PI流式细胞分析法检测细胞凋亡 | 第62页 |
·结果 | 第62-67页 |
·重组腺病毒对T24细胞的最适MOI | 第63页 |
·RT-PCR检测iNOS、p53基因mRNA的表达 | 第63-64页 |
·Western检测iNOS、p53蛋白的表达 | 第64页 |
·细胞培养液上清中NO浓度 | 第64页 |
·细胞凋亡与坏死检测 | 第64-67页 |
·讨论 | 第67-70页 |
·结论 | 第70-71页 |
第三章 重组腺病毒RAD-INOS对膀胱移行细胞癌细胞化疗药物敏感性研究 | 第71-82页 |
·引言 | 第71-72页 |
·材料 | 第72页 |
·细胞株 | 第72页 |
·仪器 | 第72页 |
·试剂及耗材 | 第72页 |
·方法 | 第72-74页 |
·细胞培养 | 第72-73页 |
·重组腺病毒rAd-iNOS联合HCPT对膀胱癌的杀伤作用 | 第73页 |
·重组腺病毒rAd-iNOS联合THP对膀胱癌的杀伤作用 | 第73页 |
·MTT法检测细胞生长情况 | 第73-74页 |
·统计学方法 | 第74页 |
·结果 | 第74-79页 |
·重组腺病毒联合HCPT对人膀胱癌的体外杀伤作用 | 第74-76页 |
·重组腺病毒联合THP对人膀胱癌的体外杀伤作用 | 第76-79页 |
·讨论 | 第79-81页 |
·结论 | 第81-82页 |
小结 | 第82-84页 |
参考文献 | 第84-106页 |
在读期间发表论文及获奖情况 | 第106-107页 |
致谢 | 第107页 |