| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-28页 |
| 1 杜仲研究 | 第13-18页 |
| 1.1 杜仲生物学形态 | 第13页 |
| 1.2 杜仲的化学成分 | 第13-15页 |
| 1.3 杜仲的药理作用 | 第15-18页 |
| 2 Dirigent蛋白的分子特性与功能 | 第18-22页 |
| 2.1 Dirigent蛋白的分类 | 第18页 |
| 2.2 Dirigent蛋白的分子结构 | 第18-20页 |
| 2.3 参与木脂素和木质素的形成 | 第20-21页 |
| 2.4 参与棉酚的形成 | 第21-22页 |
| 2.5 参与抗病虫及逆境反应 | 第22页 |
| 3 EuDIR1蛋白生物信息学分析 | 第22-27页 |
| 3.1 EuDIR1蛋白基本理化性质预测 | 第22-25页 |
| 3.2 EuDIR1蛋白空间结构预测 | 第25-26页 |
| 3.3 EuDIR1蛋白进化预测 | 第26-27页 |
| 4 本研究的目的及意义 | 第27-28页 |
| 第二章 EuDIR1基因的原核表达、纯化及功能分析 | 第28-54页 |
| 1 引言 | 第28-29页 |
| 2 实验材料 | 第29-34页 |
| 2.1 植株、菌株与载体材料 | 第29页 |
| 2.2 实验主要试剂 | 第29页 |
| 2.3 实验主要仪器 | 第29-30页 |
| 2.4 引物设计 | 第30-31页 |
| 2.5 试剂配制 | 第31-34页 |
| 3 实验方法 | 第34-46页 |
| 3.1 原核表达载体构建 | 第34-39页 |
| 3.2 诱导含有pET-30a-EuDIR1质粒的E.coliBL21(DE3)菌株表达 | 第39-40页 |
| 3.3 诱导含有pMCSG19-EuDIR1质粒的E.coliBL21(DE3)菌株表达 | 第40页 |
| 3.4 SDS-PAGE电泳检测蛋白表达 | 第40-42页 |
| 3.5 重组蛋白的纯化 | 第42-43页 |
| 3.6 纯化蛋白透析复性分析 | 第43页 |
| 3.7 目的蛋白的验证分析 | 第43-44页 |
| 3.8 考马斯亮蓝G-250测蛋白质浓度 | 第44-45页 |
| 3.9 松柏醇偶合分析 | 第45-46页 |
| 3.10 EuDIR1重组蛋白抑菌分析 | 第46页 |
| 4 实验结果与分析 | 第46-53页 |
| 4.1 原核表达载体的构建 | 第46-47页 |
| 4.2 重组蛋白的诱导表达 | 第47-48页 |
| 4.3 重组蛋白表达模式分析 | 第48-49页 |
| 4.4 重组蛋白的变性与纯化 | 第49-50页 |
| 4.5 重组蛋白透析复性 | 第50页 |
| 4.6 目的蛋白的验证 | 第50-51页 |
| 4.7 纯化蛋白的浓度测定 | 第51-52页 |
| 4.8 EuDIR1重组蛋白指导松脂醇形成 | 第52页 |
| 4.9 EuDIR1重组蛋白抑菌活性 | 第52-53页 |
| 5 讨论与小结 | 第53-54页 |
| 第三章 EuDIR1基因对杜仲遗传转化 | 第54-63页 |
| 1 实验材料 | 第54-55页 |
| 1.1 植物材料 | 第54页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第54页 |
| 1.3 主要溶液的配制 | 第54-55页 |
| 2 实验方法 | 第55-60页 |
| 2.1 植物过表达载体pSH737-35S-EuDIR1的构建 | 第55-56页 |
| 2.2 制备农杆菌感受态 | 第56页 |
| 2.3 重组质粒pSH737-35S-EuDIR1转化 | 第56页 |
| 2.4 EuDIR1基因过表达杜仲植株的获得 | 第56-57页 |
| 2.5 EuDIR1基因的表达规律 | 第57-60页 |
| 3 结果与分析 | 第60-62页 |
| 3.1 植物过表达载体pSH737-35S-EuDIR1构建 | 第60页 |
| 3.2 EuDIR1基因过表达杜仲植株的再生 | 第60-61页 |
| 3.3 RNA提取分析 | 第61-62页 |
| 3.4 cDNA的合成 | 第62页 |
| 3.5 EuDIR1基因表达水平分析 | 第62页 |
| 4 讨论与小结 | 第62-63页 |
| 第四章 结论 | 第63-64页 |
| 1 主要结论 | 第63页 |
| 2 创新 | 第63页 |
| 3 不足和展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 附录 | 第71-76页 |
