摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
1 前言 | 第13-19页 |
1.1 肌肉卫星细胞的功能概述 | 第13-14页 |
1.2 ELOVL3的简介 | 第14-15页 |
1.2.1 ELOVL3的基因结构 | 第14页 |
1.2.2 ELOVL3的功能 | 第14-15页 |
1.3 脂肪酸在肌肉细胞中的作用 | 第15-16页 |
1.3.1 脂肪酸与肌肉发育 | 第15页 |
1.3.2 脂肪酸与脂滴 | 第15-16页 |
1.3.3 脂滴与肌肉细胞 | 第16页 |
1.4 CRISPR/Cas9系统 | 第16-18页 |
1.4.1 CRISPRi与CRISPRa | 第16-18页 |
1.5 目的与意义 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-31页 |
2.1 实验材料 | 第19-22页 |
2.1.1 细胞株和实验动物 | 第19页 |
2.1.2 质粒和菌株 | 第19页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第19-20页 |
2.1.4 数据分析软件 | 第20页 |
2.1.5 实验试剂 | 第20-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-30页 |
2.2.1 牛MDSCs的分离、培养和诱导分化 | 第22-23页 |
2.2.2 外源脂肪酸对牛MDSCs分化的影响 | 第23-24页 |
2.2.3 外源脂肪酸对牛MDSCs细胞周期和增殖的影响 | 第24-25页 |
2.2.4 激活ELOVL3对牛MDSCs分化的影响 | 第25-28页 |
2.2.5 干扰ELOVL3对牛MDSCs分化的影响 | 第28-29页 |
2.2.6 干扰ELOVL3对外源脂肪酸功能的影响 | 第29-30页 |
2.2.7 ELOVL3与脂滴在牛MDSCs中的亚细胞定位 | 第30页 |
2.3 统计分析 | 第30-31页 |
3 实验结果 | 第31-44页 |
3.1 外源脂肪酸对牛MDSCs分化的影响 | 第31-32页 |
3.1.1 外源脂肪酸对牛MDSCs分化形态的影响 | 第31-32页 |
3.1.2 外源脂肪酸对ELOVL3、MYOG和MYH3表达量的影响 | 第32页 |
3.2 外源脂肪酸对牛MDSCs细胞周期和增殖的影响 | 第32-33页 |
3.2.1 外源脂肪酸对牛MDSCs细胞周期的影响 | 第32-33页 |
3.2.2 外源脂肪酸对牛MDSCs增殖的影响 | 第33页 |
3.3 ELOVL3在牛MDSCs分化过程中的表达规律 | 第33-35页 |
3.4 激活ELOVL3对牛MDSCs分化的影响 | 第35-38页 |
3.4.1 ELOVL3激活载体的构建及筛选 | 第35-36页 |
3.4.2 激活ELOVL3对牛MDSCs分化形态的影响 | 第36-37页 |
3.4.3 激活ELOVL3对MYOG和MYH3表达量的影响 | 第37-38页 |
3.5 干扰ELOVL3对牛MDSCs分化的影响 | 第38-40页 |
3.5.1 ELOVL3的siRNAs干扰片段的合成及筛选 | 第38页 |
3.5.2 干扰ELOVL3对牛MDSCs分化形态的影响 | 第38-39页 |
3.5.3 干扰ELOVL3对MYOG和MYH3表达量的影响 | 第39-40页 |
3.6 干扰ELOVL3对脂肪酸功能的影响 | 第40-42页 |
3.6.1 添加外源脂肪酸的同时干扰ELOVL3对牛MDSCs分化形态的影响 | 第40-41页 |
3.6.2 添加外源脂肪酸的同时干扰ELOVL3对MYOG和MYH3表达量的影响 | 第41-42页 |
3.7 ELOVL3与脂滴在牛MDSCs中的亚细胞定位 | 第42-44页 |
4 讨论 | 第44-47页 |
4.1 脂肪酸在牛MDSCs中的作用 | 第44-45页 |
4.2 ELOVL3在牛MDSCs中的表达及作用 | 第45页 |
4.3 ELOVL3在脂肪酸促进牛MDSCs分化中的作用 | 第45-46页 |
4.4 ELOVL3与脂滴的共定位 | 第46-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
5.1 主要结论 | 第47页 |
5.2 本研究的创新点 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-55页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55页 |