| 摘要 | 第5-8页 |
| abstract | 第8-12页 |
| 缩写词 | 第13-19页 |
| 第一章 绪论 | 第19-36页 |
| 1.1 中枢神经系统感染的基本概况 | 第19-21页 |
| 1.1.1 病原体进入中枢神经系统的途径 | 第19-20页 |
| 1.1.2 中枢神经系统感染的发病机制与临床 | 第20-21页 |
| 1.2 中枢神经系统感染与血脑屏障功能异常 | 第21-23页 |
| 1.2.1 炎症造成血脑屏障受损的病理生理学基础 | 第21-22页 |
| 1.2.2 血脑屏障与炎性因子 | 第22-23页 |
| 1.2.3 炎性反应引起代谢紊乱加重中枢神经系统损害 | 第23页 |
| 1.3 血脑屏障与脑微血管内皮细胞 | 第23-26页 |
| 1.3.1 脑微血管内皮细胞的基本概况 | 第23-24页 |
| 1.3.2 内皮细胞与紧密连接 | 第24-26页 |
| 1.3.3 内皮细胞与信号通路 | 第26页 |
| 1.4 脂多糖(LPS)/TLR4介导的NF-kB炎性信号 | 第26-30页 |
| 1.4.1 Toll样受体与脂多糖 | 第26-27页 |
| 1.4.2 TLR4介导的信号通路 | 第27-28页 |
| 1.4.3 TLR4信号通路的负调节 | 第28-30页 |
| 1.5 P120连环蛋白 | 第30-36页 |
| 1.5.1 P120连环蛋白与钙粘蛋白 | 第31页 |
| 1.5.2 P120连环蛋白与RhoGTPase | 第31-33页 |
| 1.5.3 P120连环蛋白与炎症信号通路 | 第33-36页 |
| 第二章 研究目的、实验方案及意义 | 第36-43页 |
| 2.1 研究目的 | 第36-38页 |
| 2.1.1 确定P120ctn影响血管内皮细胞紧密连接并探讨机制 | 第36页 |
| 2.1.2 确定P120ctn影响血管内皮细胞炎性反应 | 第36-37页 |
| 2.1.3 P120ctn与NF-κB激活的相关性探讨 | 第37-38页 |
| 2.2 实验方案设计 | 第38-42页 |
| 2.2.1 通过体外脂多糖刺激血管内皮细胞评估其渗透性 | 第38-39页 |
| 2.2.2 紧密连接蛋白与P120连环蛋白的相关性 | 第39-40页 |
| 2.2.3 研究P120连环蛋白在单核细胞迁移及细胞因子表达中的影响 | 第40-41页 |
| 2.2.4 探索P120连环蛋白影响炎症反应的机制 | 第41-42页 |
| 2.3 研究意义 | 第42-43页 |
| 第三章 P120ctn通过紧密连接影响血脑屏障的完整性 | 第43-66页 |
| 3.1 实验材料 | 第43-47页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第43页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第43-47页 |
| 3.1.2.1 本章内容所使用的抗体的种类、公司来源和使用范围 | 第43-44页 |
| 3.1.2.2 实验所用主要试剂 | 第44-45页 |
| 3.1.2.3 主要配置的试剂 | 第45-46页 |
| 3.1.2.4 主要仪器 | 第46-47页 |
| 3.2 实验方法 | 第47-54页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第47-48页 |
| 3.2.2 体外检测血脑屏障的渗透性 | 第48页 |
| 3.2.3 蛋白印迹分析法分别检测P120ctn及紧密连接蛋白occludin、cldudin-5的蛋白水平 | 第48-50页 |
| 3.2.4 腺病毒方法在人脑微血管内皮细胞中过表达P120连环蛋白 | 第50-51页 |
| 3.2.5 通过RNA干扰技术敲低目的蛋白P120连环蛋白 | 第51页 |
| 3.2.6 real timePCR法检测P120ctn mRNA的水平 | 第51-54页 |
| 3.3 统计学分析 | 第54页 |
| 3.4 结果 | 第54-63页 |
| 3.4.1 脂多糖刺激可以诱导P120连环蛋白表达减少破坏血脑屏障完整性 | 第54-58页 |
| 3.4.1.1 脂多糖刺激导致P120连环蛋白减少 | 第54-55页 |
| 3.4.1.2 脂多糖处理可以导致血脑屏障紊乱并且与P120ctn成相关性 | 第55-56页 |
| 3.4.1.3 脂多糖刺激细胞后紧密连接蛋白异常并与P120ctn呈相关性 | 第56-58页 |
| 3.4.2 P120连环蛋白通过影响紧密连接改变血脑屏障的完整性 | 第58-63页 |
| 3.4.2.1 敲低P120ctn可以改变细胞紧密连接导致血脑屏障的紊乱 | 第58-61页 |
| 3.4.2.2 过表达P120ctn可以促进紧密连接从而促进血脑屏障完整性 | 第61-63页 |
| 3.5 讨论 | 第63-66页 |
| 第四章 P120连环蛋白通过ikkβ/iκbα信号通路影响脂多糖诱导的NF-κB的激活 | 第66-92页 |
| 4.1 实验材料及器材 | 第66-69页 |
| 4.1.1 细胞株 | 第66页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第66-69页 |
| 4.1.2.1 本章内容所使用的抗体的种类、公司来源和使用范围 | 第66-67页 |
| 4.1.2.2 主要试剂 | 第67-68页 |
| 4.1.2.3 主要配置的试剂 | 第68页 |
| 4.1.2.4 主要仪器 | 第68-69页 |
| 4.2 实验方法 | 第69-76页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第69页 |
| 4.2.2 单核细胞分离以及迁移实验 | 第69-70页 |
| 4.2.3 real timePCR的方法检测MCP-1,IL-1β,CXCL1,ICAM-1,VCAM-1,E-selectin的mRNA水平 | 第70-72页 |
| 4.2.4 瞬时转染以及荧光素酶报告基因实验 | 第72-73页 |
| 4.2.5 核质分离检测NF-κB活性 | 第73-74页 |
| 4.2.6 蛋白印迹分析法分别核质内p65、p50含量,检测胞浆内piκbα、iκbα、pikkβ含量 | 第74-76页 |
| 4.3 统计学分析 | 第76页 |
| 4.4 结果 | 第76-88页 |
| 4.4.1 P120连环蛋白会影响单核细胞的跨内皮细胞迁移 | 第76-77页 |
| 4.4.2 P120连环蛋白能够影响脂多糖诱导的脑微血管内皮细胞炎症反应 | 第77-81页 |
| 4.4.2.1 敲低P120连环蛋白可以增强内皮细胞分泌细胞因子 | 第77-79页 |
| 4.4.2.2 过表达P120连环蛋白可以抑制内皮细胞分泌细胞因子 | 第79-81页 |
| 4.4.3 P120连环蛋白通过ikkβ/iκbα信号通路控制脂多糖诱导的NF-κB的激活 | 第81-88页 |
| 4.4.3.1 过表达P120连环蛋白抑制ikkβ/iκbα信号通路从而抑制脂多糖诱导的NF-κB的激活 | 第81-85页 |
| 4.4.3.2 敲低P120连环蛋白促进ikkβ/iκbα信号通路从而促进脂多糖诱导的NF-κΒ的激活 | 第85-88页 |
| 4.5 讨论 | 第88-92页 |
| 第五章 结论与展望 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 在学期间取得的科研成果 | 第111页 |
