| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-13页 |
| 绪论 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-27页 |
| 1. 菲牛蛭研究进展 | 第15-16页 |
| 1.1 人工养殖及采收加工 | 第15页 |
| 1.2 抗凝活性成分及相关基因 | 第15-16页 |
| 1.3 药理作用 | 第16页 |
| 2. 蛭类抗凝成分研究进展 | 第16-23页 |
| 2.1 凝血酶抑制剂 | 第17-18页 |
| 2.2 Xa因子抑制剂 | 第18-21页 |
| 2.3 血小板聚集抑制剂 | 第21-23页 |
| 3. 蛭类药理作用研究进展 | 第23-24页 |
| 3.1 抗凝、抗血栓 | 第23页 |
| 3.2 抗肿瘤 | 第23页 |
| 3.3 抗纤维化 | 第23-24页 |
| 3.4 抗炎 | 第24页 |
| 3.5 脑保护 | 第24页 |
| 4. 蛭类抗凝血酶活性影响因素研究进展 | 第24-25页 |
| 4.1 物种差异 | 第24-25页 |
| 4.2 生长环境 | 第25页 |
| 4.3 采收时间 | 第25页 |
| 4.4 加工炮制 | 第25页 |
| 5. 本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
| 第二章 采收及加工方法对菲牛蛭抗凝血酶活性的影响 | 第27-37页 |
| 1. 材料与方法 | 第27-30页 |
| 1.1 材料 | 第27-28页 |
| 1.2 实验方法 | 第28-30页 |
| 1.3 检测方法 | 第30页 |
| 1.4 数据处理 | 第30页 |
| 2 结果 | 第30-32页 |
| 2.1 加工方法对菲牛蛭抗凝血酶活性的影响 | 第30-31页 |
| 2.2 不同部位对菲牛蛭抗凝血酶活性的影响 | 第31-32页 |
| 2.3 体重级别对菲牛蛭抗凝血酶活性的影响 | 第32页 |
| 3. 讨论 | 第32-37页 |
| 3.1 加工方法对菲牛蛭抗凝血酶活性的影响 | 第32-33页 |
| 3.2 不同部位对菲牛蛭抗凝血酶活性的影响 | 第33-34页 |
| 3.3 体重级别对菲牛蛭抗凝血酶活性的影响 | 第34页 |
| 3.4 菲牛蛭药用价值探讨 | 第34-37页 |
| 第三章 菲牛蛭不同吸食阶段各组织抗凝血酶活性研究 | 第37-43页 |
| 1. 材料与方法 | 第37-38页 |
| 1.1 材料 | 第37页 |
| 1.2 实验方法 | 第37-38页 |
| 1.3 检测方法 | 第38页 |
| 1.4 数据处理 | 第38页 |
| 2 结果 | 第38-40页 |
| 2.1 吸食阶段对菲牛各组织抗凝血酶活性的影响 | 第38-40页 |
| 3. 讨论 | 第40-43页 |
| 3.1 菲牛蛭抗凝血酶活性组织分布规律 | 第40-41页 |
| 3.2 吸食阶段对菲牛蛭各组织抗凝血酶活性的影响 | 第41-43页 |
| 第四章 菲牛蛭Eglin C基因的克隆及表达分析 | 第43-61页 |
| 第一节 菲牛蛭Eglin C基因的克隆 | 第44-52页 |
| 1. 实验材料 | 第44页 |
| 1.1 材料 | 第44页 |
| 1.2 实验试剂 | 第44页 |
| 1.3 引物设计 | 第44页 |
| 2. 实验方法 | 第44-48页 |
| 2.1 总RNA的提取与鉴定 | 第44-45页 |
| 2.2 cDNA第一链合成 | 第45-46页 |
| 2.3 目的基因克隆 | 第46-48页 |
| 3. 结果与分析 | 第48-51页 |
| 3.1 RNA提取和反转录 | 第48页 |
| 3.2 Eglin C基因的克隆 | 第48-49页 |
| 3.3 生物信息学分析 | 第49-50页 |
| 3.4 系统进化树分析 | 第50-51页 |
| 4. 讨论 | 第51-52页 |
| 第二节 PME基因的表达分析 | 第52-61页 |
| 1. 实验材料 | 第52页 |
| 1.1 材料 | 第52页 |
| 1.2 实验仪器 | 第52页 |
| 1.3 实验试剂 | 第52页 |
| 2. 实验方法 | 第52-54页 |
| 2.1 菲牛蛭组织材料准备及总RNA的提取 | 第53页 |
| 2.2 RNA质量的鉴定 | 第53页 |
| 2.3 PCR检测引物 | 第53-54页 |
| 2.4 实时荧光定量测定PME表达量 | 第54页 |
| 3. 结果与分析 | 第54-58页 |
| 3.1 RNA提取质量鉴定 | 第54页 |
| 3.2 引物检测结果 | 第54-55页 |
| 3.3 PME表达量特征分析 | 第55-58页 |
| 4. 讨论 | 第58-61页 |
| 4.1 PME基因组织表达特征 | 第58页 |
| 4.2 PME基因吸食阶段表达特征 | 第58-59页 |
| 4.3 PME基因和抗凝血酶活性的相关性 | 第59-61页 |
| 第五章 菲牛蛭Guamerin基因的克隆及表达分析 | 第61-81页 |
| 第一节 菲牛蛭Guamerin基因的克隆 | 第62-69页 |
| 1. 实验材料 | 第62页 |
| 1.1 材料 | 第62页 |
| 1.2 试验试剂 | 第62页 |
| 1.3 引物设计 | 第62页 |
| 2. 实验方法 | 第62-64页 |
| 2.1 总RNA的提取与鉴定 | 第62-63页 |
| 2.2 cDNA第一链合成 | 第63页 |
| 2.3 目的基因克隆 | 第63-64页 |
| 3. 结果与分析 | 第64-68页 |
| 3.1 RNA提取和反转录 | 第64-65页 |
| 3.2 Guamerin基因的克隆 | 第65页 |
| 3.3 生物信息学分析 | 第65-67页 |
| 3.4 系统进化树分析 | 第67-68页 |
| 4. 讨论 | 第68-69页 |
| 第二节 菲牛蛭Guamerin基因的表达分析 | 第69-81页 |
| 1. 实验材料 | 第69-70页 |
| 1.1 试验材料 | 第69页 |
| 1.2 实验仪器 | 第69页 |
| 1.3 实验试剂 | 第69-70页 |
| 2. 实验方法 | 第70-71页 |
| 2.1 实验材料准备及总RNA的提取 | 第70页 |
| 2.2 RNA质量的鉴定 | 第70页 |
| 2.3 PCR检测引物 | 第70页 |
| 2.4 实时荧光定量测定PMG1及PMG2表达量 | 第70-71页 |
| 3. 结果与分析 | 第71-78页 |
| 3.1 RNA提取质量鉴定 | 第71页 |
| 3.2 引物检测结果 | 第71-72页 |
| 3.3 PMG1表达量特征分析 | 第72-75页 |
| 3.4 PMG2表达量特征分析 | 第75-78页 |
| 4. 讨论 | 第78-81页 |
| 4.1 PMG1和PMG2基因组织表达特征 | 第78-79页 |
| 4.2 PMG1和PMG2基因吸食阶段表达特征 | 第79-80页 |
| 4.3 PMG1和PMG2基因与抗凝血酶活性的相关性 | 第80-81页 |
| 结论与创新点 | 第81-83页 |
| 1 全文结论 | 第81页 |
| 2 创新点 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-95页 |
| 致谢 | 第95-97页 |
| 发表论文情况及专利申请情况 | 第97页 |