| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-25页 |
| 1.1 苏云金芽胞杆菌 | 第13-18页 |
| 1.1.1 Bt杀虫晶体蛋白基因的分类 | 第13-14页 |
| 1.1.2 Bt杀虫晶体蛋白的结构和功能 | 第14-15页 |
| 1.1.3 Bt杀虫晶体蛋白作用机制 | 第15-17页 |
| 1.1.4 Bt crylAh基因 | 第17-18页 |
| 1.2 Bt基因在转基因植物中的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3 提高Bt基因在转基因植物中表达的措施 | 第20-23页 |
| 1.3.1 植物特异性启动子的表达调控 | 第21页 |
| 1.3.2 异源表达基因的改造和修饰 | 第21页 |
| 1.3.3 植物中定位信号提高外源基因表达产物的积累量 | 第21-22页 |
| 1.3.4 降低插入位置不同对基因表达造成的影响 | 第22-23页 |
| 1.3.5 将外源基因整合到细胞核外基因组中 | 第23页 |
| 1.3.6 内含子增强作用提高外源基因的表达 | 第23页 |
| 1.4 本研究的立题依据和目的意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第25-26页 |
| 2.1.2 试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.3 供试昆虫 | 第27-28页 |
| 2.1.4 植物材料 | 第28页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第28页 |
| 2.2 研究方法 | 第28-47页 |
| 2.2.1 菌种活化 | 第28页 |
| 2.2.2 E.coli质粒DNA提取 | 第28-29页 |
| 2.2.3 酶切体系 | 第29-30页 |
| 2.2.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第30页 |
| 2.2.5 DNA回收 | 第30-31页 |
| 2.2.6 连接反应 | 第31页 |
| 2.2.7 E.coli感受态细胞制备 | 第31页 |
| 2.2.8 大肠杆菌转化 | 第31-32页 |
| 2.2.9 PCR反应 | 第32页 |
| 2.2.10 PCR产物纯化 | 第32页 |
| 2.2.11 cry1Ah1杀虫基因的优化和人工合成 | 第32-33页 |
| 2.2.12 改造后的cry1Ah1基因在大肠杆菌中的表达 | 第33-36页 |
| 2.2.13 植物表达载体构建和水稻的遗传转化 | 第36-39页 |
| 2.2.14 转基因植株的分子生物学检测 | 第39-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-65页 |
| 3.1 Bt cry1Ah1杀虫基因的优化与合成 | 第47-52页 |
| 3.1.1 设计的cry1Ah1基因的优化和修饰序列 | 第47页 |
| 3.1.2 五种方案优化后的cry1Ah1基因与原始序列的比较 | 第47-52页 |
| 3.2 改造后基因的原核表达 | 第52-55页 |
| 3.2.1 原核表达载体pEB1Ah1载体的构建 | 第52页 |
| 3.2.2 原核表达蛋白的可溶性分析 | 第52-53页 |
| 3.2.3 表达蛋白的杀虫活性测定 | 第53-55页 |
| 3.3 水稻的遗传转化及转基因植株的分子生物学检测 | 第55-65页 |
| 3.3.1 水稻转化苗的获得 | 第55-56页 |
| 3.3.2 转化植株的分子生物学检测 | 第56-65页 |
| 4 讨论 | 第65-68页 |
| 5 结论 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-77页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第77页 |
