中文摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第9-20页 |
1.1 放射治疗的重要性与危害性 | 第9-10页 |
1.1.1 放射治疗的重要性 | 第9页 |
1.1.2 放射治疗的毒副作用 | 第9-10页 |
1.2 氧自由基的概述 | 第10-12页 |
1.2.1 氧自由基的产生来源和种类 | 第10-11页 |
1.2.2 活性氧自由基对机体的损伤 | 第11-12页 |
1.3 放射治疗防护剂 | 第12-13页 |
1.4 超氧化物歧化酶 | 第13-15页 |
1.5 MnSOD | 第15-16页 |
1.5.1 MnSOD的基本情况 | 第15-16页 |
1.5.2 MnSOD的抗氧化损伤作用 | 第16页 |
1.6 MnSOD的放射防护作用 | 第16-18页 |
1.6.1 转基因 | 第16-17页 |
1.6.2 融合穿膜肽 | 第17页 |
1.6.3 将前导肽作为穿膜肽 | 第17-18页 |
1.7 课题来源及意义 | 第18-19页 |
1.8 课题研究内容 | 第19-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-35页 |
2.1 实验材料 | 第20-24页 |
2.1.1 实验细胞株、动物、质粒、菌株 | 第20页 |
2.1.2 主要试剂药品 | 第20-21页 |
2.1.3 常用溶液和缓冲液的配制 | 第21-24页 |
2.2 实验仪器和设备 | 第24-27页 |
2.3 实验方法 | 第27-35页 |
2.3.1 pGEX-4T-1-MnSOD原核表达载体的构建 | 第27页 |
2.3.2 重组大肠杆菌的扩培和冻存 | 第27页 |
2.3.3 GST-MTS-MnSOD融合蛋白的诱导表达 | 第27-29页 |
2.3.3.1 GST-MTS-MnSOD融合蛋白不同诱导时间的表达 | 第27-28页 |
2.3.3.2 GST-MTS-MnSOD融合蛋白不同诱导温度的表达 | 第28页 |
2.3.3.3 GST-MTS-MnSOD融合蛋白不同锰离子浓度的表达 | 第28-29页 |
2.3.4 GST-MTS-MnSOD融合蛋白与MTS-MnSOD重组蛋白的纯化与鉴定 | 第29-31页 |
2.3.4.1 GST-MTS-MnSOD融合蛋白的纯化与鉴定 | 第29-30页 |
2.3.4.2 MTS-MnSOD重组蛋白的纯化与鉴定 | 第30-31页 |
2.3.5 GST-MTS-MnSOD融合蛋白与MTS-MnSOD重组蛋白的稳定性 | 第31-32页 |
2.3.5.1 不同温度下两种蛋白的的稳定性特征 | 第31页 |
2.3.5.2 不同pH下两种蛋白的的稳定性特征 | 第31-32页 |
2.3.6 GST-MTS-MnSOD与MTS-MnSOD两种蛋白的跨膜效应 | 第32页 |
2.3.7 WST法测定GST-MTS-MnSOD与MTS-MnSOD两种蛋白的细胞毒性 | 第32页 |
2.3.8 GST-MTS-MnSOD与MTS-MnSOD两种蛋白的放射防护效应 | 第32-35页 |
2.3.8.1 小鼠放射损伤模型与生长观察 | 第32-33页 |
2.3.8.2 体重增长变化率 | 第33页 |
2.3.8.3 对小鼠造血系统急性损伤的保护作用(外周血白细胞数) | 第33-34页 |
2.3.8.4 对小鼠免疫系统的防护作用 | 第34页 |
2.3.8.5 对小鼠肝脏的影响 | 第34-35页 |
第三章 结果与分析 | 第35-53页 |
3.1 pGEX-4T-1-MnSOD原核表达载体的构建结果 | 第35-36页 |
3.2 GST-MTS-MnSOD融合蛋白的诱导表达和分析 | 第36-38页 |
3.2.1 GST-MTS-MnSOD融合蛋白不同诱导时间的对表达的影响 | 第36页 |
3.2.2 GST-MTS-MnSOD融合蛋白不同诱导温度的对表达影响 | 第36-38页 |
3.2.3 GST-MTS-MnSOD融合蛋白不同的最佳锰离子浓度探究 | 第38页 |
3.3 GST-MTS-MnSOD融合蛋白与MTS-MnSOD重组蛋白的纯化与鉴定 | 第38-39页 |
3.4 GST-MTS-MnSOD融合蛋白与MTS-MnSOD重组蛋白的稳定性 | 第39-41页 |
3.4.1 不同温度下两种蛋白的的稳定性特征 | 第39-40页 |
3.4.2 不同pH下两种蛋白的的稳定性特征 | 第40-41页 |
3.5 GST-MTS-MnSOD与MTS-MnSOD两种蛋白的跨膜效应 | 第41页 |
3.6 GST-MTS-MnSOD与MTS-MnSOD两种蛋白细胞毒性 | 第41-42页 |
3.7 GST-MTS-MnSOD与MTS-MnSOD两种蛋白的放射防护效应 | 第42-53页 |
3.7.1 小鼠日常状态 | 第42-43页 |
3.7.2 体重增长的变化率 | 第43-45页 |
3.7.3 对小鼠造血系统急性损伤的保护作用(外周血白细胞数) | 第45页 |
3.7.4 对小鼠免疫系统的防护作用 | 第45-48页 |
3.7.4.1 胸腺指数 | 第45-46页 |
3.7.4.2 脾脏形态观察与脾脏指数 | 第46-48页 |
3.7.5 对小鼠肝脏的影响 | 第48-53页 |
3.7.5.1 肝脏指数 | 第48页 |
3.7.5.2 肝脏抗氧化能力 | 第48-53页 |
第四章 讨论 | 第53-57页 |
总结 | 第57-58页 |
展望 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
个人简历 | 第66页 |