| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略词及中文对照 | 第8-11页 |
| 1 引言 | 第11-18页 |
| 1.1 棉花黄萎病 | 第11-12页 |
| 1.1.1 棉花黄萎病的病原菌 | 第11页 |
| 1.1.2 棉花黄萎病的致病机理 | 第11-12页 |
| 1.2 植物的抗病机制 | 第12-13页 |
| 1.2.1 植物的先天免疫反应 | 第12页 |
| 1.2.2 植物诱导型抗性 | 第12-13页 |
| 1.2.3 抗病基因介导的抗性 | 第13页 |
| 1.3 棉花抗黄萎病机制 | 第13-15页 |
| 1.3.1 组织结构抗性 | 第13-14页 |
| 1.3.2 生理生化抗性 | 第14-15页 |
| 1.4 抗黄萎病相关基因研究进展 | 第15-16页 |
| 1.5 酵母双杂交技术应用 | 第16页 |
| 1.6 研究目的和意义 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-32页 |
| 2.1 试验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 载体与菌株 | 第18页 |
| 2.1.3 生化试剂 | 第18-19页 |
| 2.2 试验方法 | 第19-32页 |
| 2.2.1 超表达载体构建及转化 | 第19-21页 |
| 2.2.2 拟南芥遗传转化 | 第21页 |
| 2.2.3 除草剂筛选阳性植株 | 第21页 |
| 2.2.4 拟南芥阳性植株的PCR检测 | 第21-22页 |
| 2.2.5 转化植株T3代筛选 | 第22-23页 |
| 2.2.6 拟南芥植株的表达量检测 | 第23-25页 |
| 2.2.7 拟南芥转基因植株融合蛋白的检测 | 第25-26页 |
| 2.2.8 转基因拟南芥的功能分析 | 第26-28页 |
| 2.2.9 GbVWR1互作蛋白的筛选 | 第28-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-46页 |
| 3.1 植物超表达载体的构建及农杆菌转化 | 第32-33页 |
| 3.2 转GbVWR1基因拟南芥的纯合株系的筛选 | 第33-35页 |
| 3.2.1 转GbVWR1基因阳性株系筛选 | 第33页 |
| 3.2.2 除草剂筛选获得的抗性植株PCR鉴定 | 第33-34页 |
| 3.2.3 转GbVWR1基因拟南芥的抗性植株的表达分析 | 第34页 |
| 3.2.4 转GbVWR1基因拟南芥植株融合蛋白的检测 | 第34-35页 |
| 3.3 转GbVWR1基因拟南芥的功能分析 | 第35-38页 |
| 3.3.1 转GbVWR1基因拟南芥的抗病性鉴定 | 第35-36页 |
| 3.3.2 拟南芥H2O2的含量及POD活性测定 | 第36-37页 |
| 3.3.3 拟南芥激素信号途径标志基因的时空表达 | 第37-38页 |
| 3.4 GbVWR1互作蛋白筛选 | 第38-43页 |
| 3.4.1 诱饵载体的构建及转化 | 第38-39页 |
| 3.4.2 诱饵质粒转入酵母菌株Y2HGold | 第39页 |
| 3.4.3 重组质粒的自激活及毒性检测 | 第39-40页 |
| 3.4.4 cDNA文库滴定度测定 | 第40-41页 |
| 3.4.5 GbVWR1互作蛋白筛选 | 第41-42页 |
| 3.4.6 互作蛋白的序列比对分析 | 第42-43页 |
| 3.5 酵母体内验证ABCG36与GbVWR1的互作 | 第43-46页 |
| 3.5.1 酵母体内验证互作 | 第43页 |
| 3.5.2 pGADT7-ABCG36载体的构建 | 第43-44页 |
| 3.5.3 ABCG36和GbVWR1蛋白酵母体内互作验证 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-50页 |
| 4.1 GbVWR1参与棉花黄萎病抗性 | 第46页 |
| 4.2 GbVWR1通过影响H_2O_2含量和POD活性参与抗黄萎病反应过程 | 第46-47页 |
| 4.3 GbVWR1通过多条激素信号通路参与抗黄萎病反应 | 第47-48页 |
| 4.4 酵母双杂筛选的GbVWR1互作蛋白 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 附录A 试验中所用载体结构示意图 | 第59-61页 |
| 附录B 试验所用试剂配方 | 第61-63页 |
| 读期间发表论文 | 第63-64页 |
| 作者简历 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 详细摘要 | 第66-67页 |
