基金资助 | 第4-5页 |
致谢 | 第5-10页 |
摘要 | 第10-11页 |
1 文献综述 | 第11-16页 |
1.1 大肠埃希菌的生物学特性 | 第11页 |
1.2 大肠埃希菌的耐药现状 | 第11-12页 |
1.3 大肠埃希菌的耐药机制 | 第12-14页 |
1.3.1 大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素的耐药机制 | 第12页 |
1.3.2 大肠埃希菌对四环素类药物的耐药机制 | 第12页 |
1.3.3 大肠埃希菌对氨基糖苷类的耐药机制 | 第12-13页 |
1.3.4 大肠埃希菌对氟喹诺酮类的耐药机制 | 第13页 |
1.3.5 大肠埃希菌对磺胺类的耐药机制 | 第13页 |
1.3.6 大肠埃希菌对其它药物的耐药机制 | 第13-14页 |
1.4 大肠埃希菌的基因分型方法 | 第14页 |
1.5 大肠埃希菌质粒介导的耐药基因的快速传播机制 | 第14页 |
1.6 tetM的基因传播机制及其基因环境 | 第14-16页 |
1.6.1 tetM的基因传播机制 | 第14-15页 |
1.6.2 tetM的基因环境 | 第15-16页 |
试验一 鸡源大肠埃希菌的耐药性分析 | 第16-28页 |
1 引言 | 第16页 |
2 材料与方法 | 第16-18页 |
2.1 材料 | 第16-17页 |
2.1.1 病料来源 | 第16页 |
2.1.2 试验材料及试剂 | 第16-17页 |
2.1.3 试验仪器 | 第17页 |
2.2 试验方法 | 第17-18页 |
2.2.1 细菌的分离培养 | 第17页 |
2.2.2 药液配制 | 第17-18页 |
2.2.3 药物敏感性试验 | 第18页 |
3 结果与讨论 | 第18-27页 |
3.1 结果 | 第18-25页 |
3.1.1 大肠埃希菌分离及分布情况 | 第18-19页 |
3.1.2 大肠埃希菌对不同抗菌药的耐药性分析 | 第19-25页 |
3.1.3 ERIC-PCR分型 | 第25页 |
3.2 讨论 | 第25-27页 |
3.2.1 药物敏感性试验结果的讨论分析 | 第25-26页 |
3.2.2 ERIC-PCR分子分型的结果分析 | 第26-27页 |
4 小结 | 第27-28页 |
试验二 四环素类耐药基因的检测与tetM的传播扩散机制分析 | 第28-44页 |
1 引言 | 第28页 |
2 材料与方法 | 第28-36页 |
2.1 试验材料 | 第28-29页 |
2.1.1 试验菌株 | 第28-29页 |
2.1.2 培养基 | 第29页 |
2.1.3 试剂、引物及药物 | 第29页 |
2.1.4 仪器 | 第29页 |
2.2 试验方法 | 第29-36页 |
2.2.1 DNA的提取 | 第29页 |
2.2.2 四环素类基因的检测 | 第29-30页 |
2.2.3 ERIC-PCR分型 | 第30页 |
2.2.4 多位点序列分析(MLST序列分型) | 第30页 |
2.2.5 质粒接合试验 | 第30-31页 |
2.2.6 供体菌和接合子的质粒提取 | 第31页 |
2.2.7 供体菌、接合子的基因型检测及ERIC-PCR的扩增 | 第31-35页 |
2.2.8 tetM的基因环境 | 第35-36页 |
3 结果与讨论 | 第36-44页 |
3.1 结果 | 第36-41页 |
3.1.1 四环素类耐药基因检测结果 | 第36-38页 |
3.1.2 ERIC-PCR分型结果 | 第38-39页 |
3.1.3 多位点序列分析 | 第39页 |
3.1.4 质粒接合试验结果 | 第39-40页 |
3.1.5 Overlapping PCR的测序结果 | 第40-41页 |
3.2 讨论 | 第41-44页 |
3.2.1 四环素类耐药基因检测结果分析 | 第41页 |
3.2.2 ERIC-PCR分型结果分析 | 第41页 |
3.2.3 多位点序列分析讨论 | 第41-42页 |
3.2.4 质粒接合结果分析 | 第42页 |
3.2.5 Overlapping PCR的测序分析 | 第42-44页 |
4 小结 | 第44页 |
试验三 β-内酰胺酶基因的检测分析 | 第44-52页 |
1 引言 | 第44-45页 |
2 材料与方法 | 第45-46页 |
2.1 试验材料 | 第45-46页 |
2.1.1 试验菌株 | 第45页 |
2.1.2 培养基及仪器 | 第45页 |
2.1.3 试剂、引物及药物 | 第45-46页 |
2.1.4 仪器 | 第46页 |
2.2 试验方法 | 第46页 |
2.2.1 耐药基因扩增 | 第46页 |
2.2.2 bla_(TEM)耐药基因亚型的研究 | 第46页 |
2.2.3 bla_(CTX-M)基因环境的研究 | 第46页 |
3 结果与讨论 | 第46-51页 |
3.1 结果 | 第46-48页 |
3.1.1 β-内酰胺类耐药基因的检测结果 | 第46-47页 |
3.1.2 bla_(TEM)的测序结果 | 第47页 |
3.1.3 超广谱β-内酰胺酶bla_(CTX-M)型的菌株结果 | 第47-48页 |
3.2 讨论 | 第48-51页 |
3.2.1 β-内酰胺类耐药基因的检测结果讨论 | 第48页 |
3.2.2 bla_(TEM)的测序结果讨论 | 第48-49页 |
3.2.3 bla_(CTX-M)的基因环境分析 | 第49-51页 |
4 小结 | 第51-52页 |
试验四 其它耐药基因的检测分析 | 第52-60页 |
1 引言 | 第52页 |
2 材料与方法 | 第52-54页 |
2.1 试验材料 | 第52-53页 |
2.1.1 试验菌株 | 第52-53页 |
2.1.2 培养基及仪器 | 第53页 |
2.1.3 试剂、引物及药物 | 第53页 |
2.1.4 仪器 | 第53页 |
2.2 试验方法 | 第53-54页 |
2.2.1 耐药基因扩增 | 第53页 |
2.2.2 质粒接合试验 | 第53-54页 |
2.2.4 ERIC-PCR | 第54页 |
2.2.5 供体菌和接合子的质粒提取 | 第54页 |
3 结果与讨论 | 第54-59页 |
3.1 结果 | 第54-58页 |
3.1.1 耐药基因的检测结果 | 第54-56页 |
3.1.2 ERIC-PCR结果 | 第56页 |
3.1.3 接合试验结果 | 第56-58页 |
3.1.3.1 耐多粘菌素菌株的接合试验结果 | 第56-57页 |
3.1.3.2 耐阿米卡星菌株的接合试验结果 | 第57-58页 |
3.2 讨论 | 第58-59页 |
3.2.1 耐药基因检测结果分析 | 第58页 |
3.2.2 接合试验的结果讨论 | 第58-59页 |
4 小结 | 第59-60页 |
全文结论 | 第60-61页 |
本文创新点 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-71页 |
ABSTRACT | 第71-72页 |
附录一 | 第73页 |