| 摘要 | 第7-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 缩略词表(Abbreviations) | 第15-17页 |
| 前言 | 第17-20页 |
| 第一部分 婴幼儿血管瘤内皮细胞的培养及鉴定 | 第20-40页 |
| 一、实验材料 | 第20-23页 |
| (一)实验试剂及试剂盒 | 第20-22页 |
| (二)实验仪器及耗材 | 第22-23页 |
| 二、实验方法 | 第23-26页 |
| (一)标本获取及原代细胞培养 | 第23页 |
| (二)细胞分选纯化 | 第23-24页 |
| (三)细胞生长及形态学鉴定 | 第24-25页 |
| (四)细胞表面标志物检测 | 第25-26页 |
| (五)细胞表面标志物流式鉴定 | 第26页 |
| (六)统计学方法 | 第26页 |
| 三、实验结果 | 第26-35页 |
| (一)标本获取及原代细胞培养 | 第26-28页 |
| (二)细胞分选纯化 | 第28-29页 |
| (三)细胞生长及形体学鉴定 | 第29-33页 |
| (四)细胞表面标志物检测 | 第33-35页 |
| (五)细胞表面标志物流式鉴定 | 第35页 |
| 四、讨论 | 第35-39页 |
| 五、结论 | 第39-40页 |
| 第二部分 上调miR-29a对婴幼儿血管瘤内皮细胞生物活性的影响. | 第40-64页 |
| 第一节 慢病毒包装的miR-29a对婴幼儿血管瘤内皮细胞的转染及验证 | 第40-49页 |
| 一、实验材料 | 第40-42页 |
| (一)实验试剂及试剂盒 | 第40-42页 |
| (二)实验仪器及耗材 | 第42页 |
| 二、实验方法 | 第42-46页 |
| (一)细胞准备及慢病毒转染 | 第42-43页 |
| (二)慢病毒转染效率qRT-PCR验证 | 第43-46页 |
| 三、实验结果 | 第46-49页 |
| (一)慢病毒转染及荧光表达观察 | 第46-47页 |
| (二)慢病毒转染效率qRT-PCR验证 | 第47-49页 |
| 第二节 上调miR-29a对婴幼儿血管瘤内皮细胞生物活性的影响 | 第49-64页 |
| 一、实验材料 | 第49-50页 |
| (一)实验试剂及试剂盒 | 第49页 |
| (二)实验仪器及耗材 | 第49-50页 |
| 二、实验方法 | 第50-52页 |
| (一)上调miR-29a对婴幼儿血管瘤内皮细胞增殖的影响.. | 第50页 |
| (二)上调miR-29a对婴幼儿血管瘤内皮细胞周期的影响.. | 第50-51页 |
| (三)上调miR-29a对婴幼儿血管瘤内皮细胞凋亡的影响.. | 第51页 |
| (四)上调miR-29a对婴幼儿血管瘤内皮细胞侵袭的影响.. | 第51-52页 |
| (五)数据分析 | 第52页 |
| 三、实验结果 | 第52-59页 |
| (一)上调miR-29a对婴幼儿血管瘤内皮细胞增殖的影响.. | 第52-53页 |
| (二)上调miR-29a对婴幼儿血管瘤内皮细胞周期的影响.. | 第53-55页 |
| (三)上调miR-29a对婴幼儿血管瘤内皮细胞凋亡的影响.. | 第55-58页 |
| (四)上调miR-29a对婴幼儿血管瘤内皮细胞侵袭的影响.. | 第58-59页 |
| 四、讨论 | 第59-63页 |
| 五、结论 | 第63-64页 |
| 第三部分 miR-29a在婴幼儿血管瘤中作用机制的研究 | 第64-86页 |
| 第一节 microRNA芯片检测 | 第64-69页 |
| 一、实验材料 | 第64-65页 |
| (一)实验试剂及试剂盒 | 第64-65页 |
| (二)实验仪器及耗材 | 第65页 |
| 二、实验方法 | 第65-66页 |
| (一)RNA抽提和质检 | 第65-66页 |
| (二)3IVT反应 | 第66页 |
| (三)芯片杂交 | 第66页 |
| 三、实验结果与分析 | 第66-69页 |
| (一)RNA抽提和质检 | 第66-67页 |
| (二)差异基因分析 | 第67-68页 |
| (三)差异信号通路分析 | 第68页 |
| (四)凋亡相关基因分析 | 第68-69页 |
| 第二节 miR-29a下游作用因子的实验研究 | 第69-86页 |
| 一、实验材料 | 第69-70页 |
| (一)实验试剂及试剂盒 | 第69-70页 |
| (二)实验仪器及耗材 | 第70页 |
| 二、实验方法 | 第70-75页 |
| (一)Mcl-1基因的双荧光素酶检测 | 第70-73页 |
| (二)目标蛋白的Western-blot检测 | 第73-75页 |
| (三)数据分析 | 第75页 |
| 三、实验结果 | 第75-81页 |
| (一)Mcl-1基因的双荧光素酶检测 | 第75-76页 |
| (二)Mcl-1、VEGFA及Bcl-2的Western-blot检测 | 第76-79页 |
| (三)Stat3及Akt3的Western-blot检测 | 第79-81页 |
| 四、讨论 | 第81-83页 |
| 五、结论 | 第83-86页 |
| 全文总结 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-92页 |
| 综述 | 第92-104页 |
| 参考文献 | 第99-104页 |
| 附录 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
