| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 一、前言 | 第9-11页 |
| 二、材料与方法 | 第11-28页 |
| 1. 材料 | 第11-17页 |
| 1.1 虫株、菌种及载体 | 第11页 |
| 1.2 试验用血清 | 第11页 |
| 1.3 主要仪器 | 第11-12页 |
| 1.4 主要试剂 | 第12-13页 |
| 1.5 主要溶液的配制 | 第13-17页 |
| 2. 方法 | 第17-28页 |
| 2.1 GRA7基因的体外扩增和克隆 | 第17-21页 |
| 2.2 重组质粒双酶切鉴定 | 第21-22页 |
| 2.3 基因序列的测定及分析 | 第22页 |
| 2.4 重组质粒pET-28a-GRA7的构建 | 第22页 |
| 2.5 制备E.coli BL21(DE3)感受态细胞 | 第22页 |
| 2.6 重组质粒pET-28a-GRA7的转化 | 第22页 |
| 2.7 菌落PCR及双酶切鉴定重组质粒pET-28a-GRA7 | 第22页 |
| 2.8 基因测序 | 第22页 |
| 2.9 GRA7蛋白诱导表达 | 第22-23页 |
| 2.10 SDS-PAGE | 第23-24页 |
| 2.11 GRA7的分离纯化 | 第24页 |
| 2.12 纯化重组蛋白GRA7的透析与浓缩 | 第24页 |
| 2.13 重组蛋白GRA7的蛋白含量测定 | 第24-25页 |
| 2.14 Western blot分析GRA7的反应原性 | 第25-26页 |
| 2.15 棋盘滴定法 | 第26页 |
| 2.16 GRA7-ELISA | 第26-28页 |
| 三、结果 | 第28-34页 |
| 1. 目的基因GRA7的扩增 | 第28页 |
| 2. 基因GRA7的克隆与鉴定 | 第28-29页 |
| 2. 重组质粒pET-28a-GRA7的构建 | 第29-30页 |
| 3. 重组GRA7蛋白的诱导表达及纯化 | 第30页 |
| 5. 重组蛋白GRA7的蛋白含量测定 | 第30-31页 |
| 6. 重组蛋白GRA7的反应原性分析 | 第31-32页 |
| 7. 抗原-抗体最佳工作浓度 | 第32页 |
| 8. GRA7的ELISA检测血清抗体 | 第32-34页 |
| 四、讨论 | 第34-37页 |
| 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 综述 | 第42-55页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 中英文缩略词对照表 | 第55-56页 |
| 附录 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
