| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 序言 | 第15-20页 |
| 第一章 探讨Nrf2在原代海马神经元细胞OGD/R中的作用 | 第20-41页 |
| 1 实验材料 | 第20-23页 |
| 1.1 实验动物 | 第20页 |
| 1.2 实验药物和试剂 | 第20-21页 |
| 1.3 实验仪器设备 | 第21-22页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第22-23页 |
| 2 实验方法 | 第23-30页 |
| 2.1 原代海马神经元的分离培养 | 第23-25页 |
| 2.1.1 细胞培养板的包被 | 第23页 |
| 2.1.2 取材 | 第23-24页 |
| 2.1.3 消化 | 第24页 |
| 2.1.4 吹打离心 | 第24页 |
| 2.1.5 细胞计数 | 第24-25页 |
| 2.1.6 接种 | 第25页 |
| 2.1.7 换液 | 第25页 |
| 2.2 氧糖剥夺/复糖复氧（OGD/R）模型的建立 | 第25-26页 |
| 2.3 MTT法测定细胞存活率 | 第26-27页 |
| 2.4 细胞氧化应激相关酶及代谢物的检测 | 第27-29页 |
| 2.4.1 LDH释放量的检测 | 第27页 |
| 2.4.2 细胞培养上清中MDA含量检测 | 第27-28页 |
| 2.4.3 细胞培养上清中SOD活力检测 | 第28页 |
| 2.4.4 细胞培养上清中GSH含量检测 | 第28-29页 |
| 2.5 TUNEL法检测细胞凋亡率 | 第29-30页 |
| 2.6 统计学分析 | 第30页 |
| 3 实验结果 | 第30-39页 |
| 3.1 海马神经元原代培养细胞形态 | 第30-31页 |
| 3.2 细胞在不同药物浓度、不同OGD/R模型中的存活率 | 第31-33页 |
| 3.3 细胞氧化应激相关酶及代谢物的检测结果 | 第33-38页 |
| 3.3.1 细胞在不同药物浓度、不同OGD/R模型中LDH的释放量 | 第33-34页 |
| 3.3.2 细胞培养上清中MDA含量检测 | 第34-35页 |
| 3.3.3 细胞培养上清中SOD活力检测 | 第35-36页 |
| 3.3.4 细胞培养上清中GSH含量检测 | 第36-38页 |
| 3.4 TUNEL染色法对凋亡细胞的形态学观察结果 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 第二章 探讨MHT在原代海马神经元细胞OGD中的作用 | 第41-50页 |
| 1 实验材料 | 第41页 |
| 1.1 实验动物 | 第41页 |
| 1.2 实验药物和试剂 | 第41页 |
| 1.3 实验仪器设备 | 第41页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第41页 |
| 2 实验方法 | 第41-44页 |
| 2.1 原代海马神经元的分离培养 | 第41页 |
| 2.2 实验分组及氧糖剥夺/复糖复氧（OGD/R）模型的建立 | 第41-42页 |
| 2.3 细胞氧化应激相关酶及代谢物的检测 | 第42-43页 |
| 2.3.1 细胞培养上清中MDA含量检测 | 第42页 |
| 2.3.2 细胞培养上清中SOD活力检测 | 第42-43页 |
| 2.3.3 细胞培养上清中GSH含量检测 | 第43页 |
| 2.4 TUNEL法检测细胞凋亡率 | 第43-44页 |
| 3 实验结果 | 第44-48页 |
| 3.1 细胞氧化应激相关酶及代谢物的检测结果 | 第44-47页 |
| 3.1.1 细胞培养上清中MDA含量检测结果 | 第44-45页 |
| 3.1.2 细胞培养上清中SOD活力检测结果 | 第45-46页 |
| 3.1.3 细胞培养上清中GSH检测结果 | 第46-47页 |
| 3.2 TUNEL染色法对凋亡细胞的形态学观察结果 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 第三章 MHT减轻原代海马神经元细胞OGD/R损伤的分子机制 | 第50-71页 |
| 1. 实验材料 | 第50-54页 |
| 1.1 实验动物 | 第50页 |
| 1.2 实验药物和试剂 | 第50页 |
| 1.3 实验仪器设备 | 第50-52页 |
| 1.3.1 West-blotting实验所需设备和试剂 | 第51-52页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第52-54页 |
| 2.实验方法 | 第54-59页 |
| 2.1 原代海马神经元的分离培养 | 第54页 |
| 2.2 实验分组及氧糖剥夺/复糖复氧（OGD/R）模型的建立 | 第54页 |
| 2.3 凝胶的配制 | 第54-55页 |
| 2.4 样品处理 | 第55页 |
| 2.5 免疫印迹（Western Blotting） | 第55-57页 |
| 2.5.1 上样与电泳 | 第55-56页 |
| 2.5.2 转膜 | 第56页 |
| 2.5.3 封闭 | 第56页 |
| 2.5.4 孵育 | 第56页 |
| 2.5.5 洗膜 | 第56页 |
| 2.5.6 显影 | 第56-57页 |
| 2.6 实时荧光定量PCR(RT-qPCR) | 第57-59页 |
| 2.6.1 RNA提取步骤 | 第57页 |
| 2.6.2 去基因组 | 第57-58页 |
| 2.6.3 纯度检测及电泳检测 | 第58页 |
| 2.6.4 逆转录 | 第58-59页 |
| 2.6.5 定量 | 第59页 |
| 3 实验结果 | 第59-70页 |
| 3.1 蛋白免疫印迹结果 | 第59-64页 |
| 3.1.1 SFN、BST对OGD/R引起的海马神经元损伤中Nrf2、HO-1 蛋白表达的影响 | 第59-62页 |
| 3.1.2 MHT对OGD/R引起的海马神经元损伤中Nrf2、HO-1 蛋白表达的影响 | 第62-64页 |
| 3.2 RT-PCR结果 | 第64-70页 |
| 3.2.1 基因扩增曲线和溶解曲线 | 第64-67页 |
| 3.2.2 SFN、BST对OGD/R引起的海马神经元损伤中Nrf2、HO-1 mRNA表达的影响 | 第67-68页 |
| 3.2.3 MHT对OGD/R引起的海马神经元损伤中Nrf2、HO-1mRNA的表达影响 | 第68-70页 |
| 4 讨论 | 第70-71页 |
| 全文总结 | 第71-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 攻读学位期间科研情况及所受奖励 | 第81-82页 |
| 附录：英文缩写语 | 第82-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
