摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-14页 |
第1章 引言 | 第14-17页 |
第2章 材料与方法 | 第17-29页 |
·主要材料及试剂 | 第17-20页 |
·实验材料 | 第17页 |
·主要试剂和产地 | 第17-19页 |
·主要溶液成分及配制 | 第19-20页 |
·主要仪器设备和产地 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-29页 |
·实验分组 | 第21-22页 |
·NRK-52E 细胞培养 | 第22页 |
·缺氧复氧模型的建立 | 第22页 |
·台盼蓝排斥试验进行细胞计数及检测细胞存活率 | 第22页 |
·RT-PCR 分析GRP78、Caspase-12 和Caspase-3 的mRNA 表达情况 | 第22-24页 |
·Western-blotting 检测 NRK-52E 细胞 GRP78、Caspase- 12、Caspase-3 蛋白的表达情况 | 第24-25页 |
·流式细胞仪检测肾小管上皮细胞凋亡率 | 第25-26页 |
·流式细胞仪检测肾小管上皮细胞胞内游离Ca2+荧光强度 | 第26页 |
·动物I/R 模型制作 | 第26页 |
·动物标本采集 | 第26-27页 |
·全自动生化仪检测细胞培养基 LDH 和动物血清 BUN、Cr | 第27页 |
·组织病理学观察(HE 染色) | 第27页 |
·免疫组织化学检测肾组织中GRP78、Caspase-12以及Caspase-3表达与分布 | 第27-28页 |
·电镜观察肾组织超微结构 | 第28页 |
·数据统计与处理方法 | 第28-29页 |
第3章 结果 | 第29-51页 |
·不同缺氧复氧时间对肾小管上皮细胞的影响 | 第29-35页 |
·NRK-52E 细胞的生长曲线 | 第29页 |
·活细胞计数及细胞存活率 | 第29-31页 |
·NRK-52E 细胞LDH 含量 | 第31-33页 |
·RT-PCR 检测各缺氧复氧时间点 Caspase-12mRNA 表达的变化 | 第33-35页 |
·牛磺酸对肾小管上皮细胞H/R 的保护作用及其机制 | 第35-44页 |
·细胞形态学观察 | 第35页 |
·活细胞计数及细胞存活率 | 第35-36页 |
·NRK-52E 细胞GRP78、Caspase-12 及Caspase-3 mRNA 表达的变化 | 第36-38页 |
·NRK-52E 细胞GRP78、Caspase-12 及Caspase-3 蛋白表达的变化 | 第38-40页 |
·流式细胞仪测定各组NRK-52E 细胞凋亡率 | 第40-42页 |
·流式细胞仪测定各组NRK-52E 细胞胞内游离Ca2+荧光强度的变化 | 第42-44页 |
·牛磺酸对大鼠急性RIRI 的保护作用及其机制 | 第44-51页 |
·各组肾功能的变化 | 第44-45页 |
·肾脏大体形态学变化 | 第45页 |
·肾脏组织形态学变化 | 第45-46页 |
·GRP78、Caspase-12 和Caspase-3 mRNA 表达的变化 | 第46-49页 |
·GRP78、Caspase-12 及Caspase-3 蛋白表达的变化 | 第49-51页 |
第4章 讨论 | 第51-58页 |
·不同缺氧复氧时间对肾小管上皮细胞的影响 | 第51-52页 |
·牛磺酸对肾小管上皮细胞H/R 的保护作用及其机制 | 第52-56页 |
·肾小管上皮细胞凋亡是肾缺血再灌注损伤重要的发生机制之一 | 第52-54页 |
·牛磺酸对肾小管上皮细胞H/R 的保护作用及其机制 | 第54-56页 |
·牛磺酸对大鼠急性RIRI 的保护作用及其机制 | 第56-58页 |
·大鼠肾缺血再灌注损伤模型的制作与评价 | 第56-57页 |
·牛磺酸对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制 | 第57-58页 |
第5章 结论 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-63页 |
附录图谱 | 第63-69页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第69-70页 |
附带综述 | 第70-75页 |