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牛磺酸对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-14页
第1章 引言第14-17页
第2章 材料与方法第17-29页
   ·主要材料及试剂第17-20页
     ·实验材料第17页
     ·主要试剂和产地第17-19页
     ·主要溶液成分及配制第19-20页
   ·主要仪器设备和产地第20-21页
   ·实验方法第21-29页
     ·实验分组第21-22页
     ·NRK-52E 细胞培养第22页
     ·缺氧复氧模型的建立第22页
     ·台盼蓝排斥试验进行细胞计数及检测细胞存活率第22页
     ·RT-PCR 分析GRP78、Caspase-12 和Caspase-3 的mRNA 表达情况第22-24页
     ·Western-blotting 检测 NRK-52E 细胞 GRP78、Caspase- 12、Caspase-3 蛋白的表达情况第24-25页
     ·流式细胞仪检测肾小管上皮细胞凋亡率第25-26页
     ·流式细胞仪检测肾小管上皮细胞胞内游离Ca2+荧光强度第26页
     ·动物I/R 模型制作第26页
     ·动物标本采集第26-27页
     ·全自动生化仪检测细胞培养基 LDH 和动物血清 BUN、Cr第27页
     ·组织病理学观察(HE 染色)第27页
     ·免疫组织化学检测肾组织中GRP78、Caspase-12以及Caspase-3表达与分布第27-28页
     ·电镜观察肾组织超微结构第28页
     ·数据统计与处理方法第28-29页
第3章 结果第29-51页
   ·不同缺氧复氧时间对肾小管上皮细胞的影响第29-35页
     ·NRK-52E 细胞的生长曲线第29页
     ·活细胞计数及细胞存活率第29-31页
     ·NRK-52E 细胞LDH 含量第31-33页
     ·RT-PCR 检测各缺氧复氧时间点 Caspase-12mRNA 表达的变化第33-35页
   ·牛磺酸对肾小管上皮细胞H/R 的保护作用及其机制第35-44页
     ·细胞形态学观察第35页
     ·活细胞计数及细胞存活率第35-36页
     ·NRK-52E 细胞GRP78、Caspase-12 及Caspase-3 mRNA 表达的变化第36-38页
     ·NRK-52E 细胞GRP78、Caspase-12 及Caspase-3 蛋白表达的变化第38-40页
     ·流式细胞仪测定各组NRK-52E 细胞凋亡率第40-42页
     ·流式细胞仪测定各组NRK-52E 细胞胞内游离Ca2+荧光强度的变化第42-44页
   ·牛磺酸对大鼠急性RIRI 的保护作用及其机制第44-51页
     ·各组肾功能的变化第44-45页
     ·肾脏大体形态学变化第45页
     ·肾脏组织形态学变化第45-46页
     ·GRP78、Caspase-12 和Caspase-3 mRNA 表达的变化第46-49页
     ·GRP78、Caspase-12 及Caspase-3 蛋白表达的变化第49-51页
第4章 讨论第51-58页
   ·不同缺氧复氧时间对肾小管上皮细胞的影响第51-52页
   ·牛磺酸对肾小管上皮细胞H/R 的保护作用及其机制第52-56页
     ·肾小管上皮细胞凋亡是肾缺血再灌注损伤重要的发生机制之一第52-54页
     ·牛磺酸对肾小管上皮细胞H/R 的保护作用及其机制第54-56页
   ·牛磺酸对大鼠急性RIRI 的保护作用及其机制第56-58页
     ·大鼠肾缺血再灌注损伤模型的制作与评价第56-57页
     ·牛磺酸对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制第57-58页
第5章 结论第58-59页
致谢第59-60页
参考文献第60-63页
附录图谱第63-69页
攻读学位期间的研究成果第69-70页
附带综述第70-75页

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