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转录因子GmbHLH30在丹波黑大豆响应铝胁迫过程中调控靶基因的作用机理研究

摘要第6-7页
ABSTRACT第7-8页
英文缩略语索引第14-16页
第一章 绪论第16-28页
    1.1 土壤的酸化及铝存在形态第16-17页
    1.2 酸性土壤中铝对植物的危害第17-18页
        1.2.1 铝胁迫对植物的损害第17页
        1.2.2 铝对植物细胞生物膜的损伤第17-18页
        1.2.3 铝对植物细胞有丝分裂的影响第18页
        1.2.4 铝毒对植物光合作用的影响第18页
    1.3 植物抗铝胁迫的机制第18-21页
        1.3.1 编码转运蛋白的基因第19-20页
        1.3.2 铝抗性基因的转录调控机制第20-21页
    1.4 BHLH转录因子的结构和功能第21-22页
        1.4.1 BHLH转录因子的结构第21页
        1.4.2 植物BHLH转录因子的功能第21页
        1.4.3 植物BHLH转录因子参与非生物胁迫信号通路第21-22页
    1.5 在应答非生物胁迫的研究中转录因子与下游靶基因启动子结合作用的几种常见研究方法第22-26页
        1.5.1. 基因芯片(GENE CHIP)第22-23页
        1.5.2. 电泳迁移率分析(ELECTROPHORETIC MOBILITY SHIFT ASSAY,EMSA)第23-24页
        1.5.3. 酵母单杂交(YEAST ONE-HYBRID ASSAY)第24页
        1.5.4. 染色质免疫共沉淀(CHROMATIN IMMUNOPRECIPITATION,CHIP)第24-25页
        1.5.5. 本研究实验方法的选择第25-26页
    1.6 本研究的目的及意义第26-28页
第二章 转基因植物中目标蛋白表达的检测第28-65页
    2.1 材料和方法第29-53页
        2.1.1 材料第29-41页
        2.1.2 方法第41-53页
    2.2 结果第53-62页
        2.2.1 PGEX4T-EGFP原核表达载体的构建第53-57页
        2.2.2 PGEX4T-EGFP原核表达载体诱导表达条件的优化第57-60页
        2.2.3 大量诱导EGFP-GST融合蛋白表达,收集菌体,超声破碎,对上清液中的目的蛋白进行亲和纯化第60-61页
        2.2.4 EGFP-GST融合蛋白多克隆抗体的制备与鉴定第61-62页
        2.2.5 在转基因烟草和野生型中用所制备的多克隆抗体检测GMBHLH30蛋白的表达量第62页
    2.3 讨论第62-65页
第三章 铝胁迫下丹波黑大豆GMBHLH30对下游靶基因启动子的调控机制第65-104页
    3.1 材料和方法第66-89页
        3.1.1 材料第66-79页
        3.1.2 方法第79-89页
    3.2 结果第89-102页
        3.2.1 GMBHLH30蛋白多肽多克隆抗体染色质免疫共沉淀筛选铝胁迫下GMBHLH30转录因子可能的下游靶基因第89-94页
        3.2.2 MATE-1000目的片段的扩增第94-95页
        3.2.3. 植物载体PHGWL7-MATE-712的构建第95-101页
        3.2.4 转基因和双转基植物的构建第101-102页
    3.3 讨论第102-104页
第四章 总结与展望第104-106页
致谢第106-107页
参考文献第107-110页
附录A 攻读硕士期间发表的论文第110-111页
附录B ALWT、MATE、STOP1、CS和MDH基因序列以及它们起始密码子上游20D0BP的启动子区域片段序列第111-118页

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