摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
英文缩略语索引 | 第14-16页 |
第一章 绪论 | 第16-28页 |
1.1 土壤的酸化及铝存在形态 | 第16-17页 |
1.2 酸性土壤中铝对植物的危害 | 第17-18页 |
1.2.1 铝胁迫对植物的损害 | 第17页 |
1.2.2 铝对植物细胞生物膜的损伤 | 第17-18页 |
1.2.3 铝对植物细胞有丝分裂的影响 | 第18页 |
1.2.4 铝毒对植物光合作用的影响 | 第18页 |
1.3 植物抗铝胁迫的机制 | 第18-21页 |
1.3.1 编码转运蛋白的基因 | 第19-20页 |
1.3.2 铝抗性基因的转录调控机制 | 第20-21页 |
1.4 BHLH转录因子的结构和功能 | 第21-22页 |
1.4.1 BHLH转录因子的结构 | 第21页 |
1.4.2 植物BHLH转录因子的功能 | 第21页 |
1.4.3 植物BHLH转录因子参与非生物胁迫信号通路 | 第21-22页 |
1.5 在应答非生物胁迫的研究中转录因子与下游靶基因启动子结合作用的几种常见研究方法 | 第22-26页 |
1.5.1. 基因芯片(GENE CHIP) | 第22-23页 |
1.5.2. 电泳迁移率分析(ELECTROPHORETIC MOBILITY SHIFT ASSAY,EMSA) | 第23-24页 |
1.5.3. 酵母单杂交(YEAST ONE-HYBRID ASSAY) | 第24页 |
1.5.4. 染色质免疫共沉淀(CHROMATIN IMMUNOPRECIPITATION,CHIP) | 第24-25页 |
1.5.5. 本研究实验方法的选择 | 第25-26页 |
1.6 本研究的目的及意义 | 第26-28页 |
第二章 转基因植物中目标蛋白表达的检测 | 第28-65页 |
2.1 材料和方法 | 第29-53页 |
2.1.1 材料 | 第29-41页 |
2.1.2 方法 | 第41-53页 |
2.2 结果 | 第53-62页 |
2.2.1 PGEX4T-EGFP原核表达载体的构建 | 第53-57页 |
2.2.2 PGEX4T-EGFP原核表达载体诱导表达条件的优化 | 第57-60页 |
2.2.3 大量诱导EGFP-GST融合蛋白表达,收集菌体,超声破碎,对上清液中的目的蛋白进行亲和纯化 | 第60-61页 |
2.2.4 EGFP-GST融合蛋白多克隆抗体的制备与鉴定 | 第61-62页 |
2.2.5 在转基因烟草和野生型中用所制备的多克隆抗体检测GMBHLH30蛋白的表达量 | 第62页 |
2.3 讨论 | 第62-65页 |
第三章 铝胁迫下丹波黑大豆GMBHLH30对下游靶基因启动子的调控机制 | 第65-104页 |
3.1 材料和方法 | 第66-89页 |
3.1.1 材料 | 第66-79页 |
3.1.2 方法 | 第79-89页 |
3.2 结果 | 第89-102页 |
3.2.1 GMBHLH30蛋白多肽多克隆抗体染色质免疫共沉淀筛选铝胁迫下GMBHLH30转录因子可能的下游靶基因 | 第89-94页 |
3.2.2 MATE-1000目的片段的扩增 | 第94-95页 |
3.2.3. 植物载体PHGWL7-MATE-712的构建 | 第95-101页 |
3.2.4 转基因和双转基植物的构建 | 第101-102页 |
3.3 讨论 | 第102-104页 |
第四章 总结与展望 | 第104-106页 |
致谢 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-110页 |
附录A 攻读硕士期间发表的论文 | 第110-111页 |
附录B ALWT、MATE、STOP1、CS和MDH基因序列以及它们起始密码子上游20D0BP的启动子区域片段序列 | 第111-118页 |