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Fstl1在肝纤维化中作用机制的研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
英文缩略词表第7-11页
第一章 绪论第11-19页
    1.1 肝纤维化及其发病机制第11-14页
        1.1.1 肝纤维化简介第11页
        1.1.2 肝纤维化形成机制第11-14页
    1.2 Fstl1简介及功能第14-17页
        1.2.1 Fstll的基因及蛋白结构第14-15页
        1.2.2 Fstll的功能第15-17页
    1.3 microRNA29简介及功能第17页
        1.3.1 miR29简介第17页
        1.3.2 miR29功能第17页
    1.4 立题依据及研究内容第17-19页
        1.4.1 立题依据第17-18页
        1.4.2 研究内容第18-19页
第二章 材料与方法第19-31页
    2.1 实验材料第19-21页
        2.1.1 实验细胞株第19页
        2.1.2 实验动物第19页
        2.1.3 主要试剂第19-20页
        2.1.4 主要仪器第20-21页
    2.2 实验方法第21-31页
        2.2.1 动物给药第21-22页
        2.2.2 细胞的培养第22-23页
        2.2.3 细胞给药第23-24页
        2.2.4 小室迁移实验第24页
        2.2.5 RNA提取(Trizol法)第24-25页
        2.2.6 逆转录-cDNA的制备第25-26页
        2.2.7 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)第26-27页
        2.2.8 蛋白免疫印迹分析(Western Blotting)第27-29页
        2.2.9 免疫荧光第29页
        2.2.10 天狼猩红染色实验第29-30页
        2.2.11 miR29a靶基因3’UTR质粒验证实验第30页
        2.2.12 统计学方法第30-31页
第三章 结果与讨论第31-53页
    3.1 Fstl1在肝纤维化组织和细胞的病理表达第31-36页
        3.1.1 FSTL1在NAFLD患者肝组织中的表达第31页
        3.1.2 Fstl1在肝纤维化小鼠肝组织中的病理表达情况第31-32页
        3.1.3 TGF-β1诱导LX-2细胞活化构建人肝纤维化细胞模型第32-34页
        3.1.4 TGF-β1诱导HSC-T6细胞活化构建大鼠肝纤维化细胞模型第34-35页
        3.1.5 TGF-β1诱导CFSC-8B细胞活化构建大鼠肝纤维化细胞模型第35-36页
    3.2 Fstl1半倍缺失小鼠的肝纤维化情况第36-38页
        3.2.1 Fstl1半倍缺失小鼠肝组织中肝纤维化相关基因的表达第36-37页
        3.2.2 Fstl1半倍缺失小鼠肝组织中胶原沉积情况第37-38页
    3.3 FSTL1siRNA对TGF-β1诱导的LX-2细胞的影响第38-39页
    3.4 Fstl1中和性抗体对CCl4肝纤维化小鼠的作用第39-40页
        3.4.1 Fstl1中和性抗体对肝纤维化相关基因及信号通路蛋白表达的影响第39页
        3.4.2 Fstl1中和性抗体对胶原沉积的作用第39-40页
        3.4.3 Fstl1中和性抗体封闭其功能后小鼠肝功能情况第40页
    3.5 Fstl1中和性抗体对TGF-β1诱导的LX-2细胞的作用第40-42页
        3.5.1 Fstl1中和性抗体对肝纤维化相关基因及信号通路蛋白表达的影响第40-41页
        3.5.2 Fstl1中和性抗体对LX-2细胞迁移的影响第41-42页
    3.6 Fstl1重组腺病毒对CCl4肝纤维化小鼠的作用第42-44页
        3.6.1 Fstl1过表达小鼠肝纤维化相关基因及信号通路蛋白的表达情况第42-43页
        3.6.2 Fstl1过表达小鼠肝组织胶原沉积情况第43页
        3.6.3 Fstl1过表达小鼠肝功能情况第43-44页
    3.7 Fstl1重组腺病毒对TGF-β1诱导的LX-2细胞的作用第44-46页
        3.7.1 Fstl1重组腺病毒对LX-2内肝纤维化相关基因及信号通路蛋白的影响第44-45页
        3.7.2 Fstl1重组腺病毒对LX-2细胞迁移能力的影响第45页
        3.7.3 LX-2细胞过表达FSTL1上清液作用于LX-2细胞第45-46页
    3.8 肝星状细胞及纤维化肝组织中miR29a的表达情况第46-49页
        3.8.1 活化的肝星状细胞LX-2中miR29a的表达情况第46页
        3.8.2 Fstl1半倍缺失小鼠肝组织中miR29a的表达第46-47页
        3.8.3 FSTL1 siRNA对LX-2细胞中miR29a表达的影响第47页
        3.8.4 Fstl1中和性抗体对肝组织中miR29a表达的影响第47-48页
        3.8.5 Fstl1中和性抗体对LX-2细胞内miR29a表达的影响第48页
        3.8.6 过表达Fstl1小鼠肝组织中miR29a的表达第48页
        3.8.7 过表达Fstl1细胞中miR29a的表达情况第48-49页
    3.9 MiR29a Mimics对LX-2细胞的作用第49页
    3.10 MiR29a Inhibitor对LX-2细胞的作用第49-50页
    3.11 miR29a靶基因3’UTR质粒验证实验第50-51页
        3.11.1 miR29a靶基因3’UTR质粒的构建第50-51页
        3.11.2 miR29a靶基因3’UTR质粒验证实验第51页
    3.12 信号通路验证实验第51-53页
        3.12.1 Smad2信号通路第51-52页
        3.12.2 JNK信号通路第52-53页
结论与展望第53-55页
    主要结论第53页
    展望第53-55页
致谢第55-57页
参考文献第57-63页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第63页

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