摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
英文缩略词表 | 第7-11页 |
第一章 绪论 | 第11-19页 |
1.1 肝纤维化及其发病机制 | 第11-14页 |
1.1.1 肝纤维化简介 | 第11页 |
1.1.2 肝纤维化形成机制 | 第11-14页 |
1.2 Fstl1简介及功能 | 第14-17页 |
1.2.1 Fstll的基因及蛋白结构 | 第14-15页 |
1.2.2 Fstll的功能 | 第15-17页 |
1.3 microRNA29简介及功能 | 第17页 |
1.3.1 miR29简介 | 第17页 |
1.3.2 miR29功能 | 第17页 |
1.4 立题依据及研究内容 | 第17-19页 |
1.4.1 立题依据 | 第17-18页 |
1.4.2 研究内容 | 第18-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-31页 |
2.1 实验材料 | 第19-21页 |
2.1.1 实验细胞株 | 第19页 |
2.1.2 实验动物 | 第19页 |
2.1.3 主要试剂 | 第19-20页 |
2.1.4 主要仪器 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-31页 |
2.2.1 动物给药 | 第21-22页 |
2.2.2 细胞的培养 | 第22-23页 |
2.2.3 细胞给药 | 第23-24页 |
2.2.4 小室迁移实验 | 第24页 |
2.2.5 RNA提取(Trizol法) | 第24-25页 |
2.2.6 逆转录-cDNA的制备 | 第25-26页 |
2.2.7 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第26-27页 |
2.2.8 蛋白免疫印迹分析(Western Blotting) | 第27-29页 |
2.2.9 免疫荧光 | 第29页 |
2.2.10 天狼猩红染色实验 | 第29-30页 |
2.2.11 miR29a靶基因3’UTR质粒验证实验 | 第30页 |
2.2.12 统计学方法 | 第30-31页 |
第三章 结果与讨论 | 第31-53页 |
3.1 Fstl1在肝纤维化组织和细胞的病理表达 | 第31-36页 |
3.1.1 FSTL1在NAFLD患者肝组织中的表达 | 第31页 |
3.1.2 Fstl1在肝纤维化小鼠肝组织中的病理表达情况 | 第31-32页 |
3.1.3 TGF-β1诱导LX-2细胞活化构建人肝纤维化细胞模型 | 第32-34页 |
3.1.4 TGF-β1诱导HSC-T6细胞活化构建大鼠肝纤维化细胞模型 | 第34-35页 |
3.1.5 TGF-β1诱导CFSC-8B细胞活化构建大鼠肝纤维化细胞模型 | 第35-36页 |
3.2 Fstl1半倍缺失小鼠的肝纤维化情况 | 第36-38页 |
3.2.1 Fstl1半倍缺失小鼠肝组织中肝纤维化相关基因的表达 | 第36-37页 |
3.2.2 Fstl1半倍缺失小鼠肝组织中胶原沉积情况 | 第37-38页 |
3.3 FSTL1siRNA对TGF-β1诱导的LX-2细胞的影响 | 第38-39页 |
3.4 Fstl1中和性抗体对CCl4肝纤维化小鼠的作用 | 第39-40页 |
3.4.1 Fstl1中和性抗体对肝纤维化相关基因及信号通路蛋白表达的影响 | 第39页 |
3.4.2 Fstl1中和性抗体对胶原沉积的作用 | 第39-40页 |
3.4.3 Fstl1中和性抗体封闭其功能后小鼠肝功能情况 | 第40页 |
3.5 Fstl1中和性抗体对TGF-β1诱导的LX-2细胞的作用 | 第40-42页 |
3.5.1 Fstl1中和性抗体对肝纤维化相关基因及信号通路蛋白表达的影响 | 第40-41页 |
3.5.2 Fstl1中和性抗体对LX-2细胞迁移的影响 | 第41-42页 |
3.6 Fstl1重组腺病毒对CCl4肝纤维化小鼠的作用 | 第42-44页 |
3.6.1 Fstl1过表达小鼠肝纤维化相关基因及信号通路蛋白的表达情况 | 第42-43页 |
3.6.2 Fstl1过表达小鼠肝组织胶原沉积情况 | 第43页 |
3.6.3 Fstl1过表达小鼠肝功能情况 | 第43-44页 |
3.7 Fstl1重组腺病毒对TGF-β1诱导的LX-2细胞的作用 | 第44-46页 |
3.7.1 Fstl1重组腺病毒对LX-2内肝纤维化相关基因及信号通路蛋白的影响 | 第44-45页 |
3.7.2 Fstl1重组腺病毒对LX-2细胞迁移能力的影响 | 第45页 |
3.7.3 LX-2细胞过表达FSTL1上清液作用于LX-2细胞 | 第45-46页 |
3.8 肝星状细胞及纤维化肝组织中miR29a的表达情况 | 第46-49页 |
3.8.1 活化的肝星状细胞LX-2中miR29a的表达情况 | 第46页 |
3.8.2 Fstl1半倍缺失小鼠肝组织中miR29a的表达 | 第46-47页 |
3.8.3 FSTL1 siRNA对LX-2细胞中miR29a表达的影响 | 第47页 |
3.8.4 Fstl1中和性抗体对肝组织中miR29a表达的影响 | 第47-48页 |
3.8.5 Fstl1中和性抗体对LX-2细胞内miR29a表达的影响 | 第48页 |
3.8.6 过表达Fstl1小鼠肝组织中miR29a的表达 | 第48页 |
3.8.7 过表达Fstl1细胞中miR29a的表达情况 | 第48-49页 |
3.9 MiR29a Mimics对LX-2细胞的作用 | 第49页 |
3.10 MiR29a Inhibitor对LX-2细胞的作用 | 第49-50页 |
3.11 miR29a靶基因3’UTR质粒验证实验 | 第50-51页 |
3.11.1 miR29a靶基因3’UTR质粒的构建 | 第50-51页 |
3.11.2 miR29a靶基因3’UTR质粒验证实验 | 第51页 |
3.12 信号通路验证实验 | 第51-53页 |
3.12.1 Smad2信号通路 | 第51-52页 |
3.12.2 JNK信号通路 | 第52-53页 |
结论与展望 | 第53-55页 |
主要结论 | 第53页 |
展望 | 第53-55页 |
致谢 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第63页 |