| 摘要 | 第10-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-21页 |
| 1.1 猪链球菌的概述 | 第13-14页 |
| 1.2 猪链球菌毒力因子 | 第14-18页 |
| 1.2.1 表面蛋白和分泌蛋白 | 第14-16页 |
| 1.2.2 酶类 | 第16-17页 |
| 1.2.3 转录因子和调节因子 | 第17页 |
| 1.2.4 其它新发现的毒力因子 | 第17-18页 |
| 1.3 宿主糖蛋白及病原菌糖苷水解酶 | 第18-19页 |
| 1.4 研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 2 SS205ZYH33 菌株SSU05_0630 表达、纯化及多克隆抗体的制备 | 第21-35页 |
| 2.1 材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 菌株、质粒与实验动物 | 第21页 |
| 2.1.2 培养基和主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.4 蛋白纯化相关溶液配制 | 第22页 |
| 2.2 方法 | 第22-28页 |
| 2.2.1 表达载体构建 | 第22-25页 |
| 2.2.2 蛋白的表达纯化 | 第25-26页 |
| 2.2.3 蛋白的浓缩 | 第26页 |
| 2.2.4 蛋白的除盐 | 第26-27页 |
| 2.2.5 动物免疫 | 第27页 |
| 2.2.6 ELISA检测抗体效价 | 第27-28页 |
| 2.3 结果 | 第28-32页 |
| 2.3.1 SSU05_0630 结构域分析及克隆策略 | 第28-29页 |
| 2.3.2 基因的PCR扩增及重组质粒双酶切鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3.3 蛋白的表达与纯化结果 | 第30-31页 |
| 2.3.4 蛋白的浓缩和除盐结果 | 第31页 |
| 2.3.5 兔多克隆抗体效价的检测结果 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-33页 |
| 2.5 小结 | 第33-35页 |
| 3 SS205ZYH33 菌株ssu05_0630 基因缺失株构建 | 第35-45页 |
| 3.1 材料 | 第35-36页 |
| 3.1.1 菌株、质粒 | 第35页 |
| 3.1.2 培养基和主要试剂 | 第35页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第35-36页 |
| 3.2 方法 | 第36-39页 |
| 3.2.1 引物设计与信息肽 | 第36页 |
| 3.2.2 ssu05_0630 基因缺失片段的构建 | 第36-38页 |
| 3.2.3 ssu05_0630 基因缺失株ssu05_0630Δ的构建 | 第38页 |
| 3.2.4 ssu05_0630Δ缺失株鉴定 | 第38-39页 |
| 3.2.5 SS205ZYH33 野生菌株(WT)和ssu05_0630Δ菌株的生长特性 | 第39页 |
| 3.2.6 SS205ZYH33 野生菌株(WT)和ssu05_0630Δ菌株的毒力比较 | 第39页 |
| 3.3 结果 | 第39-42页 |
| 3.3.1 ssu05_0630 基因缺失片段的构建 | 第39-40页 |
| 3.3.2 ssu05_0630Δ缺失株鉴定结果 | 第40-41页 |
| 3.3.3 SS205ZYH33 野生菌株(WT)和ssu05_0630Δ菌株的生长特性比较 | 第41页 |
| 3.3.4 动物感染实验结果 | 第41-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-43页 |
| 3.5 小结 | 第43-45页 |
| 4 SS205ZYH33 菌株SSU05_0630 糖苷水解酶结构域功能探析及SsGH16 结构域蛋白结晶条件摸索 | 第45-65页 |
| 4.1 材料 | 第45-46页 |
| 4.1.1 菌株、蛋白与实验动物 | 第45页 |
| 4.1.2 培养基和主要试剂 | 第45页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第45-46页 |
| 4.2 方法 | 第46-51页 |
| 4.2.1 SSU05_0630 序列分析 | 第46页 |
| 4.2.2 Ss GH20 结构域蛋白活性鉴定 | 第46-49页 |
| 4.2.3 Ss CBM+GH16 与Ss GH16 结构域蛋白活性鉴定 | 第49-50页 |
| 4.2.4 Ss GH16 结构域蛋白的结晶 | 第50-51页 |
| 4.3 结果 | 第51-61页 |
| 4.3.1 SSU05_0630 序列分析 | 第51-53页 |
| 4.3.2 Ss GH20 结构域蛋白活性测定 | 第53-57页 |
| 4.3.3 Ss CBM+GH16 与Ss GH16 蛋白活性测定 | 第57-59页 |
| 4.3.4 Ss GH16 蛋白的结晶结果 | 第59-61页 |
| 4.4 讨论 | 第61-64页 |
| 4.5 小结 | 第64-65页 |
| 全文总结 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 个人简历 | 第77页 |
