摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
英文缩略表 | 第10-12页 |
第一章 引言 | 第12-26页 |
1.1 现阶段植物耐碱的研究进展 | 第13-16页 |
1.1.1 碱胁迫对植物的损伤 | 第13-14页 |
1.1.2 植物适应碱胁迫的机制 | 第14-16页 |
1.1.2.1 渗透调节物质的合成 | 第14-15页 |
1.1.2.2 合成保护性蛋白 | 第15页 |
1.1.2.3 清除活性氧 | 第15-16页 |
1.1.2.4 积累有机酸 | 第16页 |
1.2 棉花的耐碱性研究 | 第16-19页 |
1.2.1 碱胁迫对棉花的伤害 | 第16-17页 |
1.2.2 棉花耐碱性的特点 | 第17-18页 |
1.2.3 棉花耐碱的机理 | 第18-19页 |
1.2.3.1 渗透调节 | 第18页 |
1.2.3.2 活性氧清除系统的作用 | 第18页 |
1.2.3.3 有机酸调节 | 第18-19页 |
1.3 棉花的蛋白质组学相关研究 | 第19-23页 |
1.3.1 现阶段蛋白质组学的发展状况 | 第19-20页 |
1.3.2 蛋白质组学相关技术概况 | 第20-23页 |
1.3.2.1 样品制备技术 | 第21-22页 |
1.3.2.2 双向电泳技术 | 第22页 |
1.3.2.3 蛋白的质谱技术 | 第22页 |
1.3.2.4 蛋白芯片技术 | 第22-23页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第23-26页 |
第二章 材料与方法 | 第26-45页 |
2.1 实验所需材料 | 第26-27页 |
2.1.1 棉花材料 | 第26页 |
2.1.2 实验所需试剂 | 第26-27页 |
2.1.3 实验仪器与所用软件 | 第27页 |
2.2 实验方法 | 第27-45页 |
2.2.1 材料的种植与处理方法 | 第27-28页 |
2.2.2 棉花真叶蛋白提取 | 第28-29页 |
2.2.3 棉花叶片提取蛋白的定量 | 第29-31页 |
2.2.4 SDS凝胶电泳步骤 | 第31-32页 |
2.2.5 双向电泳步骤 | 第32-36页 |
2.2.5.1 双向电泳起前的准备工作 | 第32页 |
2.2.5.2 所需溶液配方 | 第32-33页 |
2.2.5.3 第一向等电聚焦 | 第33-34页 |
2.2.5.4 胶条平衡 | 第34-35页 |
2.2.5.5 第二向SDS-PAGE电泳 | 第35-36页 |
2.2.6 凝胶染色 | 第36-39页 |
2.2.6.1 硝酸银染色法 | 第36-38页 |
2.2.6.2 考马斯亮蓝染色法 | 第38-39页 |
2.2.7 凝胶扫描和分析 | 第39-40页 |
2.2.7.1 凝胶扫描 | 第39页 |
2.2.7.2 蛋白质的胶内酶解 | 第39-40页 |
2.2.8 质谱鉴定与数据库搜索 | 第40-41页 |
2.2.9 总RNA提取和实时荧光定量PCR | 第41-45页 |
2.2.9.1 总RNA的提取 | 第41-43页 |
2.2.9.3 实时荧光定量PCR反应 | 第43页 |
2.2.9.4 实时荧光定量PCR实验流程 | 第43-45页 |
第三章 结果与分析 | 第45-57页 |
3.1 双向电泳的结果与分析 | 第46-57页 |
3.1.1 碱胁迫浓度及处理时间的选择 | 第46页 |
3.1.2 蛋白上样条件的初步优化 | 第46-47页 |
3.1.3 碱 12 h处理后棉花总蛋白质组图谱分析 | 第47-49页 |
3.1.4 碱处理 6 h后棉花的叶片蛋白质组图谱分析 | 第49页 |
3.1.5 碱处理 6 h后棉花的根蛋白质组图谱分析 | 第49-50页 |
3.1.6 差异表达蛋白质点的质谱鉴定结果分析 | 第50-54页 |
3.1.7 总RNA完整性的检测 | 第54-55页 |
3.1.8 mRNA水平与蛋白质水平的比较 | 第55-57页 |
第四章 讨论 | 第57-62页 |
4.1 12 h碱胁迫条件下耐碱棉花差异蛋白的功能分析 | 第57-58页 |
4.2 6 h碱胁迫条件下棉花叶片差异蛋白的功能分析 | 第58-59页 |
4.3 6 h碱胁迫条件下棉花根部差异蛋白的功能分析 | 第59-62页 |
第五章 结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-68页 |
致谢 | 第68-69页 |