| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 縮略词简表 | 第13-14页 |
| 第一部分 骨不连断端间组织干细胞的分离、培养与鉴定 | 第14-28页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 1 | 第15-18页 |
| 1.1 材料与方法 | 第15-16页 |
| 1.1.1 研究对象 | 第15页 |
| 1.1.2. 主要试剂 | 第15页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第15-16页 |
| 1.1.4 实验所需溶液配制 | 第16页 |
| 1.2 实验方法与步骤 | 第16-18页 |
| 1.2.1 NCs细胞体外分离和培养的实验步骤 | 第16-17页 |
| 1.2.2 NCs细胞的传代培养 | 第17页 |
| 1.2.3 NCs细胞表面抗原流式细胞仪(Flow cytometry,FCM)检测方法和步骤 | 第17-18页 |
| 1.2.4 NCs细胞生长与增值(MTT) | 第18页 |
| 1.3 统计学处理 | 第18页 |
| 2 结果 | 第18-23页 |
| 2.1 原代培养、传代培养的骨不连细胞的光镜观察 | 第18-21页 |
| 2.2 肥大型骨不连细胞表面抗原鉴定结果 | 第21-23页 |
| 2.3 细胞增殖能力检测结果 | 第23页 |
| 3 讨论 | 第23-27页 |
| 4 结论 | 第27-28页 |
| 第二部分 骨不连细胞体外诱导多向分化潜能的研究 | 第28-51页 |
| 前言 | 第28-29页 |
| 1 | 第29-37页 |
| 1.1 材料与方法 | 第29-31页 |
| 1.1.1 实验对象 | 第29页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第29-30页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第30-31页 |
| 1.2 实验方法与步骤 | 第31-37页 |
| 1.2.1 骨不连组织NCs细胞的分离、纯化和扩增 | 第31页 |
| 1.2.2 NCs细胞成骨细胞方向诱导 | 第31-32页 |
| 1.2.3 骨不连细胞NCs成脂肪细胞方向诱导 | 第32-33页 |
| 1.2.4 骨不连细胞NCs向成软骨细胞诱导 | 第33页 |
| 1.2.5 蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞蛋白含量 | 第33-37页 |
| 1.3 统计学处理 | 第37页 |
| 2 结果 | 第37-45页 |
| 2.1 光镜下经成骨、成脂、成软骨诱导后NCs细胞形态变化 | 第37-38页 |
| 2.2 骨不连细胞成骨诱导分化 | 第38-41页 |
| 2.3 骨不连细胞成脂诱导分化 | 第41-43页 |
| 2.4 骨不连细胞成软骨诱导分化 | 第43-45页 |
| 3 讨论 | 第45-50页 |
| 4 结论 | 第50-51页 |
| 第三部分 压应力对骨不连干细胞成软骨分化的影响 | 第51-84页 |
| 前言 | 第51-52页 |
| 1 | 第52-68页 |
| 1.1 材料与方法 | 第52-56页 |
| 1.1.1 实验对象 | 第52页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第52-53页 |
| 1.1.3 主要仪器和设备 | 第53-54页 |
| 1.1.4 细胞株 | 第54页 |
| 1.1.5 菌株 | 第54页 |
| 1.1.6 病毒载体 | 第54-56页 |
| 1.2 实验方法与步骤 | 第56-68页 |
| 1.2.1 人骨不连细胞NCs的分离、纯化和扩增 | 第56页 |
| 1.2.2 骨不连细胞加压装置的设计及原理 | 第56-58页 |
| 1.2.3 骨不连细胞NCs加压方法及步骤 | 第58页 |
| 1.2.4 细胞增殖能力检测(MTT法) | 第58页 |
| 1.2.5 实时荧光定量PCR检测方法及步骤 | 第58-60页 |
| 1.2.6 TGFβ1-shRNA表达载体的构建 | 第60-64页 |
| 1.2.7 TGFβ1-shRNA慢病毒包装 | 第64-68页 |
| 1.2.8 Western blot检测方法 | 第68页 |
| 1.3 统计学处理 | 第68页 |
| 2 结果 | 第68-78页 |
| 2.1 细胞加压后细胞形态的变化 | 第68-69页 |
| 2.2 不同压应力对NCs细胞的影响 | 第69-72页 |
| 2.3 慢病毒介导的TGFβ1-shRNA的构建、包装与验证 | 第72-74页 |
| 2.4 压应力处理NCs激活TGFβ1-smad2通路 | 第74-76页 |
| 2.5 压应力处理NCs细胞通过TGFβ1上调成软骨标志因子的表达 | 第76-78页 |
| 3 讨论 | 第78-83页 |
| 4 结论 | 第83-84页 |
| 结论 | 第84-85页 |
| 第一部分 参考文献 | 第85-88页 |
| 第二部分 参考文献 | 第88-91页 |
| 第三部分 参考文献 | 第91-94页 |
| 综述 | 第94-103页 |
| 参考文献 | 第99-103页 |
| 攻读博士期间撰写及发表的论文 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
