| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 英文缩略词 (Abbreviations) | 第12-13页 |
| 引言 | 第13-17页 |
| 第一章 人食管鳞癌紫杉醇耐药细胞株及对应的裸鼠移植瘤耐药模型的建立 | 第17-55页 |
| 1.1 实验材料 | 第17-22页 |
| 1.1.1 药品 | 第17页 |
| 1.1.2 试剂 | 第17-19页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第19页 |
| 1.1.4 实验细胞与动物 | 第19-20页 |
| 1.1.5 常用溶剂配制 | 第20-22页 |
| 1.2 实验方法 | 第22-31页 |
| 1.2.1 细胞培养 | 第22-23页 |
| 1.2.2 耐药细胞模型的建立 | 第23-24页 |
| 1.2.3 MTT 实验测定亲本细胞与耐药细胞对多种细胞毒类化合物的敏感性 | 第24页 |
| 1.2.4 耐药细胞耐药稳定性的检测 | 第24页 |
| 1.2.5 细胞和细胞核形态学观察 | 第24-25页 |
| 1.2.6 Annexin V/PI 双染色法检测细胞凋亡率 | 第25页 |
| 1.2.7 两种细胞生长曲线及倍增时间的比较 | 第25页 |
| 1.2.8 克隆形成实验对比亲本细胞及耐药细胞的集落形成能力 | 第25页 |
| 1.2.9 细胞周期分析 | 第25-26页 |
| 1.2.10 Western blot 检测相关蛋白的表达 | 第26-30页 |
| 1.2.11 细胞 Rh123 摄入/排出功能的检测 | 第30页 |
| 1.2.12 EC109/Taxol 对应的裸鼠移植瘤耐药模型的的建立及鉴定 | 第30-31页 |
| 1.3 实验结果 | 第31-43页 |
| 1.3.1 食管鳞癌耐药细胞株的成功建立 | 第31-32页 |
| 1.3.2 筛选过程耐药性的变化 | 第32页 |
| 1.3.3 EC109/Taxol 细胞对多种细胞毒类化合物的药敏性的检测 | 第32-34页 |
| 1.3.4 EC109/Taxol 细胞耐药性的稳定性 | 第34页 |
| 1.3.5 细胞和细胞核形态学观察 | 第34-35页 |
| 1.3.6 Annexin V/PI 双染色法检测细胞凋亡率 | 第35-36页 |
| 1.3.7 细胞生长曲线和倍增时间 | 第36-37页 |
| 1.3.8 克隆形成率 | 第37-38页 |
| 1.3.9 EC109 和 EC109/Taxol 细胞周期分布分析 | 第38-39页 |
| 1.3.10 EC109/Taxol 细胞耐药机制的研究 | 第39-41页 |
| 1.3.11 EC109/Taxol 对应的裸鼠移植瘤耐药模型的建立及耐药性的鉴定 | 第41-43页 |
| 1.4 讨论 | 第43-49页 |
| 1.5 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 第二章 新型抗肿瘤化合物 JP 的抗耐药肿瘤研究 | 第55-73页 |
| 2.1 实验材料 | 第56-58页 |
| 2.1.1 药品 | 第56页 |
| 2.1.2 试剂 | 第56-57页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第57-58页 |
| 2.1.4 实验细胞 | 第58页 |
| 2.2 实验方法 | 第58-61页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第58页 |
| 2.2.2 MTT 法测定 JP 对 EC109/Taxol 细胞存活率的影响 | 第58-59页 |
| 2.2.3 细胞形态学观察 | 第59页 |
| 2.2.4 JP 对耐药细胞生长曲线的影响 | 第59页 |
| 2.2.5 平板克隆形成实验 | 第59页 |
| 2.2.6 细胞周期分析 | 第59-60页 |
| 2.2.7 Hoechst 33258 染色检测细胞凋亡 | 第60页 |
| 2.2.8 JP 对 EC109/Taxol 细胞的凋亡诱导作用 | 第60页 |
| 2.2.9 Western blot 检测 p53、Procaspase-3、Procaspase-9、Cleaved-caspase-9、Bcl-2、Bax 的表达 | 第60-61页 |
| 2.3 结果 | 第61-67页 |
| 2.3.1 JP 体外抑制 EC109/Taxol 细胞增殖 | 第61-62页 |
| 2.3.2 不同浓度 JP 作用后 EC109/Taxol 细胞形态学的改变 | 第62页 |
| 2.3.3 JP 对 EC109/Taxol、EC109 细胞生长曲线的影响 | 第62-63页 |
| 2.3.4 平板克隆形成实验 | 第63-64页 |
| 2.3.5 JP 对 EC109/Taxol 细胞周期分布的影响 | 第64-65页 |
| 2.3.6 Hoechst 33258 染色法观察 JP 对 EC109/Taxol 细胞凋亡的影响 | 第65页 |
| 2.3.7 JP 对 EC109/Taxol 细胞的诱导凋亡作用 | 第65-66页 |
| 2.3.8 JP 对 EC109/Taxol 细胞凋亡相关蛋白的影响 | 第66-67页 |
| 2.4 讨论 | 第67-70页 |
| 2.5 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-73页 |
| 个人简历 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
