中文摘要 | 第9-12页 |
英文摘要 | 第12-15页 |
前言 | 第16-19页 |
第一部分 CD82-EC1-mP对肿瘤细胞迁移的影响 | 第19-28页 |
材料与方法 | 第19-23页 |
1.实验材料 | 第19-20页 |
1.1 实验细胞 | 第19页 |
1.2 实验试剂 | 第19-20页 |
1.3 实验仪器 | 第20页 |
1.4 相关溶液配制 | 第20页 |
2.实验方法 | 第20-23页 |
2.1 细胞复苏与培养 | 第20页 |
2.2 细胞传代与冻存 | 第20-21页 |
2.2.1 贴壁细胞传代 | 第20-21页 |
2.2.2 悬浮细胞传代 | 第21页 |
2.2.3 冻存 | 第21页 |
2.3 黏附与贴壁实验 | 第21页 |
2.4 细胞迁移实验 | 第21-23页 |
2.4.1 细胞划痕实验 | 第21页 |
2.4.2 transwell实验 | 第21-23页 |
结果 | 第23-27页 |
1.CD82-EC1-mP促进肿瘤细胞同源粘连及聚集 | 第23-24页 |
2.CD82-EC1-mP抑制肿瘤细胞的贴壁生长… | 第24页 |
3.划痕法检测CD82-EC1-mP对肿瘤细胞体外迁移运动的影响 | 第24-25页 |
4.transwell法检测CD82-EC1-mP对肿瘤细胞体外迁移运动的影响 | 第25-27页 |
讨论 | 第27页 |
结论 | 第27-28页 |
第二部分 CD82-EC1-mP抑制肿瘤细胞迁移机制的研究 | 第28-48页 |
材料与方法 | 第28-34页 |
1.实验材料 | 第28-31页 |
1.1 实验细胞 | 第28页 |
1.2 实验试剂 | 第28-30页 |
1.3 实验仪器 | 第30页 |
1.4 相关溶液配制 | 第30-31页 |
2.实验方法 | 第31-34页 |
2.1 细胞培养 | 第31页 |
2.2 CD82-EC1-mP处理实验 | 第31-32页 |
2.3 Biotin-CD82-EC1-mP荧光结合实验 | 第32页 |
2.4 免疫印迹实验 | 第32-33页 |
2.4.1 总蛋白的提取 | 第32页 |
2.4.2 SDS-PAGE分离目的蛋白 | 第32页 |
2.4.3 转膜及抗体结合 | 第32-33页 |
2.4.4 HRP-ECL法检测目的蛋白 | 第33页 |
2.5 细胞免疫荧光实验 | 第33-34页 |
结果 | 第34-46页 |
1.CD82-EC1-mP可直接结合到肿瘤细胞表面 | 第34-36页 |
2.CD82-EC1-mP对肿瘤细胞Vimentin的表达和细胞内分布的影响 | 第36-37页 |
3.CD82-EC1-mP对肿瘤细p-Vimentin的表达和细胞内分布的影响 | 第37-40页 |
4.CD82-EC1-mP对肿瘤细胞E-cadherin的表达和细胞内分布的影响 | 第40-42页 |
5.CD82-EC1-mP对肿瘤细胞β-Catenin的表达和细胞内分布的影响 | 第42-44页 |
6.CD82-EC1-mP促进β-Catenin与E-cadherin共定位 | 第44-45页 |
7. CD82-EC1-mP下调Wnt信号通路,抑制 GSK3β磷酸化使其活化,促进β-catenin的磷酸化降解 | 第45-46页 |
讨论 | 第46-47页 |
结论 | 第47-48页 |
第三部分 CD82-EC1-mP对肿瘤细胞体内肺转移形成的影响 | 第48-53页 |
材料与方法 | 第48-50页 |
1.实验材料 | 第48-49页 |
1.1 实验细胞 | 第48页 |
1.2 实验试剂 | 第48页 |
1.3 实验仪器 | 第48-49页 |
1.4 相关溶液配制 | 第49页 |
2.实验方法 | 第49-50页 |
2.1 体内实验 | 第49-50页 |
结果 | 第50-51页 |
1.CD82-EC1-mP对肿瘤细胞体内肺转移的影响 | 第50-51页 |
讨论 | 第51-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
综述 | 第59-74页 |
参考文献 | 第65-74页 |
致谢 | 第74-75页 |