| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-25页 |
| ·背景资料——生物农药 | 第12-17页 |
| ·生物农药的定义与分类 | 第12-16页 |
| ·微生物源农药 | 第12-13页 |
| ·植物源农药 | 第13-15页 |
| ·动物源农药 | 第15页 |
| ·天敌昆虫 | 第15-16页 |
| ·转基因作物 | 第16页 |
| ·生物农药的发展与优点 | 第16-17页 |
| ·微生物除草剂 | 第17-23页 |
| ·微生物除草剂的分类与作用机制 | 第17-19页 |
| ·微生物除草剂的研究历史与现状 | 第19-20页 |
| ·微生物除草剂的主要研究成果 | 第20-23页 |
| ·已登记的微生物除草剂品种 | 第20-22页 |
| ·正在试用的微生物除草剂 | 第22-23页 |
| ·中国微生物除草剂的研究状况与展望 | 第23页 |
| ·本课题的立题背景及研究意义 | 第23-25页 |
| 第2章 实验设计与方案 | 第25-32页 |
| ·微生物的分离及菌种的生物筛选 | 第26-27页 |
| ·菌株个体形态及培养特征 | 第27页 |
| ·菌株生理生化特性测定 | 第27-28页 |
| ·全细胞糖分析以及全细胞氨基酸分析 | 第28页 |
| ·16S RDNA序列测定及分析方法 | 第28页 |
| ·活性组分在萃取液中的分布及热稳定性实验 | 第28页 |
| ·活性组分的分离提纯 | 第28-31页 |
| ·发酵液预处理 | 第29页 |
| ·溶剂萃取 | 第29页 |
| ·硅胶柱层析色谱分离 | 第29-30页 |
| ·HPLC纯化 | 第30-31页 |
| ·有效组分的结构鉴定 | 第31页 |
| ·生物活性测试跟踪 | 第31-32页 |
| 第3章 放线菌SPRI-38490的菌种鉴定 | 第32-50页 |
| ·材料试剂及仪器 | 第32-34页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·菌株 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33页 |
| ·其他药品与试剂 | 第33-34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-43页 |
| ·菌株个体形态及培养特征 | 第35页 |
| ·菌株个体形态特征观察 | 第35页 |
| ·菌落培养特征观察 | 第35页 |
| ·菌株生理生化特性测定 | 第35-37页 |
| ·牛奶凝固与胨化测定 | 第35页 |
| ·明胶液化测定 | 第35页 |
| ·纤维素水解测定 | 第35-36页 |
| ·淀粉水解测定 | 第36页 |
| ·硝酸盐还原测定 | 第36页 |
| ·酪氨酸水解实验 | 第36页 |
| ·硫化氢产生实验 | 第36-37页 |
| ·碳源利用试验 | 第37页 |
| ·全细胞糖分析以及全细胞氨基酸分析 | 第37-38页 |
| ·制板 | 第37页 |
| ·收集菌体 | 第37页 |
| ·菌体水解 | 第37页 |
| ·点样 | 第37-38页 |
| ·展层与显色 | 第38页 |
| ·16S DNA的抽提、测序及分析 | 第38-43页 |
| ·菌丝体裂解 | 第38页 |
| ·PCR扩增 | 第38-39页 |
| ·引物 | 第39页 |
| ·反应混合液配制 | 第39页 |
| ·PCR反应条件 | 第39页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第39-40页 |
| ·溶液配制及制胶 | 第39-40页 |
| ·电泳方法 | 第40页 |
| ·DNA的回收 | 第40-41页 |
| ·载体连接 | 第41页 |
| ·质粒DNA的抽提 | 第41-42页 |
| ·质粒DNA酶切鉴定 | 第42页 |
| ·酶切 | 第42页 |
| ·电泳 | 第42页 |
| ·测序 | 第42页 |
| ·系统发育树分析 | 第42-43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-50页 |
| ·菌株SPRI-38490的培养特征 | 第43页 |
| ·葡萄糖天门冬素琼脂培养基上的菌株SPRI-38490个体形态特征 | 第43页 |
| ·菌株SPRI-38490的生理生化特征 | 第43-44页 |
| ·菌株SPRI-38490的全细胞糖分析 | 第44-45页 |
| ·菌株SPRI-38490的全细胞氨基酸分析 | 第45-46页 |
| ·16S RDNA测序及分析 | 第46-47页 |
| ·酶切产物电泳结果与分析 | 第46页 |
| ·16S RDNA测序结果 | 第46页 |
| ·系统进化树构建与分析 | 第46-47页 |
| ·菌株SPRI-38490与除草素A产生菌STREPTOMYCES NODOSUS的比较 | 第47-49页 |
| ·结论 | 第49-50页 |
| 第4章 抗生素SPRI-38490-A有效组分的分离提取及精制 | 第50-57页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·实验仪器 | 第50页 |
| ·材料与试剂 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-52页 |
| ·放线菌SPRI-38490的发酵培养 | 第51页 |
| ·放线菌SPRI-38490发酵液预处理 | 第51页 |
| ·放线菌SPRI-38490产活性物质的稳定性研究 | 第51-52页 |
| ·温度对发酵液稳定性的影响 | 第51页 |
| ·不同PH条件下发酵液的稳定性 | 第51-52页 |
| ·硅胶柱层析色谱分离实验 | 第52页 |
| ·生物活性测试 | 第52页 |
| ·结果与分析 | 第52-56页 |
| ·放线菌SPRI-38490发酵液预处理研究结果 | 第53页 |
| ·PH及温度对发酵液中活性物质稳定性的影响 | 第53页 |
| ·温度对发酵液中活性物质稳定性的影响 | 第53页 |
| ·不同PH值下,活性物质的稳定性 | 第53页 |
| ·层析展开剂的选择以及活性带的确定 | 第53-54页 |
| ·硅胶柱层析色谱分离条件的确定和优化 | 第54页 |
| ·高效液相(HPLC)分析分离SPRI-38490-A | 第54-56页 |
| ·纯品的提取工艺 | 第56-57页 |
| 第5章 放线菌SPRI-38490有效组分的谱图解析 | 第57-60页 |
| ·实验仪器 | 第57页 |
| ·谱图解析 | 第57-59页 |
| ·抗生素SPRI-38490-A的分子量 | 第57-58页 |
| ·抗生素SPRI-38490-A的碳和氢原子数目的初步确认 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| 第6章 抗生素SPRI-38490-A的生物活性测定及结果分析 | 第60-62页 |
| ·实验材料及方法 | 第60-61页 |
| ·实验材料 | 第60页 |
| ·实验步骤 | 第60-61页 |
| ·生物测定结果分析与讨论 | 第61-62页 |
| 第7章 抗生素SPRI-38490-A的分析方法的研究 | 第62-66页 |
| ·实验材料和方法 | 第62-63页 |
| ·仪器与溶剂 | 第62页 |
| ·高效液相色谱条件 | 第62页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第62-63页 |
| ·样品预处理 | 第63页 |
| ·测定与计算 | 第63-65页 |
| ·外标法测定步骤 | 第63页 |
| ·效价计算 | 第63-64页 |
| ·测定方法的精密度 | 第64页 |
| ·测定方法的准确性-回收率的测定 | 第64-65页 |
| ·样品的高效液相分析 | 第65页 |
| ·结果讨论 | 第65-66页 |
| 第8章 结论及展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
