| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-37页 |
| 第一章 草鱼呼肠孤病毒相关研究 | 第11-25页 |
| 1.1 草鱼出血病病毒的基因结构 | 第11页 |
| 1.2 GCRV 编码的蛋白及功能 | 第11-15页 |
| 1.2.1 抗原性 | 第13-14页 |
| 1.2.2 病毒感染特性 | 第14-15页 |
| 1.3 呼肠孤病毒的细胞毒性 | 第15页 |
| 1.4 草鱼出血病的检测 | 第15-17页 |
| 1.5 草鱼出血病的防治 | 第17-18页 |
| 参考文献 | 第18-25页 |
| 第二章 禽流感相关研究 | 第25-37页 |
| 2.1 禽流感病毒基因组 | 第26-27页 |
| 2.2 AIV 基因组编码的蛋白与功能 | 第27-28页 |
| 2.3 流感病毒的遗传变异 | 第28-29页 |
| 2.4 禽流感疫苗的研究进展 | 第29-31页 |
| 2.4.1 全病毒灭活疫苗 | 第29页 |
| 2.4.2 亚单位疫苗 | 第29-30页 |
| 2.4.3 重组活载体疫苗 | 第30页 |
| 2.4.4 核酸疫苗 | 第30-31页 |
| 2.4.5 抗原表位疫苗 | 第31页 |
| 参考文献 | 第31-37页 |
| 第二部分 研究报告 | 第37-101页 |
| 第三章 研究目的和研究内容 | 第37-44页 |
| 3.1 研究目的和意义 | 第37-39页 |
| 3.2 研究内容 | 第39-41页 |
| 3.2.1 草鱼出血病主要研究内容 | 第39页 |
| 3.2.2 禽流感多表位疫苗研究内容 | 第39-40页 |
| 3.2.3 草鱼出血病疫苗研制的主要研究技术路线 | 第40-41页 |
| 3.2.4 禽流感多表位疫苗的主要研究技术路线 | 第41页 |
| 参考文献 | 第41-44页 |
| 第四章 vp7、vp6 原核表达及多克隆抗体的制备 | 第44-60页 |
| 摘要 | 第44-45页 |
| 1 实验材料 | 第45-46页 |
| 1.1 生物材料 | 第45页 |
| 1.2 实验试剂 | 第45页 |
| 1.3 实验仪器 | 第45-46页 |
| 2 实验方法 | 第46-49页 |
| 2.1 vp7 基因、vp6 基因、β-actin 启动子的克隆 | 第46-47页 |
| 2.2 vp7、vp6、基因及β-actin 启动子的 T 载体克隆与鉴定 | 第47页 |
| 2.3 pET28a(+)-VP7、pET28a(+)-VP6 表达载体的构建 | 第47-48页 |
| 2.4 重组载体 pET28a(+)-VP7 及 pET28a(+)-VP6 的诱导表达 | 第48页 |
| 2.5 VP7、VP6 蛋白的 SDS-PAGE 分析 | 第48-49页 |
| 2.6 VP7、VP6 蛋白的 Western blotting 分析 | 第49页 |
| 2.7 VP7、VP6 多克隆抗体的制备 | 第49页 |
| 3 实验结果 | 第49-54页 |
| 3.1 vp7、vp6 基因及β-actin 基因启动子扩增的结果 | 第49-50页 |
| 3.2 vp7、vp6 基因及β-actin 的 T 载体克隆结果 | 第50-51页 |
| 3.3 表达载体 pET28a(+)-VP7 的鉴定 | 第51-52页 |
| 3.4 重组 VP7、VP6 蛋白的鉴定 | 第52-54页 |
| 3.5 多克隆抗体的检测 | 第54页 |
| 4 讨论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 第五章 GCRV VP7 蛋白亚单位/vp6 DNA 联合口服疫苗的制备及免疫效果评价 | 第60-85页 |
| 摘要 | 第60-61页 |
| 1 实验材料 | 第61-62页 |
| 1.1 生物材料 | 第61页 |
| 1.2 实验试剂 | 第61-62页 |
| 1.3 实验仪器 | 第62页 |
| 2 实验方法 | 第62-69页 |
| 2.1 重组供体质粒的构建 | 第62-63页 |
| 2.2 重组 Bacmid 的获得 | 第63-65页 |
| 2.3 重组病毒的获得 | 第65-66页 |
| 2.4 重组蛋白的表达检测 | 第66-67页 |
| 2.5 CIK 细胞的培养 | 第67页 |
| 2.6 重组病毒接种 CIK 细胞及 VP6 抗原表达的检测 | 第67-68页 |
| 2.7 疫苗的制备 | 第68页 |
| 2.8 疫苗口服免疫鱼体 | 第68页 |
| 2.10 RT-PCR 检测免疫鱼体中 vp6 基因的表达 | 第68页 |
| 2.11 组织免疫荧光 | 第68-69页 |
| 3 结果与分析 | 第69-78页 |
| 3.1 重组转移载体 pFastTM-Dual-VP7-VP6-β-actin 的鉴定 | 第69-71页 |
| 3.2 重组病毒 Bacmid-VP7-VP6-β-actin 的产生及鉴定 | 第71页 |
| 3.3 重组病毒的获得及鉴定 | 第71-73页 |
| 3.4 重组蛋白的表达检测 | 第73-75页 |
| 3.5 转染重组病毒的 CIK 细胞中表达 VP6 抗原的检测 | 第75-76页 |
| 3.6 口服免疫后鱼血中 vp6 mRNA 的检测 | 第76-77页 |
| 3.7 免疫荧光检测免疫草鱼组织中 VP6 蛋白 | 第77-78页 |
| 4 讨论 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-85页 |
| 第六章 禽流感多抗原表位在家蚕中的表达 | 第85-101页 |
| 摘要 | 第85-86页 |
| 1 实验材料 | 第86页 |
| 1.1 生物材料 | 第86页 |
| 1.2 实验试剂 | 第86页 |
| 2 实验方法 | 第86-92页 |
| 2.1 CTL T 细胞表位盒核苷酸序列 | 第86-88页 |
| 2.2 Th 及 B 细胞表位盒核苷酸序列 | 第88-90页 |
| 2.3 重组质粒的构建 | 第90-91页 |
| 2.4 重组 Bacmid 的获得 | 第91页 |
| 2.5 重组杆状病毒的获得 | 第91-92页 |
| 2.6 CTLT 抗原表位及 THB 抗原表位表达与鉴定 | 第92页 |
| 3 结果与分析 | 第92-96页 |
| 3.1 供体质粒的鉴定 | 第92-94页 |
| 3.2 重组 Bacmid 的获得 | 第94页 |
| 3.3 重组杆状病毒的获得 | 第94-96页 |
| 3.4 表位抗原表达检测 | 第96页 |
| 4 讨论 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-101页 |
| 结论 | 第101-102页 |
| 1 已取得的成果 | 第101页 |
| 2 有待进行的研究 | 第101-102页 |
| 公开发表学术论文 | 第102-103页 |
| 附录一：缩略词表 | 第103-105页 |
| 1．常规缩略词表 | 第103-104页 |
| 2．专业词汇缩略词表 | 第104-105页 |
| 附录二：部分质粒图谱 | 第105-107页 |
| 致谢 | 第107-109页 |
