| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 英文縮略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-19页 |
| 1.1 无乳链球菌与致病机制相关的毒力因子研究进展 | 第13-18页 |
| 1.1.1 孔毒素 | 第14页 |
| 1.1.2 促进免疫逃避的因子 | 第14-16页 |
| 1.1.3 粘附因子 | 第16-18页 |
| 1.2 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 奶牛隐性乳房炎病原菌的分离鉴定及无乳链球菌的耐药性分析 | 第19-27页 |
| 2.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 牛乳收集 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂及材料 | 第19页 |
| 2.1.3 溶液的配制 | 第19页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-23页 |
| 2.2.1 隐性乳房炎的检测及牛乳的收集 | 第20页 |
| 2.2.2 细菌的分离培养 | 第20-21页 |
| 2.2.3 细菌的DNA提取 | 第21页 |
| 2.2.4 细菌16SrDNA扩增 | 第21-22页 |
| 2.2.5 无乳链球菌的血清型鉴定 | 第22-23页 |
| 2.2.6 无乳链球菌的的药物敏感性试验 | 第23页 |
| 2.3 结果 | 第23-25页 |
| 2.3.1 细菌的分离鉴定 | 第23-24页 |
| 2.3.2 无乳链球菌的血清型鉴定 | 第24-25页 |
| 2.3.3 无乳链球菌的药物敏感性实验 | 第25页 |
| 2.4 讨论 | 第25-27页 |
| 2.4.1 细菌的分离鉴定 | 第25-26页 |
| 2.4.2 无乳链球菌的耐药试验 | 第26-27页 |
| 第三章 无乳链球菌BIBA基因的克隆及序列分析 | 第27-35页 |
| 3.1 材料 | 第27页 |
| 3.1.1 菌株 | 第27页 |
| 3.1.2 主要试剂及材料 | 第27页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第27页 |
| 3.2 方法 | 第27-31页 |
| 3.2.1 引物设计与合成 | 第27-28页 |
| 3.2.2 BibA基因的PCR扩增 | 第28页 |
| 3.2.3 目的基因的克隆与鉴定 | 第28-30页 |
| 3.2.4 BibA基因片段的生物信息学分析 | 第30-31页 |
| 3.3 结果 | 第31-34页 |
| 3.3.1 BibA基因的克隆与鉴定 | 第31-32页 |
| 3.3.2 BibA基因的生物信息学分析 | 第32-34页 |
| 3.4 讨论 | 第34-35页 |
| 第四章 BIBA蛋白的表达与纯化 | 第35-45页 |
| 4.1 材料 | 第35-36页 |
| 4.1.1 菌株 | 第35页 |
| 4.1.2 主要试剂及材料 | 第35页 |
| 4.1.3 试剂的配置 | 第35-36页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第36页 |
| 4.2 方法 | 第36-40页 |
| 4.2.1 表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 4.2.2 工程菌的构建 | 第37页 |
| 4.2.3 BibA蛋白的诱导表达 | 第37-39页 |
| 4.2.4 诱导条件的优化 | 第39页 |
| 4.2.5 蛋白的纯化与复性 | 第39-40页 |
| 4.3 结果 | 第40-43页 |
| 4.3.1 重组表达质粒的鉴定 | 第40页 |
| 4.3.2 BibA原核表达的可溶性分析 | 第40-41页 |
| 4.3.3 目的蛋白的检测 | 第41页 |
| 4.3.4 表达条件的优化 | 第41-43页 |
| 4.3.5 蛋白的纯化与复性 | 第43页 |
| 4.4 讨论 | 第43-45页 |
| 第五章 全文结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-53页 |
| 附录 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简历 | 第55页 |