| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词对照表 | 第9-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-12页 |
| 第2章 材料与方法 | 第12-26页 |
| 2.1 试剂与材料 | 第12-14页 |
| 2.1.1 主要试剂列表 | 第12-13页 |
| 2.1.2 细胞 | 第13页 |
| 2.1.3 主要仪器列表 | 第13-14页 |
| 2.2 实验方法及操作流程 | 第14-25页 |
| 2.2.1 siRNA 序列设计及合成 | 第14页 |
| 2.2.2 BxPC-3 细胞培养及实验分组 | 第14页 |
| 2.2.3 BxPC-3 细胞的转染 | 第14-15页 |
| 2.2.4 转染后 BxPC-3 细胞的 RNA 提取与鉴定 | 第15-16页 |
| 2.2.5 荧光实时定量 PCR 法检测转染后各组细胞 DNMT1 mRNA 表达. | 第16-18页 |
| 2.2.6 Western blot 检测转染后各组细胞 DNMT1 蛋白表达 | 第18-19页 |
| 2.2.7 荧光实时定量 PCR 法检测转染后各组细胞 miR-148a 表达 | 第19-21页 |
| 2.2.8 甲基化特异性 PCR 法检测转染后各组细胞 miR-148a 基因启动子CpG 岛甲基化水平 | 第21-24页 |
| 2.2.9 MTT 法检测细胞体外增殖活力 | 第24-25页 |
| 2.3 统计分析 | 第25-26页 |
| 第3章 结果 | 第26-35页 |
| 3.1 各组样本总 RNA、DNA 提取物质量鉴定 | 第26-28页 |
| 3.1.1 总 RNA 质量鉴定 | 第26-27页 |
| 3.1.2 总 DNA 质量鉴定 | 第27-28页 |
| 3.2 DNMT1 基因干扰对胰腺癌 BxPC-3 细胞 DNMT1 mRNA 和蛋白表达的影响 | 第28-31页 |
| 3.2.1 荧光实时定量 PCR 法检测转染后各组细胞 DNMTl mRNA 表达量 | 第28-30页 |
| 3.2.2 Western Blot 检测转染后各组细胞 DNMT1 蛋白表达量 | 第30-31页 |
| 3.3 DNMT1 基因干扰对胰腺癌 BxPC-3 细胞 miR-148a 表达水平的影响 | 第31-33页 |
| 3.4 DNMT1基因干扰对胰腺癌 BxPC-3细胞miR-148a基因启动子CpG岛甲基化状态的影响 | 第33页 |
| 3.5 DNMT1 基因干扰对胰腺癌 BxPC-3 细胞体外增殖活力的影响 | 第33-35页 |
| 第4章 讨论 | 第35-40页 |
| 第5章 结论 | 第40-41页 |
| 第6章 展望 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-46页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第46-47页 |
| 综述 | 第47-56页 |
| 摘要 | 第47页 |
| Abstract | 第47-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
