| 中文摘要 | 第11-16页 |
| Abstract | 第16-21页 |
| 符号说明 | 第22-24页 |
| 前言 | 第24页 |
| 综述 | 第24-34页 |
| 第一部分 miR-143-3p靶向IGF1R和IGFBP5调控RA滑膜细胞的增殖和凋亡 | 第34-67页 |
| 1. 背景 | 第34-37页 |
| 2. 材料和方法 | 第37-49页 |
| 2.1 细胞培养 | 第37页 |
| 2.2 RA患者滑膜组织标本 | 第37页 |
| 2.3 试剂 | 第37-38页 |
| 2.4 仪器 | 第38页 |
| 2.5 miR-143-3p在RA滑膜细胞的表达及其生物学功能 | 第38-43页 |
| 2.5.1 定量PCR检测RA滑膜组织和细胞系中miR-143-3p表达 | 第38-40页 |
| 2.5.2 miR-143-3p抑制物转染成纤维滑膜细胞 | 第40-41页 |
| 2.5.3 MTT法检测抑制miR-143-3p对成纤维滑膜细胞增殖的影响 | 第41页 |
| 2.5.4 抑制miR-143-3p对滑膜细胞凋亡的影响 | 第41-42页 |
| 2.5.5 定量PCR和Western blot检测抑制miR-143-3p对成纤维滑膜细胞系MH7A中Bcl-2、Bax、casepase-3表达的影响 | 第42-43页 |
| 2.6 miR-143-3p下游靶基因IGF1R和IGFBP5的鉴定 | 第43-47页 |
| 2.6.1 双荧光素酶报告基因检测 | 第43-46页 |
| 2.6.2 定量PCR检测RA滑膜细胞中IGF1R和IGFBP5的表达 | 第46-47页 |
| 2.6.3 Western blot检测RA滑膜细胞中IGF1R和IGFBP5的表 | 第47页 |
| 2.7 miR-143-3p通过IGF1R和IGFBP5调控TNF-α诱导的成纤维滑膜细胞增殖和凋亡 | 第47-49页 |
| 2.7.1 低表达mi R-143-3p对靶基因IGF1R和IGFBP5表达的影响 | 第47页 |
| 2.7.2 干涉IGF1R和IGFBP5对TNF-α诱导的成纤维滑膜细胞凋亡、增殖的影响 | 第47-48页 |
| 2.7.3 miR-143-3p和IGF1R siRNA或IGFBP5 siRNA共转染对TNF-α诱导的成纤维滑膜细胞增殖、凋亡的影响 | 第48-49页 |
| 3. 结果 | 第49-61页 |
| 3.1 miR-143-3p在RA滑膜组织和RA成纤维滑膜细胞的表达及其生物学功能 | 第49-53页 |
| 3.1.1 miR-143-3p mRNA在RA患者滑膜组织和TNF-α诱导的MH7A细胞中高表达 | 第49-50页 |
| 3.1.2 miR-143-3p的转染效率 | 第50页 |
| 3.1.3 低表达miR-143-3p能抑制RA成纤维滑膜细胞增殖 | 第50-51页 |
| 3.1.4 低表达miR-143-3p能促进RA成纤维滑膜细胞凋亡 | 第51-52页 |
| 3.1.5 低表达miR-143-3p对RA成纤维滑膜细胞Bcl-2、Bax、casepase-3表达的影响 | 第52-53页 |
| 3.2 miR-143-3p下游靶基因IGF1R和IGFBP5的鉴定 | 第53-56页 |
| 3.2.1 荧光素酶报告基因检测 | 第53-54页 |
| 3.2.2 定量PCR和Western blot检测RA成纤维滑膜细胞中IGF1R和IGFBP5的表达 | 第54-55页 |
| 3.2.3 miR-143-3p与IGF1R和IGFBP5表达量的相关性分析 | 第55-56页 |
| 3.3 miR-143-3p通过IGF1R和IGFBP5调控RA成纤维滑膜细胞增殖和凋亡 | 第56-61页 |
| 3.3.1 抑制miR-143-3p能上调RA成纤维滑膜细胞IGF1R和IGFBP5表达 | 第56-57页 |
| 3.3.2 si-IGF1R和si-IGFBP5的干涉效率检验 | 第57-58页 |
| 3.3.3 miR-143-3p和si-IGF1R或si-IGFBP5共转染对RA成纤维滑膜细胞增殖的影响 | 第58-59页 |
| 3.3.4 miR-143-3p和IGF1R siRNA或IGFBP5 siRNA共转染对RA成纤维滑膜细胞凋亡的影响 | 第59-61页 |
| 4. 讨论 | 第61-66页 |
| 5. 小结 | 第66-67页 |
| 第二部分 miR-143-3p对TNF-α诱导的类风湿关节炎滑膜细胞Ras/p38 MAPK通路的影响 | 第67-76页 |
| 1. 背景 | 第67-69页 |
| 2. 材料和方法 | 第69-71页 |
| 2.1 细胞培养 | 第69页 |
| 2.2 试剂 | 第69页 |
| 2.3 仪器 | 第69页 |
| 2.4 定量PCR和Western Blot检测转染miR-143-3p的RA成纤维滑膜细胞Ras、p-p38、p38的表达 | 第69-71页 |
| 3. 结果 | 第71-73页 |
| 3.1 转染miR-143-3p inhibitor的RA成纤维滑膜细胞Ras、p-p38 mRNA表达 | 第71页 |
| 3.2 转染miR-143-3p inhibitor的RA成纤维滑膜细胞Ras、p38蛋白表达 | 第71-73页 |
| 4. 讨论 | 第73-75页 |
| 5. 小结 | 第75-76页 |
| 总结 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第93-94页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第94-95页 |
| 英文论文 | 第95-125页 |
| Paper1 | 第95-105页 |
| Paper2 | 第105-125页 |
