| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩写词表 | 第14-15页 |
| 第一章 研究背景 | 第15-25页 |
| 1.1 纤维素资源的开发利用 | 第15页 |
| 1.2 纤维素的结构 | 第15-16页 |
| 1.3 纤维素的微生物降解 | 第16-19页 |
| 1.3.1 纤维素降解微生物 | 第16页 |
| 1.3.2 微生物的纤维素降解机制 | 第16-19页 |
| 1.4 纤维素结晶区的降解策略 | 第19-20页 |
| 1.4.1 CBM的作用及分类 | 第19页 |
| 1.4.2 Expansins以Expansin-like proteins | 第19-20页 |
| 1.4.3 裂解多糖单加氧酶(LPMOs) | 第20页 |
| 1.5 Cytophaga hutchinsonii研究背景 | 第20-23页 |
| 1.5.1 C.hutchinsonii的系统发育 | 第20页 |
| 1.5.2 C. hutchinsonii的特征 | 第20-21页 |
| 1.5.3 C.hutchinsonii的研究进展 | 第21-23页 |
| 1.5.4 C.hutchinsonii独特的纤维素酶系 | 第23页 |
| 1.6 论文的立题和工作思路 | 第23-25页 |
| 第二章 C.hutchinsonii表面纤维素酶系的作用 | 第25-45页 |
| 2.1 材料与方法 | 第25-37页 |
| 2.1.1 菌种及质粒 | 第25-26页 |
| 2.1.2 实验中用到的引物 | 第26-28页 |
| 2.1.3 主要试剂及仪器 | 第28页 |
| 2.1.4 培养基和缓冲液 | 第28-29页 |
| 2.1.5 分子生物学所用反应体系及操作 | 第29-30页 |
| 2.1.6 E.coli感受态细胞的制备与热激转化 | 第30-31页 |
| 2.1.7 C.hutchinsonii感受态细胞的制备及电击转化 | 第31-32页 |
| 2.1.8 基因敲除 | 第32-34页 |
| 2.1.9 滤纸降解实验 | 第34页 |
| 2.1.10 生长曲线测定 | 第34页 |
| 2.1.11 RT-PCR | 第34-36页 |
| 2.1.12 RT-qPCR | 第36-37页 |
| 2.1.13 纤维素酶活测定 | 第37页 |
| 2.2 实验结果 | 第37-44页 |
| 2.2.1 表面纤维素酶缺失后菌体能够利用纤维素 | 第37-38页 |
| 2.2.2 生长曲线 | 第38-39页 |
| 2.2.3 表面纤维素酶缺失株的酶活 | 第39-41页 |
| 2.2.4 表面糖苷酶的缺失不影响对纤维素的降解 | 第41页 |
| 2.2.5 表面糖苷酶的转录水平 | 第41-42页 |
| 2.2.6 CH681基础上敲除糖苷酶后的表型 | 第42-44页 |
| 2.3 讨论 | 第44-45页 |
| 第三章 chu_hypZ1基因功能研究 | 第45-67页 |
| 3.1 材料和方法 | 第45-56页 |
| 3.1.1 菌种及质粒 | 第45-46页 |
| 3.1.2 实验中用到的引物 | 第46-48页 |
| 3.1.3 主要试剂及仪器 | 第48-49页 |
| 3.1.4 培养基和缓冲液 | 第49-50页 |
| 3.1.5 分子生物学常用反应体系及操作 | 第50页 |
| 3.1.6 纤维素降解缺陷株的筛选 | 第50-51页 |
| 3.1.7 基因敲除 | 第51-52页 |
| 3.1.8 基因回补与过表达 | 第52页 |
| 3.1.9 再生无定形纤维素(RAC)的制备 | 第52-53页 |
| 3.1.10 XRD测定纤维素结晶度 | 第53页 |
| 3.1.11 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第53-54页 |
| 3.1.12 C. hutchinsonii各组分蛋白样品的制备(操作均在4℃下进行) | 第54-56页 |
| 3.2 结果 | 第56-65页 |
| 3.2.1 滤纸降解缺陷株的获得 | 第56-58页 |
| 3.2.2 生物信息学分析 | 第58页 |
| 3.2.3 chu_atoS与纤维素降解无关 | 第58-59页 |
| 3.2.4 chu_hypZ1是纤维素结晶区降解相关基因 | 第59-61页 |
| 3.2.5 CHU_hypZ1与纤维素结合无关 | 第61-62页 |
| 3.2.6 chu_hypZ1对纤维素酶酶活的影响 | 第62-63页 |
| 3.2.7 差异蛋白的鉴定 | 第63-65页 |
| 3.3 讨论 | 第65-67页 |
| 全文总结及展望 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77-79页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第79页 |
