| 摘要 | 第2-3页 |
| ABSTRACT | 第3-4页 |
| 1 前言 | 第8-23页 |
| 1.1 NBEAL1 基因的研究进展 | 第8-9页 |
| 1.2 BEACH 蛋白家族成员介绍 | 第9-14页 |
| 1.2.1 BEACH 蛋白家族的发现 | 第9-10页 |
| 1.2.2 BEACH 蛋白的结构 | 第10-11页 |
| 1.2.3 BEACH 蛋白家族代表成员及其功能 | 第11-14页 |
| 1.3 脑胶质瘤研究概述 | 第14-22页 |
| 1.3.1 恶性脑胶质瘤的种类 | 第14-15页 |
| 1.3.2 脑胶质瘤细胞的发病机理 | 第15-19页 |
| 1.3.3 恶性脑胶质瘤诊断相关分子靶标 | 第19-22页 |
| 1.4 本论文的主要研究工作 | 第22-23页 |
| 2 NBEAL1 基因表达载体的构建 | 第23-37页 |
| 2.1 材料与方法 | 第23-24页 |
| 2.1.1 设备 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂及配方 | 第23-24页 |
| 2.1.3 病例资料和病理标本 | 第24页 |
| 2.2 实验部分 | 第24-34页 |
| 2.2.1 序列分析与引物设计 | 第24-28页 |
| 2.2.2 总RNA 的提取 | 第28页 |
| 2.2.3 反转录获得cDNA 片段 | 第28-29页 |
| 2.2.4 pGEX-KG-NBEAL 重组质粒的构建 | 第29-32页 |
| 2.2.5 重组子转化和筛选 | 第32-33页 |
| 2.2.6 重组子的PCR 鉴定和酶切鉴定 | 第33-34页 |
| 2.3 实验结果 | 第34-35页 |
| 2.3.1 PCR 鉴定结果 | 第34-35页 |
| 2.3.2 质粒酶切验证 | 第35页 |
| 2.4 实验讨论 | 第35-37页 |
| 3 NBEAL1 的表达纯化以及单克隆抗体的制备 | 第37-50页 |
| 3.1 材料与方法 | 第37-40页 |
| 3.1.1 仪器设备 | 第37页 |
| 3.1.2 试剂 | 第37-38页 |
| 3.1.3 配方 | 第38-40页 |
| 3.2 实验部分 | 第40-46页 |
| 3.2.1 NBEAL1 的诱导表达 | 第40页 |
| 3.2.2 SDS-PAGE 电泳检测目的蛋白的表达 | 第40-43页 |
| 3.2.3 NBEAL1 的纯化 | 第43-44页 |
| 3.2.4 单克隆抗体的制备与NBEAL1 的鉴定 | 第44-45页 |
| 3.2.5 Western-Blot 检测NBEAL1 蛋白活性情况 | 第45-46页 |
| 3.2.6 单克隆抗体的筛选与鉴定 | 第46页 |
| 3.3 实验结果 | 第46-48页 |
| 3.3.1 SDS-PAGE 检测NBEAL1 片段在大肠杆菌中的表达与纯化的结果 | 第46-48页 |
| 3.3.2 Western-Blotting 检测NBEAL1 在大肠杆菌中的融合表达 | 第48页 |
| 3.4 单克隆抗体的筛选与鉴定 | 第48-49页 |
| 3.5 实验讨论 | 第49-50页 |
| 4 免疫组化检测人脑胶质瘤组织中NBEAL1 的表达 | 第50-56页 |
| 4.1 材料与方法 | 第51-52页 |
| 4.1.1 病理材料 | 第51页 |
| 4.1.2 实验设备 | 第51页 |
| 4.1.3 试剂 | 第51页 |
| 4.1.4 配方 | 第51-52页 |
| 4.2 实验部分 | 第52-53页 |
| 4.2.1 组织标本取材、固定和切片 | 第52页 |
| 4.2.2 免疫组织化学染色步骤 | 第52-53页 |
| 4.2.3 结果判断 | 第53页 |
| 4.2.4 统计学处理 | 第53页 |
| 4.3 实验结果 | 第53-55页 |
| 4.3.1 免疫组化检测人脑胶质瘤组织中NBEAL1 的表达 | 第53-54页 |
| 4.3.2 对于免疫组化后结果的统计学分析 | 第54-55页 |
| 4.4 实验讨论 | 第55-56页 |
| 5 全文总结与展望 | 第56-57页 |
| 6 全文参考文献 | 第57-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第66-68页 |
