ABSTRACT | 第3-5页 |
CHAPTER 1:INTRODUCTION | 第10-21页 |
1 Gastric Cancer | 第10-11页 |
2 Focal Adhesion Kinase | 第11-17页 |
2.1 The structure of focal adhesion kinase | 第12-14页 |
2.2 Activation and phosphorylation of FAK | 第14-15页 |
2.3 The role of FAK in cell adhesion and migration | 第15页 |
2.4 The role of FAK in cell proliferation and apoptosis | 第15-16页 |
2.5 FAK and cancer | 第16-17页 |
3 RNA Interference | 第17-21页 |
3.1 The mechanism of RNA interference | 第17-18页 |
3.2 RNAi plasmid vectors | 第18-19页 |
3.3 Transfection | 第19-20页 |
3.4 RNAi as a tool for targeted inhibition of gene expression in cancer | 第20-21页 |
CHAPTER 2:THE ARGUMENTS BASIS, MAIN CONTENT AND RESEARCHSIGNIFICANCE OF THIS STUDY | 第21-23页 |
CHAPTER 3:RNAI INHIBITE THE EXPRESSION OF FOCAL ADHESIONKINASE ON SGC-7901 CELLS | 第23-46页 |
1 Materials And Methods | 第23-36页 |
1.1 Cells | 第23页 |
1.2 Cell culture | 第23-25页 |
1.3 siRNA construction | 第25页 |
1.4 Plasmid miniprep | 第25-26页 |
1.5 Cell transfection by calcium phosphate | 第26-28页 |
1.6 Semiquantitative RT-PCR to evaluate FAK mRNA level | 第28-30页 |
1.7 Western blot analysis | 第30-36页 |
1.8 Statistical analysis | 第36页 |
2 Results | 第36-43页 |
2.1 Recombinant plasmids | 第36-37页 |
2.2 Assay for transfection | 第37-38页 |
2.3 Down-regulation of FAK mRNA level by RT-PCR | 第38-41页 |
2.4 Down-regulation of FAK protein level by western blotting | 第41-43页 |
3 Discussions | 第43-46页 |
3.1 siRNA sequence design | 第43页 |
3.2 siRNA delivery | 第43-44页 |
3.3 Optimize transfection conditions | 第44-45页 |
3.4 Gene expression levels detection | 第45-46页 |
CHAPTER 4:EFFECTS OF FOCAL ADHESION KINASE ON SGC-7901 CELLSMIGRATION, PROLIFERATION AND APOPTOSIS | 第46-61页 |
1 Materials And Methods | 第46-49页 |
1.1 Cells and plasmid | 第46页 |
1.2 Migration assay | 第46-47页 |
1.3 MTT assay | 第47页 |
1.4 Hoechst 33258 staining assay | 第47-48页 |
1.5 MitoView~(TM) 633 mitochondrial dye | 第48页 |
1.6 Expression levels of Annexin A2 | 第48页 |
1.7 Statistical analysis | 第48-49页 |
2 Results | 第49-54页 |
2.1 Detection cells migration by wound healing assay | 第49-50页 |
2.2 Cells proliferation detection after FAK silencing | 第50-52页 |
2.3 Induced cells apoptosis by siFAK-3 | 第52-53页 |
2.4 Down-regulated expression of FAK induced a increased expression of Annexin A2 | 第53-54页 |
3 Discussions | 第54-61页 |
3.1 FAK with cancer cells motility | 第55-56页 |
3.2 FAK with cancer cells proliferation | 第56-57页 |
3.3 FAK with cancer cells apoptosis | 第57-58页 |
3.4 RNAi apply | 第58-59页 |
3.5 FAK and Annexin A2 | 第59-61页 |
SUMMARY | 第61-62页 |
REFERENCE | 第62-77页 |
ACKNOWLEGEMENTS | 第77-78页 |
THE ACHIEVEMENTS IN THE RESEARCH DURING MASTER'S DEGREE | 第78页 |