| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 草鱼蛋白激酶Z(CiPKZ)的表达与亚细胞定位 | 第12-85页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-35页 |
| 第一节 鱼类免疫研究进展 | 第12-19页 |
| 1.1 鱼类免疫组织与免疫器官 | 第12-13页 |
| 1.2 鱼类免疫细胞 | 第13-15页 |
| 1.2.1 天然杀伤细胞 | 第14页 |
| 1.2.2 吞噬细胞 | 第14-15页 |
| 1.3 与鱼类免疫相关的体液免疫因子 | 第15-19页 |
| 1.3.1 特异性免疫因子—免疫球蛋白 | 第15-16页 |
| 1.3.2 非特异性免疫因子 | 第16-19页 |
| 1.3.2.1 补体 | 第16-17页 |
| 1.3.2.2 干扰素 | 第17-18页 |
| 1.3.2.3 溶菌酶 | 第18页 |
| 1.3.2.4 应激蛋白-C反应蛋白 | 第18页 |
| 1.3.2.5 白细胞介素 | 第18-19页 |
| 1.3.2.6 蛋白激酶Z | 第19页 |
| 第二节 鱼类PKZ的研究进展 | 第19-35页 |
| 简介 | 第19-20页 |
| 1.1 PKZ的发现 | 第20-21页 |
| 1.2 PKZ的作用机制及功能 | 第21-24页 |
| 1.2.1 eIF2 α激酶的作用机制 | 第21-22页 |
| 1.2.2 PKZ的作用机制 | 第22-24页 |
| 1.3 PKZ结构 | 第24-25页 |
| 1.4 Z α结构域及其调控作用 | 第25-27页 |
| 1.5 Z-DNA | 第27-28页 |
| 1.6 PKR,ADAR1,ZBP1,E3L,PKZ亚细胞定位 | 第28-31页 |
| 1.6.1 PKR的亚细胞定位 | 第28-29页 |
| 1.6.2 ZBP1亚细胞定位 | 第29页 |
| 1.6.3 ADAR1亚细胞定位 | 第29-30页 |
| 1.6.4 E3L亚细胞定位 | 第30页 |
| 1.6.5 PKZ亚细胞定位 | 第30-31页 |
| 1.7 蛋白质在细胞中定位的技术与方法 | 第31-33页 |
| 1.7.1 免疫荧光技术 | 第31页 |
| 1.7.2 免疫胶体金技术 | 第31-32页 |
| 1.7.3 GFP蛋白标记法 | 第32-33页 |
| 1.7.4 放射性标记法 | 第33页 |
| 1.8 本论文的研究目的和意义 | 第33-35页 |
| 第2章 材料和方法 | 第35-51页 |
| 2.1 实验材料 | 第35-39页 |
| 2.1.1 主要仪器和设备 | 第35-36页 |
| 2.1.2 主要试剂、试剂盒 | 第36-37页 |
| 2.1.3 质粒和菌株 | 第37-38页 |
| 2.1.4 实验动物 | 第38-39页 |
| 2.2 实验方法 | 第39-51页 |
| 2.2.1 草鱼PKZ Zα基因的特异扩增 | 第39-40页 |
| 2.2.2 草鱼PKZ Zα克隆载体的构建 | 第40-41页 |
| 2.2.3 草鱼PKZ Zα原核表达载体的构建 | 第41-43页 |
| 2.2.4 草鱼PKZ Zα的原核表达 | 第43页 |
| 2.2.5 Zα表达多肽的纯化 | 第43-44页 |
| 2.2.6 Bradford法测定蛋白质浓度 | 第44-45页 |
| 2.2.7 多克隆抗体的制备 | 第45页 |
| 2.2.8 多克隆抗体的特异性和效价检测 | 第45-46页 |
| 2.2.9 草鱼的免疫诱导 | 第46页 |
| 2.2.10 草鱼组织石蜡切片制作 | 第46-47页 |
| 2.2.11 免疫组化染色 | 第47页 |
| 2.2.12 特异性试验 | 第47-48页 |
| 2.2.13 RT-PCR的草鱼免疫诱导 | 第48页 |
| 2.2.14 RT-PCR检测肝、脾、肾、肠、鳃、心组织中CiPKZ的表达 | 第48-51页 |
| 第3章 结果 | 第51-75页 |
| 3.1 PKZ Zα基因编码区的克隆和重组质粒的构建 | 第51页 |
| 3.2 His-Tag-PKZ Zα融合蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第51-52页 |
| 3.3 PKZ Zα融合蛋白的纯化 | 第52-53页 |
| 3.4 蛋白质浓度的测定 | 第53-54页 |
| 3.5 PKZ Zα多克隆抗体的检测 | 第54-55页 |
| 3.6 抗血清活性检测 | 第55页 |
| 3.7 一抗不同稀释度的条件优化 | 第55-57页 |
| 3.8 PKZ在肝组织中的表达 | 第57-58页 |
| 3.9 PKZ在肝细胞中的定位 | 第58页 |
| 3.10 PKZ在脾组织中的表达 | 第58-60页 |
| 3.11 PKZ在脾细胞中的定位 | 第60-61页 |
| 3.12 PKZ在肝、脾等组织中的表达比较 | 第61-62页 |
| 3.13 PKZ肾组织中的表达 | 第62-63页 |
| 3.14 PKZ在肾细胞中的定位 | 第63-65页 |
| 3.15 PKZ在肝、脾、肾等组织的表达比较 | 第65页 |
| 3.16 CiPKZ基因的组织特异性表达 | 第65-67页 |
| 3.17 CiPKZ在肝、脾、肾组织中的诱导表达 | 第67-68页 |
| 3.18 CiPKZ在肠、鳃、心组织中的诱导表达 | 第68-69页 |
| 3.19 CiPKZ在肝、肾、鳃、心组织中的基因表达 | 第69-71页 |
| 3.20 CiPKZ在肝、脾、肾、肠、鳃、心组织中的诱导表达 | 第71-75页 |
| 第4章 讨论 | 第75-83页 |
| 4.1 具有Zα结构域的Z-DNA结合蛋白 | 第75-76页 |
| 4.2 Z-DNA结合蛋白(ADAR1,ZBP1,PKZ)的功能 | 第76-77页 |
| 4.3 原核表达载体选择及其表达多肽的纯化 | 第77-78页 |
| 4.4 抗体制备条件探讨 | 第78页 |
| 4.5 切片的制备最佳方法探讨 | 第78-79页 |
| 4.6 免疫酶组织化学技术探讨 | 第79-81页 |
| 4.6.1 免疫酶组织化学中标记酶 | 第79-81页 |
| 4.6.2 免疫组化实验结果的判定和分析及条件优化 | 第81页 |
| 4.7 PKZ表达特性 | 第81-82页 |
| 4.8 Ci PKZ的亚细胞定位及组织定位 | 第82-83页 |
| 总结 | 第83-85页 |
| 草鱼与乌鐘肠道组织学比较研究 | 第85-98页 |
| 第1章 文献综述 | 第85-87页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第87-89页 |
| 2.1 实验材料 | 第87页 |
| 2.2 实验方法 | 第87-89页 |
| 第3章 实验结果 | 第89-93页 |
| 3.1 消化系统外部形态 | 第89页 |
| 3.2 肠组织学观察 | 第89-93页 |
| 第4章 讨论 | 第93-96页 |
| 4.1 消化系统结构与食性的关系 | 第93-94页 |
| 4.2 肠道组织学的功能适应性 | 第94-96页 |
| 第5章 小结与展望 | 第96-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-115页 |
| 缩略语 | 第115-117页 |
| 博士期间发表的论文及参加的课题 | 第117页 |
