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hsa-miR-181a靶向TLR4调控THP-1巨噬细胞表达炎症介质

中文摘要第5-7页
Abstract第7-9页
前言第10-13页
第一部分 生物信息学预测第13-17页
    1. 原理第13页
    2. 方法第13-14页
        2.1 TLR4 mRNA 3′UTR 序列获取及其二级结构分析第13-14页
        2.2 Targetscan 预测以 TLR4 为靶基因的 miRNA第14页
        2.3 MiRDB 预测以 TLR4 为靶基因的 miRNA第14页
    3. 结果第14-16页
        3.1 TLR4 mRNA 3′UTR 序列及其二级结构第14-15页
        3.2 Targetscan 预测结果第15页
        3.3 MiRDB 预测结果第15-16页
    4. 小结第16-17页
第二部分 体外细胞实验验证 miR-181a 下调 TLR4 表达,抑制巨噬细胞表达炎症介质第17-41页
    1. 实验细胞第17页
    2. 主要试剂第17-18页
    3. 主要仪器与器材第18-19页
    4. 实验方法第19-30页
        4.1 高表达 TLR4 细胞株的选取第19-20页
        4.2 细胞培养第20页
        4.3 转染及 LPS 刺激第20-21页
        4.4 细胞上清液的收集第21页
        4.5 ELISA第21-22页
        4.6 总 RNA 提取第22-23页
        4.7 qPCR 与 RT-PCR第23-25页
        4.8 蛋白提取及定量第25-26页
        4.9 western blot第26-27页
        4.10 相对荧光素酶活性法检测 miR-181a 与 TLR4 mRNA 的靶向结合活性第27-30页
    5. 实验结果第30-41页
        5.1 ELISA 测定的培养基中 TNF-α、IL-1β、IL-6 含量第30-34页
        5.2 qPCR 检测的细胞内 miR-181a 相对表达量第34页
        5.3 RT-PCR 检测的细胞内 TLR4 mRNA 表达水平第34-35页
        5.4 western blot 检测的细胞内 TLR4 蛋白水平第35-36页
        5.5 RT-PCR 检测的细胞内 TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA 表达水平第36-39页
        5.6 荧光素酶报告基因技术检测的 miR-181a 与 TLR4 mRNA 的靶向结合活性第39-41页
讨论第41-44页
结论第44-45页
参考文献第45-47页
主要英文缩略语索引第47-48页
文献综述第48-53页
    参考文献第51-53页
硕士期间发表的论文第53-54页
致谢第54-55页
基金资助第55页

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