摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-21页 |
·低温对植物的影响 | 第9-11页 |
·低温对植物造成的伤害 | 第9页 |
·低温对植物细胞膜造成的伤害 | 第9-10页 |
·低温光合速率减弱且呼吸速率等代谢变化明显 | 第10页 |
·低温胁迫下特殊小分子保护物质增多 | 第10-11页 |
·与植物抗寒性相关基因及抗寒基因转导的研究进展 | 第11-14页 |
·与信号转导有关的基因 | 第11页 |
·CBF 表达诱导因子(Indcer of CBF Expression,ICE) | 第11页 |
·冷调节基因Clod-Regulatd Genees(COR) | 第11-12页 |
·反转录作用和小RNA 在植物抗冷反应中的作用 | 第12-13页 |
·导入抗寒调控基因的研究 | 第13页 |
·导入抗寒功能基因的研究 | 第13-14页 |
·转录水平上的基因克隆方法 | 第14-17页 |
·cDNA 代表性差异分析(cDNA-RDA) | 第14-15页 |
·抑制性消减杂交(SSH) | 第15页 |
·mRNA 差异显示(DDRT-PCR) | 第15-16页 |
·cDNA-AFLP 技术 | 第16-17页 |
·RACE 技术原理及其研究进展 | 第17-18页 |
·RACE 原理 | 第17页 |
·RACE 技术的优点和缺点 | 第17-18页 |
·RACE 技术的应用 | 第18页 |
·半定量PCR | 第18页 |
·实时定量PCR | 第18-19页 |
·本研究的目的意义及研究内容 | 第19-20页 |
·本研究的目的意义 | 第19页 |
·本研究的研究内容 | 第19-20页 |
·技术路线 | 第20-21页 |
第二章cDNA-AFLP 分离辣椒抗寒性相关基因 | 第21-31页 |
·材料 | 第21页 |
·试验材料 | 第21页 |
·化学药品 | 第21页 |
·载体 | 第21页 |
·主要仪器 | 第21页 |
·方法 | 第21-26页 |
·辣椒苗的准备 | 第21页 |
·材料处理 | 第21页 |
·RNA 操作有关溶液和器皿的配置和处理 | 第21页 |
·总RNA 提取 | 第21-22页 |
·双链cDNA 合成 | 第22-23页 |
·cDNA-AFLP 技术分析 | 第23-25页 |
·reverse-Northern 杂交 | 第25-26页 |
·结果与分析 | 第26-31页 |
·RNA 的提取 | 第26-27页 |
·不同方法合成cDNA 双链 | 第27-28页 |
·酶切连接和预扩增结果 | 第28页 |
·选择性扩增结果 | 第28-29页 |
·差异表达条带的二次扩增、克隆与验证阳性克隆 | 第29页 |
·测序结果生物学同源性比对分析 | 第29-31页 |
第三章CaAQP 基因全长cDNA 克隆及表达分析 | 第31-39页 |
·材料与方法 | 第31-33页 |
·植物材料 | 第31页 |
·化学药品 | 第31页 |
·主要仪器 | 第31页 |
·辣椒总RNA 提取 | 第31页 |
·RACE 试验步骤 | 第31-32页 |
·生物信息学分析 | 第32页 |
·半定量RT-PCR 验证 | 第32页 |
·Real-timePCR 反应 | 第32-33页 |
·引物 | 第33页 |
·结果分析 | 第33-39页 |
·辣椒 CaAQP 基因的 3’RACE 和 5’RACE | 第33-34页 |
·Smart RACE 的方法合成基因全长 | 第34页 |
·CaAQP 基因全长的序列分析 | 第34-35页 |
·结构域预测 | 第35页 |
·CaAQP 基因序列相似性分析 | 第35-37页 |
·RT-PCR 分析 | 第37页 |
·Real-timePCR 分析 | 第37-39页 |
第四章 讨论 | 第39-41页 |
第五章 结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-48页 |
缩略语表 | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
作者简介 | 第50页 |