摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
常用符号及缩略语说明 | 第18-20页 |
第一章 绪论 | 第20-32页 |
1.1 炎症 | 第20-22页 |
1.2 巨噬细胞与炎症 | 第22-23页 |
1.3 NO与炎症 | 第23-24页 |
1.4 炎症信号转导途径 | 第24-28页 |
1.5 抗炎免疫药物简述 | 第28-29页 |
1.6 研究目的与意义 | 第29-30页 |
1.7 研究技术路线 | 第30-32页 |
第二章 天然产物体外抑制NO生成的活性筛选 | 第32-70页 |
2.1 引言 | 第32-33页 |
2.2 材料与仪器 | 第33-46页 |
2.2.1 主要仪器 | 第33-34页 |
2.2.2 主要的材料与试剂 | 第34-44页 |
2.2.3 主要试剂的配制 | 第44-46页 |
2.3 实验方法 | 第46-52页 |
2.3.1 小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7的培养 | 第46-47页 |
2.3.2 细胞冻存 | 第47页 |
2.3.3 细胞复苏 | 第47-48页 |
2.3.4 细胞记数 | 第48页 |
2.3.5 Griess法检测NO | 第48页 |
2.3.6 药用植物的粗样组分制备 | 第48-50页 |
2.3.7 体外炎症模型条件优化 | 第50-51页 |
2.3.8 天然产物对细胞活力的影响——MTT法 | 第51-52页 |
2.3.9 天然产物体外抑制NO生成活性筛选 | 第52页 |
2.3.10 数据处理 | 第52页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第52-68页 |
2.4.1 Griess法检测NO标准曲线 | 第52-53页 |
2.4.2 体外炎症模型条件优化 | 第53-55页 |
2.4.3 天然产物体外抑制NO筛选结果 | 第55-68页 |
2.5 本章小结 | 第68-70页 |
第三章 Neougonin A的抗炎机制研究 | 第70-104页 |
3.1 引言 | 第70-71页 |
3.2 材料与仪器 | 第71-81页 |
3.2.1 主要仪器 | 第71页 |
3.2.2 主要试剂 | 第71-74页 |
3.2.3 主要试剂配制 | 第74-81页 |
3.3 实验方法 | 第81-88页 |
3.3.1 细胞培养相关 | 第81页 |
3.3.2 酶联免疫吸附实验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)测定neougonin A对LPS刺激RAW 264.7产生PGE2的影响 | 第81-82页 |
3.3.3 ELISA法测定neougonin A对LPS刺激RAW 264.7产生TNFα的影响 | 第82页 |
3.3.4 ELISA法测定neougonin A对LPS刺激RAW 264.7产生IL-1β和IL-6的影响 | 第82-83页 |
3.3.5 蛋白质印记法(Western Blot Analysis)分析neougonin A对LPS刺激RAW 264.7产生COX2、iNOS、MAPKs等的影响 | 第83-87页 |
3.3.6 细胞免疫化学分析(Immunocytochemical Analysis)neougonin A对LPS诱导RAW 264.7的NF-κB p65转位入核的影响 | 第87页 |
3.3.7 数据分析 | 第87-88页 |
3.4 实验结果与讨论 | 第88-100页 |
3.4.1 Neougonin A对RAW 264.7活力的影响 | 第88页 |
3.4.2 蛋白定量标准曲线绘制 | 第88-89页 |
3.4.3 Western Blot条件优化 | 第89-91页 |
3.4.4 Neougonin A通过下调iNOS的表达抑制LPS诱导RAW 264.7产生NO | 第91-92页 |
3.4.5 Neougonin A下调COX2的表达抑制LPS诱导RAW 264.7产生PGE2 | 第92-93页 |
3.4.6 Neougonin A对LPS诱导RAW 264.7产生TNFα、IL-1β和IL-6的影响 | 第93-96页 |
3.4.7 Neougonin A对LPS诱导的RAW 264.7 MAPKs信号通路活化的影响 | 第96-97页 |
3.4.8 Neougonin A对LPS诱导的RAW 264.7 NF-κB信号通路活化的影响 | 第97-99页 |
3.4.9 Neougonin A对LPS活化的RAW 264.7 NF-κB p65转位入核的影响 | 第99-100页 |
3.5 本章小结 | 第100-104页 |
第四章 滇紫草(Onosma paniculatum)的抗炎活性研究 | 第104-118页 |
4.1 引言 | 第104页 |
4.2 主要的仪器与试剂 | 第104-105页 |
4.3 实验方法 | 第105-106页 |
4.3.1 滇紫草粗样制备及单体化合物的分离纯化 | 第105-106页 |
4.3.2 滇紫草粗样和单体化合物对RAW 264.7活力的影响 | 第106页 |
4.3.3 滇紫草粗样和单体化合物对LPS诱导RAW 264.7产生NO的抑制作用 | 第106页 |
4.3.4 紫草呋喃E(shikonofuran E)对LPS刺激RAW 264.7产生PGE2、TNFα、IL-1β和IL-6的影响——ELISA法 | 第106页 |
4.3.5 Shikonofuran E对LPS诱导RAW 264.7产生iNOS和COX2的影响 | 第106页 |
4.3.6 Shikonofuran E对LPS诱导RAW 264.7的MAPK信号通路的影响 | 第106页 |
4.3.7 Shikonofuran E对LPS诱导RAW 264.7的NF-κB信号通路的影响 | 第106页 |
4.3.8 数据分析 | 第106页 |
4.4 实验结果与讨论 | 第106-116页 |
4.4.1 化合物的结构鉴定 | 第107页 |
4.4.2 滇紫草粗样和单体化合物对RAW 264.7活力的影响 | 第107-109页 |
4.4.3 滇紫草粗样和单体化合物对LPS诱导RAW 264.7产生NO的抑制作用 | 第109-110页 |
4.4.4 Shikonofuran E对LPS诱导RAW 264.7表达iNOS的影响 | 第110-111页 |
4.4.5 Shikonofuran E对LPS诱导RAW264.7产生PGE2的影响 | 第111-112页 |
4.4.6 Shikonofuran E对LPS诱导RAW 264.7表达COX2的影响 | 第112-113页 |
4.4.7 Shikonofuran E对LPS诱导RAW 264.7产生TNFα、IL-1β和IL-6的影响 | 第113-114页 |
4.4.8 Shikonofuran E对LPS活化的RAW 264.7 MAPKs信号通路影响 | 第114-115页 |
4.4.9 Shikonofuran E对LPS诱导RAW 264.7 IκBα磷酸化的影响 | 第115-116页 |
4.5 本章小结 | 第116-118页 |
第五章 结论 | 第118-120页 |
致谢 | 第120-122页 |
参考文献 | 第122-132页 |
附录:硕士期间发表和待发表的论文 | 第132页 |