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几种类型天然产物的体外抗炎活性筛选及机制的初步研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
常用符号及缩略语说明第18-20页
第一章 绪论第20-32页
    1.1 炎症第20-22页
    1.2 巨噬细胞与炎症第22-23页
    1.3 NO与炎症第23-24页
    1.4 炎症信号转导途径第24-28页
    1.5 抗炎免疫药物简述第28-29页
    1.6 研究目的与意义第29-30页
    1.7 研究技术路线第30-32页
第二章 天然产物体外抑制NO生成的活性筛选第32-70页
    2.1 引言第32-33页
    2.2 材料与仪器第33-46页
        2.2.1 主要仪器第33-34页
        2.2.2 主要的材料与试剂第34-44页
        2.2.3 主要试剂的配制第44-46页
    2.3 实验方法第46-52页
        2.3.1 小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7的培养第46-47页
        2.3.2 细胞冻存第47页
        2.3.3 细胞复苏第47-48页
        2.3.4 细胞记数第48页
        2.3.5 Griess法检测NO第48页
        2.3.6 药用植物的粗样组分制备第48-50页
        2.3.7 体外炎症模型条件优化第50-51页
        2.3.8 天然产物对细胞活力的影响——MTT法第51-52页
        2.3.9 天然产物体外抑制NO生成活性筛选第52页
        2.3.10 数据处理第52页
    2.4 实验结果与讨论第52-68页
        2.4.1 Griess法检测NO标准曲线第52-53页
        2.4.2 体外炎症模型条件优化第53-55页
        2.4.3 天然产物体外抑制NO筛选结果第55-68页
    2.5 本章小结第68-70页
第三章 Neougonin A的抗炎机制研究第70-104页
    3.1 引言第70-71页
    3.2 材料与仪器第71-81页
        3.2.1 主要仪器第71页
        3.2.2 主要试剂第71-74页
        3.2.3 主要试剂配制第74-81页
    3.3 实验方法第81-88页
        3.3.1 细胞培养相关第81页
        3.3.2 酶联免疫吸附实验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)测定neougonin A对LPS刺激RAW 264.7产生PGE2的影响第81-82页
        3.3.3 ELISA法测定neougonin A对LPS刺激RAW 264.7产生TNFα的影响第82页
        3.3.4 ELISA法测定neougonin A对LPS刺激RAW 264.7产生IL-1β和IL-6的影响第82-83页
        3.3.5 蛋白质印记法(Western Blot Analysis)分析neougonin A对LPS刺激RAW 264.7产生COX2、iNOS、MAPKs等的影响第83-87页
        3.3.6 细胞免疫化学分析(Immunocytochemical Analysis)neougonin A对LPS诱导RAW 264.7的NF-κB p65转位入核的影响第87页
        3.3.7 数据分析第87-88页
    3.4 实验结果与讨论第88-100页
        3.4.1 Neougonin A对RAW 264.7活力的影响第88页
        3.4.2 蛋白定量标准曲线绘制第88-89页
        3.4.3 Western Blot条件优化第89-91页
        3.4.4 Neougonin A通过下调iNOS的表达抑制LPS诱导RAW 264.7产生NO第91-92页
        3.4.5 Neougonin A下调COX2的表达抑制LPS诱导RAW 264.7产生PGE2第92-93页
        3.4.6 Neougonin A对LPS诱导RAW 264.7产生TNFα、IL-1β和IL-6的影响第93-96页
        3.4.7 Neougonin A对LPS诱导的RAW 264.7 MAPKs信号通路活化的影响第96-97页
        3.4.8 Neougonin A对LPS诱导的RAW 264.7 NF-κB信号通路活化的影响第97-99页
        3.4.9 Neougonin A对LPS活化的RAW 264.7 NF-κB p65转位入核的影响第99-100页
    3.5 本章小结第100-104页
第四章 滇紫草(Onosma paniculatum)的抗炎活性研究第104-118页
    4.1 引言第104页
    4.2 主要的仪器与试剂第104-105页
    4.3 实验方法第105-106页
        4.3.1 滇紫草粗样制备及单体化合物的分离纯化第105-106页
        4.3.2 滇紫草粗样和单体化合物对RAW 264.7活力的影响第106页
        4.3.3 滇紫草粗样和单体化合物对LPS诱导RAW 264.7产生NO的抑制作用第106页
        4.3.4 紫草呋喃E(shikonofuran E)对LPS刺激RAW 264.7产生PGE2、TNFα、IL-1β和IL-6的影响——ELISA法第106页
        4.3.5 Shikonofuran E对LPS诱导RAW 264.7产生iNOS和COX2的影响第106页
        4.3.6 Shikonofuran E对LPS诱导RAW 264.7的MAPK信号通路的影响第106页
        4.3.7 Shikonofuran E对LPS诱导RAW 264.7的NF-κB信号通路的影响第106页
        4.3.8 数据分析第106页
    4.4 实验结果与讨论第106-116页
        4.4.1 化合物的结构鉴定第107页
        4.4.2 滇紫草粗样和单体化合物对RAW 264.7活力的影响第107-109页
        4.4.3 滇紫草粗样和单体化合物对LPS诱导RAW 264.7产生NO的抑制作用第109-110页
        4.4.4 Shikonofuran E对LPS诱导RAW 264.7表达iNOS的影响第110-111页
        4.4.5 Shikonofuran E对LPS诱导RAW264.7产生PGE2的影响第111-112页
        4.4.6 Shikonofuran E对LPS诱导RAW 264.7表达COX2的影响第112-113页
        4.4.7 Shikonofuran E对LPS诱导RAW 264.7产生TNFα、IL-1β和IL-6的影响第113-114页
        4.4.8 Shikonofuran E对LPS活化的RAW 264.7 MAPKs信号通路影响第114-115页
        4.4.9 Shikonofuran E对LPS诱导RAW 264.7 IκBα磷酸化的影响第115-116页
    4.5 本章小结第116-118页
第五章 结论第118-120页
致谢第120-122页
参考文献第122-132页
附录:硕士期间发表和待发表的论文第132页

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