| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 引言 | 第12-16页 |
| 第2章 材料与方法 | 第16-28页 |
| 2.1 材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 主要实验仪器 | 第16页 |
| 2.1.2 实验用细胞系与菌株 | 第16-17页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-27页 |
| 2.2.1 细胞系的复苏、传代和冻存 | 第17-19页 |
| 2.2.1.1 细胞的复苏 | 第17-18页 |
| 2.2.1.2 细胞的换液 | 第18页 |
| 2.2.1.3 细胞的传代 | 第18页 |
| 2.2.1.4 细胞的冻存 | 第18-19页 |
| 2.2.2 免疫组化检测正常鼻咽黏膜组织和鼻咽癌组织中P53的表达 | 第19页 |
| 2.2.3 6-10B系列细胞瞬转P53干扰慢病毒载体 | 第19-24页 |
| 2.2.3.1 P53干扰慢病毒载体的设计 | 第19-20页 |
| 2.2.3.2 sh RNA的构建 | 第20-21页 |
| 2.2.3.3 测序引物的设计 | 第21-22页 |
| 2.2.3.4 P53干扰慢病毒载体的转化 | 第22页 |
| 2.2.3.5 P53干扰慢病毒载体的扩增、提取 | 第22-24页 |
| 2.2.3.6 P53干扰慢病毒载体的瞬转 | 第24页 |
| 2.2.4 流式细胞术测定 6-10B系列细胞凋亡率 | 第24-25页 |
| 2.2.5 6-10B-POSTN系列细胞培养上清的收集及其对 6-10B细胞的处理 | 第25页 |
| 2.2.6 3T3-POSTN系列细胞培养上清的提取及其对 6-10B细胞的处理 | 第25页 |
| 2.2.7 6-10B系列细胞的总蛋白的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.8 Western Blot | 第26-27页 |
| 2.3 技术路线 | 第27-28页 |
| 第3章 实验结果 | 第28-36页 |
| 3.1 检测Periostin在转染前后鼻咽癌细胞株中的表达 | 第28页 |
| 3.2 检测POSTN高表达后 6-10B细胞内促凋亡相关蛋白P53、BAX，抑凋亡相关蛋白P-AKT的表达 | 第28-29页 |
| 3.3 流式细胞术检测 6-10B细胞中POSTN表达上调后凋亡情况 | 第29-30页 |
| 3.4 检测 P53 在人正常鼻咽黏膜和鼻咽癌组织中的表达 | 第30-31页 |
| 3.5 6-10B系列细胞培养上清对 6-10B细胞中凋亡相关蛋白表达的影响 | 第31页 |
| 3.6 检测转染shRNA前后，鼻咽癌 6-10B细胞P53的干扰效果及鼻咽癌 6-10B系列细胞的凋亡率 | 第31-35页 |
| 3.7 3T3-POSTN细胞培养上清对 6-10B细胞中凋亡相关蛋白表达的影响 | 第35-36页 |
| 第4章 讨论 | 第36-40页 |
| 第5章 结论 | 第40-42页 |
| 第6章 参考文献 | 第42-46页 |
| 综述 间质蛋白 Periostin 及其与肿瘤关系的研究进展 | 第46-62页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 附录 | 第62-68页 |
| 作者攻读学位期间的科研成果 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
