| 目录 | 第1-7页 |
| 缩略词表 | 第7-9页 |
| 中文摘要 | 第9-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 前言 | 第15-18页 |
| 材料与方法 | 第18-35页 |
| 一. 主要材料、试剂与仪器设备 | 第18-22页 |
| 二. 试剂配制 | 第22-23页 |
| 三. 实验方法 | 第23-35页 |
| 结果 | 第35-80页 |
| 一.胰岛素抵抗动物及细胞模型中PP4的表达和活性的变化 | 第35-48页 |
| 1. 胰岛素抵抗动物模型：db/db小鼠 | 第35-38页 |
| ·db/db小鼠表现为高血糖、脂代谢紊乱及高炎症水平 | 第35-36页 |
| ·db/db小鼠胰岛素敏感指数明显降低 | 第36页 |
| ·db/db小鼠肝脏中的糖原含量下降 | 第36-37页 |
| ·db/db小鼠肝脏组织中糖原合成信号转导通路受损,糖异生信号通路激活 | 第37-38页 |
| ·db/db小鼠肝脏组织中PP4的表达和活性均增加 | 第38页 |
| 2. 炎症因子IL-6诱导的肝细胞胰岛素抵抗模型 | 第38-43页 |
| ·IL-6作用浓度及作用时间的筛选 | 第39页 |
| ·MTT检测IL-6对细胞生长的影响 | 第39-40页 |
| ·IL-6诱导的肝细胞胰岛素抵抗模型的鉴定 | 第40-42页 |
| ·IL-6诱导的肝细胞胰岛素抵抗模型中PP4的表达和活性均增强 | 第42-43页 |
| 3. IL-6诱导的C57BL/6小鼠胰岛素抵抗模型 | 第43-48页 |
| ·IL-6处理的C57BL/6小鼠的血糖、血脂水平变化 | 第43-44页 |
| ·IL-6处理的C57BL/6小鼠的胰岛索敏感性降低 | 第44-45页 |
| ·IL-6处理的C57BL/6小鼠具有明显的肝脏胰岛素抵抗特征 | 第45-46页 |
| ·IL-6处理的C57BL/6小鼠肝脏中糖原含量下降 | 第45页 |
| ·IL-6处理的C57BL/6小鼠肝脏组织的糖原合成信号通路受损,糖异生信号通路激活 | 第45-46页 |
| ·IL-6处理的C57BL/6小鼠肝脏组织中PP4的表达和活性均显著增强 | 第46-48页 |
| 二.PP4在IL-6诱导的肝脏胰岛素抵抗中的作用机制 | 第48-77页 |
| 1. PP4在IL-6诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗模型中的作用 | 第48-60页 |
| ·PP4的高表达促进肝脏胰岛素抵抗的发生 | 第48-52页 |
| ·PP4高表达稳定克隆的筛选与鉴定 | 第48-50页 |
| ·高表达PP4的稳定克隆中糖原含量减少 | 第50页 |
| ·PP4的高表达导致糖原合成信号通路受损 | 第50-52页 |
| ·PP4表达降低可逆转IL-6诱导的HepG2肝细胞胰岛素抵抗 | 第52-56页 |
| ·PP4-siRNA的筛选与鉴定 | 第52-53页 |
| ·PP4表达降低可以逆转IL-6诱导的HepG2细胞糖原含量降低 | 第53-54页 |
| ·PP4表达降低可以有效恢复IL-6诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗模型中受损的糖原合成信号通路 | 第54-56页 |
| ·抑制PP4活性可以有效逆转胰岛素抵抗的发生 | 第56-60页 |
| ·PP4磷酸酶活性缺失突变体(FLAG-PP4RL)高表达稳定克隆的筛选与鉴定 | 第56-57页 |
| ·PP4活性被抑制时,FLAG-PP4RL单克隆中的糖原含量升高 | 第57-58页 |
| ·PP4活性被抑制时,胰岛素信号通路增强 | 第58-60页 |
| 2. PP4在IL-6诱导的原代肝细胞胰岛素抵抗模型中的作用 | 第60-66页 |
| ·筛选特异性降低PP4表达的PP4-shRNA质粒 | 第60-61页 |
| ·PP4-shRNA腺病毒载体的构建及纯化 | 第61-62页 |
| ·Ad-PP4-shRNA降低PP4表达后,可有效逆转IL-6诱导的C57BL/6小鼠原代肝细胞的胰岛素抵抗 | 第62-66页 |
| ·PP4-shRNA干扰效果的检测 | 第63页 |
| ·Ad-PP4-shRNA可有效降低IL-6诱导的原代胰岛素抵抗模型中糖异生相关基因的表达 | 第63-64页 |
| ·Ad-PP4-shRNA可以有效恢复IL-6诱导的原代胰岛素抵抗模型中受损的糖原合成信号通路 | 第64-66页 |
| 3. PP4在IL-6诱导的C57BL/6小鼠胰岛素抵抗模型中的作用 | 第66-72页 |
| ·尾静脉注射Ad-PP4-shRNA能有效降低C57BL/6小鼠肝脏中PP4的表达 | 第66-67页 |
| ·PP4-shRNA腺病毒载体对C57BL/6小鼠血糖、血脂水平的影响 | 第67-68页 |
| ·降低PP4的表达水平可以改善IL-6诱导的C57BL/6小鼠的糖耐量降低 | 第68页 |
| ·降低PP4的表达可以改善IL-6诱导的C57BL/6小鼠的肝脏胰岛素抵抗 | 第68-72页 |
| ·降低PP4的表达可以减弱IL-6诱导的肝脏胰岛素抵抗动模型中肝脏糖异生的功能 | 第68-69页 |
| ·降低PP4的表达可以减少IL-6诱导的肝脏胰岛素抵抗动模型中肝脏组织糖异生相关基因的表达 | 第69-70页 |
| ·降低PP4的表达可以改善IL-6诱导的肝脏胰岛素抵抗动物模型中受损的糖原合成信号通路 | 第70-72页 |
| 4. PP4是MAP4K家族的正调控因子 | 第72-74页 |
| ·降低PP4的表达可以减少IL-6诱导的原代肝细胞胰岛素抵抗模型中KHS和GCK的表达 | 第72-73页 |
| ·PP4表达降低可以减少IL-6诱导的肝脏胰岛素抵抗动物模型中KHS和GCK的表达 | 第73-74页 |
| 5. PP4对IRS-1调节机制的探讨 | 第74-77页 |
| ·PP4与IRS-1共定位 | 第74-75页 |
| ·外源性PP4与IRS-1的相互作用 | 第75页 |
| ·内源性PP4与IRS-1的相互作用 | 第75-77页 |
| 三.PP4在DB/DB小鼠胰岛素抵抗动物模型中的作用 | 第77-80页 |
| 1. 尾静脉注射Ad-PP4-shRNA能有效降低db/db小鼠肝脏中PP4的表达 | 第77-78页 |
| 2. PP4-shRNA腺病毒载体对db/db小鼠血糖、血脂水平的影响 | 第78页 |
| 3. 降低PP4的表达可以改善db/db小鼠的糖耐量 | 第78-79页 |
| 4. 降低PP4的表达可以减弱db/db小鼠体内糖异生的功能 | 第79-80页 |
| 讨论 | 第80-93页 |
| 一. 胰岛素抵抗动物及细胞模型中PP4的表达和活性均有明显增加 | 第83-86页 |
| 二. PP4是IL-6诱导的肝脏胰岛素抵抗中的正调节因子 | 第86-88页 |
| 三. PP4参与IL-6诱导的肝脏胰岛素抵抗的作用机制 | 第88-90页 |
| 四. PP4可能在多种因素诱导的胰岛素抵抗中发挥作用 | 第90-93页 |
| 结论 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-99页 |
| 文献综述 | 第99-112页 |
| 参考文献 | 第107-112页 |
| 致谢 | 第112-114页 |
| 个人简历 | 第114-115页 |
