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慢病毒介导的GTPBP4基因沉默对人肝癌细胞侵袭迁移能力的影响

摘要第3-4页
ABSTRACT第4-5页
中英文缩略词表第8-9页
第1章 前言第9-11页
第2章 实验材料与方法第11-25页
    2.1 实验材料第11-16页
        2.1.1 实验细胞第11页
        2.1.2 主要实验试剂第11-12页
        2.1.3 主要实验仪器第12页
        2.1.4 主要溶液配制第12-16页
        2.1.5 构建GTPBP4 RNAi慢病毒载体第16页
    2.2 细胞培养相关技术第16-18页
        2.2.1 细胞复苏第16-17页
        2.2.2 细胞培养及传代第17页
        2.2.3 细胞冻存第17-18页
        2.2.4 细胞计数第18页
    2.3 最适感染复数(multiple of infection,MOI)筛选第18页
    2.4 筛选能有效干扰GTPBP4表达水平的RNAi慢病毒第18-22页
        2.4.1 qRT-PCR检测慢病毒感染后mRNA水平上GTPBP4基的表达情况第19-21页
        2.4.2 Western blot检测慢病毒感染后蛋白水平上GTPBP4的表达情况第21-22页
    2.5 Transwell侵袭小室实验检测转染后细胞侵袭能力的变化第22-23页
    2.6 细胞划痕实验检测转染后细胞迁移能力的变化第23页
    2.7 Western blot检测筛选的GTPBP4 RNAi慢病毒感染肝癌细胞后MMP-9蛋白表达变化第23页
    2.8 统计学方法分析第23-25页
第3章 实验结果第25-35页
    3.1 最适感染复数MOI筛选结果第25页
    3.2 qRT-PCR筛选最合适的GTPBP4 RNAi慢病毒及在mRNA水平检测转染后GTPBP4相对表达量的变化第25-27页
    3.3 Western blot方法筛选最合适的GTPBP4 RNAi慢病毒及在蛋白水平检测转染后GTPBP4表达量的水平第27-29页
    3.4 Transwell侵袭小室实验结果第29-30页
    3.5 细胞划痕实验结果第30-32页
    3.6 GTPBP4 RNAi慢病毒感染肝癌细胞后MMP-9 蛋白表达的结果第32-35页
第4章 讨论第35-37页
第5章 结论第37-38页
致谢第38-39页
参考文献第39-42页
攻读学位期间的研究成果第42-43页
综述第43-48页
    参考文献第47-48页

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