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定向迁移细胞前沿Rac局部化激活的调控机制--Paxillin-GIT1-PIX信号转导通路调节RAC蛋白激活及细胞迁移

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
1 引言与文献综述第9-16页
    1.1 细胞迁移、Rac蛋白的功能、Rac蛋白的信号转导通路第9-12页
        1.1.1 细胞迁移第9-10页
        1.1.2 Rac蛋白作用第10-11页
        1.1.3 Rac的信号转导通路第11-12页
    1.2 反义抑制paxillin的蛋白以降低或阻断该信号转导通路第12-14页
        1.2.1 荧光共振能量转移(FRET)技术的介绍第12-14页
        1.2.2 表达载体的构建及反义抑制Paxillin的siRNA的设计第14页
    1.3 验证细胞前沿反义抑制Paxillin的条件下Rac蛋白激活的情况第14-15页
    1.4 研究该信号通路的目的和意义第15-16页
2 材料与方法第16-41页
    2.1 材料第16-24页
        2.1.1 仪器设备第16页
        2.1.2 实验相关的试剂和耗材第16-17页
        2.1.3 菌种与细胞第17-18页
        2.1.4 相关试剂的配制与保存第18-23页
        2.1.5 介绍单分子探针FRET Rac第23-24页
    2.2 方法与步骤第24-41页
        2.2.1 GIT1-EGFP质粒的构建第24-30页
        2.2.2 细胞培养第30-31页
        2.2.3 单分子探针FRET Rac的瞬时转染第31-32页
        2.2.4 Confocal显微镜检测细胞前沿Rac的激活情况第32-35页
        2.2.5 免疫荧光检测细胞中Paxillin蛋白的表达第35-37页
        2.2.6 Rac蛋白试验第37-39页
        2.2.7 感受态细菌的制备第39-41页
3 结果与分析第41-46页
    3.1 免疫荧光实验验证Paxillin的表达第41-42页
    3.2 Rac蛋白激活实验结果证实Rac蛋白的激活状态第42-43页
    3.3 Rac蛋白激活的FRET定量检测验证Rac蛋白的激活第43-46页
4 讨论第46-49页
    4.1 Paxillin功能分析第46-47页
    4.2 实验中的问题第47-49页
5 结语第49-50页
参考文献第50-53页
附录第53-54页
    中英文缩写词简表第53-54页
硕士研究生在读期间发表的论文第54-55页
致谢第55-56页

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