摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
1 引言与文献综述 | 第9-16页 |
1.1 细胞迁移、Rac蛋白的功能、Rac蛋白的信号转导通路 | 第9-12页 |
1.1.1 细胞迁移 | 第9-10页 |
1.1.2 Rac蛋白作用 | 第10-11页 |
1.1.3 Rac的信号转导通路 | 第11-12页 |
1.2 反义抑制paxillin的蛋白以降低或阻断该信号转导通路 | 第12-14页 |
1.2.1 荧光共振能量转移(FRET)技术的介绍 | 第12-14页 |
1.2.2 表达载体的构建及反义抑制Paxillin的siRNA的设计 | 第14页 |
1.3 验证细胞前沿反义抑制Paxillin的条件下Rac蛋白激活的情况 | 第14-15页 |
1.4 研究该信号通路的目的和意义 | 第15-16页 |
2 材料与方法 | 第16-41页 |
2.1 材料 | 第16-24页 |
2.1.1 仪器设备 | 第16页 |
2.1.2 实验相关的试剂和耗材 | 第16-17页 |
2.1.3 菌种与细胞 | 第17-18页 |
2.1.4 相关试剂的配制与保存 | 第18-23页 |
2.1.5 介绍单分子探针FRET Rac | 第23-24页 |
2.2 方法与步骤 | 第24-41页 |
2.2.1 GIT1-EGFP质粒的构建 | 第24-30页 |
2.2.2 细胞培养 | 第30-31页 |
2.2.3 单分子探针FRET Rac的瞬时转染 | 第31-32页 |
2.2.4 Confocal显微镜检测细胞前沿Rac的激活情况 | 第32-35页 |
2.2.5 免疫荧光检测细胞中Paxillin蛋白的表达 | 第35-37页 |
2.2.6 Rac蛋白试验 | 第37-39页 |
2.2.7 感受态细菌的制备 | 第39-41页 |
3 结果与分析 | 第41-46页 |
3.1 免疫荧光实验验证Paxillin的表达 | 第41-42页 |
3.2 Rac蛋白激活实验结果证实Rac蛋白的激活状态 | 第42-43页 |
3.3 Rac蛋白激活的FRET定量检测验证Rac蛋白的激活 | 第43-46页 |
4 讨论 | 第46-49页 |
4.1 Paxillin功能分析 | 第46-47页 |
4.2 实验中的问题 | 第47-49页 |
5 结语 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-53页 |
附录 | 第53-54页 |
中英文缩写词简表 | 第53-54页 |
硕士研究生在读期间发表的论文 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |