致谢 | 第5-8页 |
缩略图表 | 第8-10页 |
摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第14-28页 |
1 大豆花叶病毒研究进展 | 第14-16页 |
1.1 大豆花叶病毒的分布与危害 | 第14-15页 |
1.2 大豆花叶病毒的发病症状 | 第15页 |
1.3 大豆花叶病毒的防治 | 第15-16页 |
2 植物抗病基因研究进展 | 第16-24页 |
2.1 植物抗病基因结构与分类 | 第19-21页 |
2.1.1 胞囊线虫抗性基因Hs1~(pro-1)的发现 | 第21页 |
2.1.2 大豆抗性基因KR3的克隆 | 第21页 |
2.2 植物抗性反应 | 第21-24页 |
2.2.1 早期识别 | 第21-22页 |
2.2.2 信号组成 | 第22-23页 |
2.2.3 防御相关蛋白 | 第23-24页 |
2.2.4 SA在植物抗性反应中的作用 | 第24页 |
3 基因工程在大豆抗病中的应用 | 第24-26页 |
3.1 大豆抗病基因的克隆 | 第25页 |
3.2 基因工程在大豆抗病育种的应用 | 第25-26页 |
4 本研究的目的和意义 | 第26-28页 |
第二章 KR3、Hs1~(pro-1)、KR3-Hs1~(pro-1)基因大豆植株的获得 | 第28-48页 |
1 转KR3基因、Hs1~(pro-1)基因大豆植株的获得 | 第28-36页 |
1.1 实验材料 | 第28-30页 |
1.1.1 转化受体 | 第28页 |
1.1.2 供试质粒和菌株 | 第28-29页 |
1.1.3 试验试剂 | 第29-30页 |
1.1.4 供试培养基 | 第30页 |
1.2 实验方法 | 第30-36页 |
1.2.1 农杆菌介导大豆子叶节转化法 | 第30-32页 |
1.2.2 转KR3基因、Hs1~(pro-1)基因植株的鉴定 | 第32-36页 |
2 KR3-Hs1~(pro-1)聚合植株的获得 | 第36-38页 |
2.1 实验材料 | 第36页 |
2.2 实验方法 | 第36-38页 |
2.2.1 整体去雄杂交技术 | 第36-37页 |
2.2.2 PCR法检测 | 第37-38页 |
2.2.3 RT-PCR检测 | 第38页 |
3 结果与分析 | 第38-44页 |
3.1 农杆菌介导大豆子叶节转化体系的建立 | 第38-39页 |
3.2 大豆遗传转化生根苗统计 | 第39页 |
3.3 KR3基因和Hs1~(pro-1)基因转化植株鉴定结果 | 第39-42页 |
3.4 T_0代转基因大豆遗传转化结果 | 第42页 |
3.5 转基因杂交结果 | 第42-43页 |
3.6 转基因杂交鉴定结果 | 第43-44页 |
4 讨论 | 第44-48页 |
4.1 农杆菌介导大豆子叶节转化法 | 第44-45页 |
4.2 转基因植株鉴定方法的比较 | 第45-46页 |
4.3 大豆转基因转化效率研究 | 第46页 |
4.4 大豆杂交技术研究 | 第46-48页 |
第三章 KR3、Hs1、KR3-Hs1转基因大豆花叶病毒抗性及防御基因表达 | 第48-64页 |
1 材料与方法 | 第48-53页 |
1.1 实验材料 | 第48-49页 |
1.1.1 供试植株 | 第48页 |
1.1.2 实验试剂 | 第48-49页 |
1.2 实验方法 | 第49-53页 |
1.2.1 花叶病毒接种 | 第49页 |
1.2.2 SA处理 | 第49页 |
1.2.3 基因表达的测定 | 第49-53页 |
1.2.4 花叶病毒DAS-ELISA检测 | 第53页 |
2 结果与分析 | 第53-61页 |
2.1 SMV接种前后转基因大豆KR3基因、Hs1基因相对表达量分析 | 第53-54页 |
2.2 转KR3、Hs1、KR3-Hs1基因植株大豆花叶病毒抗性测定 | 第54-55页 |
2.3 SMV接种前后防御基因相对表达量分析 | 第55-58页 |
2.4 SA处理SMV接种转基因大豆KR3基因、Hs1基因相对表达量分析 | 第58页 |
2.5 SA处理转KR3、Hs1、KR3-Hs1基因植株大豆花叶病毒抗性测定 | 第58页 |
2.6 SA处理SMV接种转基因大豆防御基因相对表达量分析 | 第58-61页 |
3 讨论 | 第61-64页 |
3.1 转基因植株基因表达与SMV抗性分析 | 第61-62页 |
3.2 SA处理转基因植株基因表达与SMV抗性分析 | 第62-63页 |
3.3 转基因植株的抗病毒效果 | 第63-64页 |
第四章 结论与展望 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-74页 |