| 中文摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 前言 | 第14-20页 |
| 参考文献 | 第16-20页 |
| 第一章 胰岛素胆盐脂质体的制备和处方优化 | 第20-42页 |
| 1 材料与仪器 | 第20-21页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第20-21页 |
| 1.2 仪器 | 第21页 |
| 1.3 实验动物 | 第21页 |
| 2 实验方法 | 第21-26页 |
| 2.1 胰岛素含量的HPLC测定法 | 第21-22页 |
| 2.1.1 色谱条件 | 第21页 |
| 2.1.2 标准曲线 | 第21-22页 |
| 2.1.3 日内、日间精密度 | 第22页 |
| 2.1.4 回收率 | 第22页 |
| 2.2 胰岛素普通脂质体和胆盐脂质体的制备 | 第22页 |
| 2.2.1 胰岛素胆盐脂质体的制备 | 第22页 |
| 2.2.2 胰岛素普通脂质体的制备 | 第22页 |
| 2.3 粒径的测定 | 第22-23页 |
| 2.4 包封率的测定 | 第23-24页 |
| 2.4.1 胰岛素与脂质体的分离 | 第23页 |
| 2.4.2 胰岛素的柱回收率 | 第23页 |
| 2.4.3 包封率的计算方法 | 第23-24页 |
| 2.5 单因素考察 | 第24页 |
| 2.6 制备条件对胰岛素活性的影响 | 第24-25页 |
| 2.6.1 对胰岛素二级构象的影响 | 第24-25页 |
| 2.6.2 对胰岛素生物活性的影响 | 第25页 |
| 2.7 统计分析 | 第25-26页 |
| 3 结果与讨论 | 第26-39页 |
| 3.1 胰岛素含量的HPLC测定法 | 第26-27页 |
| 3.1.1 标准曲线 | 第26页 |
| 3.1.2 日内、日间精密度 | 第26页 |
| 3.1.3 回收率 | 第26-27页 |
| 3.2 包封率的测定 | 第27-28页 |
| 3.2.1 胰岛素与制剂的分离 | 第27-28页 |
| 3.2.2 胰岛素的柱回收率 | 第28页 |
| 3.3 单因素考察 | 第28-33页 |
| 3.3.1 均质压力 | 第28-29页 |
| 3.3.2 均质循环次数 | 第29-30页 |
| 3.3.3 磷脂/胆盐比例 | 第30页 |
| 3.3.4 药/脂比 | 第30-31页 |
| 3.3.5 内水相pH | 第31-32页 |
| 3.3.6 外水相离子强度 | 第32页 |
| 3.3.7 水和有机溶剂的比例 | 第32-33页 |
| 3.3.8 水化时间 | 第33页 |
| 3.4 制备条件对胰岛素活性的影响 | 第33-39页 |
| 3.4.1 制备极端条件对脂质体中胰岛素二级构象的影响 | 第33-37页 |
| 3.4.2 制备条件对脂质体中胰岛素生物活性的影响 | 第37-39页 |
| 4. 本章小结 | 第39页 |
| 参考文献 | 第39-42页 |
| 第二章 胰岛素胆盐脂质体的体外表征与体内降糖作用研究 | 第42-66页 |
| 1 材料与仪器 | 第42-43页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第42-43页 |
| 1.2 仪器 | 第43页 |
| 1.3 实验动物 | 第43页 |
| 2 实验方法 | 第43-47页 |
| 2.1 三种胆盐脂质体的制备 | 第43-44页 |
| 2.2 粒径 | 第44页 |
| 2.3 包封率 | 第44页 |
| 2.4 透射电镜观察 | 第44页 |
| 2.5 药物泄漏考察 | 第44页 |
| 2.6 胆盐脂质体中胰岛素的二级构象 | 第44-45页 |
| 2.7 胆盐脂质体中胰岛素的生物活性 | 第45页 |
| 2.8 口服胆盐脂质体的生物利用度研究 | 第45-47页 |
| 2.8.1 血糖和血浆胰岛素含量的测定 | 第45页 |
| 2.8.2 糖尿病大鼠模型的建立 | 第45-46页 |
| 2.8.3 降糖和生物利用度研究 | 第46-47页 |
| 2.9 统计分析 | 第47页 |
| 3 结果与讨论 | 第47-62页 |
| 3.1 普通脂质体和胆盐脂质体的包封率、粒径与分布 | 第47-49页 |
| 3.2 普通脂质体与甘胆酸盐脂质体的透射电镜观察 | 第49-50页 |
| 3.3 不同pH环境下甘胆酸盐脂质体中药物随时间的泄漏情况 | 第50页 |
| 3.4 胆盐脂质体中胰岛素的二级构象 | 第50-51页 |
| 3.5 胆盐脂质体中胰岛素的生物活性 | 第51-52页 |
| 3.6 正常大鼠口服胰岛素制剂的生物利用度 | 第52-57页 |
| 3.6.1 胆盐类别对生物利用度的影响 | 第52-55页 |
| 3.6.2 粒径大小对生物利用度的影响 | 第55-56页 |
| 3.6.3 剂量对生物利用度的影响 | 第56-57页 |
| 3.7 糖尿病大鼠口服胰岛素制剂的生物利用度 | 第57-62页 |
| 3.7.1 糖尿病大鼠模型的建立 | 第57-59页 |
| 3.7.2 胆盐类别对生物利用度的影响 | 第59-60页 |
| 3.7.3 粒径大小对生物利用度的影响 | 第60页 |
| 3.7.4 剂量对生物利用度的影响 | 第60-62页 |
| 4.本章小结 | 第62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 第三章 胰岛素胆盐脂质体口服吸收的机制研究 | 第66-91页 |
| 1.材料与仪器 | 第66-68页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第66-67页 |
| 1.2 细胞 | 第67页 |
| 1.3 仪器 | 第67-68页 |
| 1.4 实验动物 | 第68页 |
| 2.实验方法 | 第68-72页 |
| 2.1 胆盐脂质体的体外抑酶实验 | 第68-69页 |
| 2.1.1 三种酶溶液的配制 | 第68-69页 |
| 2.1.2 抗酶降解实验 | 第69页 |
| 2.2 口服胆盐脂质体在麻醉大鼠胃肠道的滞留情况 | 第69-70页 |
| 2.2.1 近红外探针IR783标记胰岛素 | 第69页 |
| 2.2.2 胃肠道滞留情况 | 第69-70页 |
| 2.3 胆盐脂质体的细胞内摄取实验 | 第70-71页 |
| 2.3.1 细胞培养条件 | 第70页 |
| 2.3.2 Caco-2细胞培养 | 第70页 |
| 2.3.3 Fluorescein-胰岛素的合成 | 第70页 |
| 2.3.4 胆盐脂质体的制备 | 第70页 |
| 2.3.5 细胞摄取实验 | 第70-71页 |
| 2.4 胆盐脂质体的细胞转运实验 | 第71-72页 |
| 2.4.1 Caco-2细胞培养 | 第71页 |
| 2.4.2 胆盐脂质体的制备 | 第71页 |
| 2.4.3 转运实验 | 第71页 |
| 2.4.4 TEER值的测定 | 第71-72页 |
| 2.5 胆盐脂质体对细胞紧密连接的影响 | 第72页 |
| 3 结果与讨论 | 第72-87页 |
| 3.1 胆盐脂质体的体外抑酶实验 | 第72-74页 |
| 3.2 口服胆盐脂质体后麻醉大鼠胃肠道中IR783-rh不INS的分布情况 | 第74-77页 |
| 3.3 胆盐脂质体的细胞内摄取 | 第77-81页 |
| 3.3.1 胆盐类别对细胞摄取的影响 | 第78-79页 |
| 3.3.2 粒径大小对细胞摄取的影响 | 第79-80页 |
| 3.3.3 浓度对细胞摄取的影响 | 第80-81页 |
| 3.4 胆盐脂质体的细胞转运 | 第81-85页 |
| 3.4.1 胆盐类别对跨膜电阻(TEER)和细胞转运的影响 | 第81-83页 |
| 3.4.2 粒径大小对TEER和细胞转运的影响 | 第83-84页 |
| 3.4.3 浓度对TEER和细胞转运的影响 | 第84-85页 |
| 3.5 胆盐脂质体的对细胞紧密连接的影响 | 第85-87页 |
| 4. 本章小结 | 第87页 |
| 参考文献 | 第87-91页 |
| 第四章 胰岛素胆盐脂质体口服安全性的初步评价 | 第91-102页 |
| 1.材料与仪器 | 第91-92页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第91-92页 |
| 1.2 细胞 | 第92页 |
| 1.3 仪器 | 第92页 |
| 2.实验方法 | 第92-94页 |
| 2.1 胆盐脂质体对细胞存活率的影响 | 第92-93页 |
| 2.1.1 Caco-2细胞培养 | 第92页 |
| 2.1.2 MTT法检测细胞存活率 | 第92-93页 |
| 2.2 胆盐脂质体对细胞凋亡的影响 | 第93-94页 |
| 2.2.1 凋亡诱导 | 第93页 |
| 2.2.2 Annexin V FITC/PI法凋亡检测 | 第93-94页 |
| 3.结果与讨论 | 第94-99页 |
| 3.1 胆盐脂质体对细胞存活率的影响 | 第94-95页 |
| 3.1.1 胆盐类别对细胞存活率的影响 | 第94页 |
| 3.1.2 制剂浓度对细胞存活率的影响 | 第94-95页 |
| 3.2 胆盐脂质体对细胞凋亡的影响 | 第95-99页 |
| 3.2.1 胆盐脂质体对细胞4小时的凋亡结果 | 第97-98页 |
| 3.2.2 胆盐脂质体对细胞24小时的凋亡结果 | 第98-99页 |
| 4. 本章小结 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-102页 |
| 总结与展望 | 第102-104页 |
| 缩写 | 第104-105页 |
| 综述 | 第105-113页 |
| 参考文献 | 第108-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 已发表和待发表论文 | 第114-115页 |
