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真菌SM0406的种属鉴定及其木聚糖酶的分离纯化研究

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
第一章 研究背景第9-23页
    1.1 研究背景第9-20页
        1.1.1 木聚糖第9-10页
        1.1.2 木聚糖酶的结构及特性第10-13页
        1.1.3 木聚糖酶的分类研究第13-17页
        1.1.4 木聚糖酶的应用研究第17-20页
    1.2 论文的研究内容及意义第20-23页
第二章 菌株的种属鉴定第23-35页
    2.1 材料与方法第23-27页
        2.1.1 材料第23-25页
            2.1.1.1 菌株与培养基第23-24页
            2.1.1.2 菌株与质粒载体第24页
            2.1.1.3 试剂第24页
            2.1.1.4 仪器第24-25页
        2.1.2 方法第25-27页
            2.1.2.1 生理生化特征检测方法第25页
            2.1.2.2 扫描电镜观察第25-26页
            2.1.2.3 真菌DNA的提取第26页
            2.1.2.4 质粒载体的提取第26页
            2.1.2.5 质粒与DNA的酶切和连接第26页
            2.1.2.6 引物设计,合成以及PCR扩增SM0406的18 SrDNA和ITS片断第26-27页
            2.1.2.7 PCR片断回收第27页
            2.1.2.8 感受态细胞的制备第27页
    2.2 结果与讨论第27-33页
        2.2.1 菌株的形态观察第27-29页
            2.2.1.1 菌落形态观察第27页
            2.2.1.2 菌丝的形态观察第27-29页
        2.2.2 菌株的生理生化检测第29页
        2.2.3 菌株SM0406 18S rDNA基因的克隆及序列分析第29-31页
        2.2.4 菌株SM0406 ITS2基因的克隆及序列分析第31-33页
    2.3 小结第33-35页
第三章 产木聚糖酶的液体发酵培养基的优化第35-41页
    3.1 材料与方法第35-37页
        3.1.1 材料第35-36页
            3.1.1.1 菌株与培养基第35页
            3.1.1.2 试剂第35页
            3.1.1.3 仪器第35-36页
        3.1.2 方法第36-37页
            3.1.2.1 种子的制备第36页
            3.1.2.2 粗酶液的制备第36页
            3.1.2.3 木糖还原糖标准曲线测定第36页
            3.1.2.4 木聚糖酶活测定方法第36页
            3.1.2.5 最适培养时间的测定第36-37页
    3.2 结果与讨论第37-39页
        3.2.1 碳源对产酶的影响第37页
        3.2.2 氮源对产酶的影响第37-38页
        3.2.3 培养时间对产酶的影响第38-39页
        3.2.4 瓶装量对产酶的影响第39页
        3.2.5 接种量对产酶的影响第39页
    3.3 小结第39-41页
第四章 内切木聚糖酶Ⅰ的分离纯化与酶学性质研究第41-53页
    4.1 材料与方法第41-45页
        4.1.1 材料第41-42页
            4.1.1.1 菌株与培养基第41页
            4.1.1.2 试剂第41页
            4.1.1.3 仪器第41-42页
        4.1.2 方法第42-45页
            4.1.2.1 木聚糖酶活的测定方法第42页
            4.1.2.2 蛋白含量测定方法第42页
            4.1.2.3 M.sp.SM0406木聚糖酶Ⅰ的分离纯化方法第42-43页
            4.1.2.4 M.sp.SM0406木聚糖酶Ⅰ酶活性质研究方法第43-45页
    4.2 结果与讨论第45-52页
        4.2.1 木聚糖酶Ⅰ的分离纯化第45-47页
            4.2.1.1 G-100分子筛层析第45页
            4.2.1.2 阳离子交换层析第45-46页
            4.2.1.3 凝胶电泳SDS-PAGE第46-47页
            4.2.1.4 各步骤的纯化得率分析第47页
        4.2.2 木聚糖酶Ⅰ的性质研究第47-52页
            4.2.2.1 木聚糖酶Ⅰ反应的最适pH第47-48页
            4.2.2.2 木聚糖酶Ⅰ的最适反应温度第48-49页
            4.2.2.3 木聚糖酶Ⅰ的最适反应时间第49页
            4.2.2.4 金属离子对木聚糖酶Ⅰ酶活的影响第49-50页
            4.2.2.5 木聚糖酶Ⅰ的pH稳定性实验第50页
            4.2.2.6 木聚糖酶Ⅰ反应动力学参数第50-51页
            4.2.2.7 EDTA对木聚糖酶Ⅰ酶活的影响第51页
            4.2.2.8 木聚糖酶Ⅰ对NaCl的耐受性第51-52页
    4.3 小结第52-53页
第五章 工作总结与展望第53-55页
参考文献第55-63页
致谢第63页

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