摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 研究背景 | 第9-23页 |
1.1 研究背景 | 第9-20页 |
1.1.1 木聚糖 | 第9-10页 |
1.1.2 木聚糖酶的结构及特性 | 第10-13页 |
1.1.3 木聚糖酶的分类研究 | 第13-17页 |
1.1.4 木聚糖酶的应用研究 | 第17-20页 |
1.2 论文的研究内容及意义 | 第20-23页 |
第二章 菌株的种属鉴定 | 第23-35页 |
2.1 材料与方法 | 第23-27页 |
2.1.1 材料 | 第23-25页 |
2.1.1.1 菌株与培养基 | 第23-24页 |
2.1.1.2 菌株与质粒载体 | 第24页 |
2.1.1.3 试剂 | 第24页 |
2.1.1.4 仪器 | 第24-25页 |
2.1.2 方法 | 第25-27页 |
2.1.2.1 生理生化特征检测方法 | 第25页 |
2.1.2.2 扫描电镜观察 | 第25-26页 |
2.1.2.3 真菌DNA的提取 | 第26页 |
2.1.2.4 质粒载体的提取 | 第26页 |
2.1.2.5 质粒与DNA的酶切和连接 | 第26页 |
2.1.2.6 引物设计,合成以及PCR扩增SM0406的18 SrDNA和ITS片断 | 第26-27页 |
2.1.2.7 PCR片断回收 | 第27页 |
2.1.2.8 感受态细胞的制备 | 第27页 |
2.2 结果与讨论 | 第27-33页 |
2.2.1 菌株的形态观察 | 第27-29页 |
2.2.1.1 菌落形态观察 | 第27页 |
2.2.1.2 菌丝的形态观察 | 第27-29页 |
2.2.2 菌株的生理生化检测 | 第29页 |
2.2.3 菌株SM0406 18S rDNA基因的克隆及序列分析 | 第29-31页 |
2.2.4 菌株SM0406 ITS2基因的克隆及序列分析 | 第31-33页 |
2.3 小结 | 第33-35页 |
第三章 产木聚糖酶的液体发酵培养基的优化 | 第35-41页 |
3.1 材料与方法 | 第35-37页 |
3.1.1 材料 | 第35-36页 |
3.1.1.1 菌株与培养基 | 第35页 |
3.1.1.2 试剂 | 第35页 |
3.1.1.3 仪器 | 第35-36页 |
3.1.2 方法 | 第36-37页 |
3.1.2.1 种子的制备 | 第36页 |
3.1.2.2 粗酶液的制备 | 第36页 |
3.1.2.3 木糖还原糖标准曲线测定 | 第36页 |
3.1.2.4 木聚糖酶活测定方法 | 第36页 |
3.1.2.5 最适培养时间的测定 | 第36-37页 |
3.2 结果与讨论 | 第37-39页 |
3.2.1 碳源对产酶的影响 | 第37页 |
3.2.2 氮源对产酶的影响 | 第37-38页 |
3.2.3 培养时间对产酶的影响 | 第38-39页 |
3.2.4 瓶装量对产酶的影响 | 第39页 |
3.2.5 接种量对产酶的影响 | 第39页 |
3.3 小结 | 第39-41页 |
第四章 内切木聚糖酶Ⅰ的分离纯化与酶学性质研究 | 第41-53页 |
4.1 材料与方法 | 第41-45页 |
4.1.1 材料 | 第41-42页 |
4.1.1.1 菌株与培养基 | 第41页 |
4.1.1.2 试剂 | 第41页 |
4.1.1.3 仪器 | 第41-42页 |
4.1.2 方法 | 第42-45页 |
4.1.2.1 木聚糖酶活的测定方法 | 第42页 |
4.1.2.2 蛋白含量测定方法 | 第42页 |
4.1.2.3 M.sp.SM0406木聚糖酶Ⅰ的分离纯化方法 | 第42-43页 |
4.1.2.4 M.sp.SM0406木聚糖酶Ⅰ酶活性质研究方法 | 第43-45页 |
4.2 结果与讨论 | 第45-52页 |
4.2.1 木聚糖酶Ⅰ的分离纯化 | 第45-47页 |
4.2.1.1 G-100分子筛层析 | 第45页 |
4.2.1.2 阳离子交换层析 | 第45-46页 |
4.2.1.3 凝胶电泳SDS-PAGE | 第46-47页 |
4.2.1.4 各步骤的纯化得率分析 | 第47页 |
4.2.2 木聚糖酶Ⅰ的性质研究 | 第47-52页 |
4.2.2.1 木聚糖酶Ⅰ反应的最适pH | 第47-48页 |
4.2.2.2 木聚糖酶Ⅰ的最适反应温度 | 第48-49页 |
4.2.2.3 木聚糖酶Ⅰ的最适反应时间 | 第49页 |
4.2.2.4 金属离子对木聚糖酶Ⅰ酶活的影响 | 第49-50页 |
4.2.2.5 木聚糖酶Ⅰ的pH稳定性实验 | 第50页 |
4.2.2.6 木聚糖酶Ⅰ反应动力学参数 | 第50-51页 |
4.2.2.7 EDTA对木聚糖酶Ⅰ酶活的影响 | 第51页 |
4.2.2.8 木聚糖酶Ⅰ对NaCl的耐受性 | 第51-52页 |
4.3 小结 | 第52-53页 |
第五章 工作总结与展望 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
致谢 | 第63页 |