| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-20页 |
| 1.1 甾体激素类药物简介 | 第9-13页 |
| 1.1.1 植物提取法生产甾体激素类药物 | 第9-10页 |
| 1.1.2 微生物转化法生产甾体激素类药物 | 第10-11页 |
| 1.1.3 生物合成甾体激素类药物 | 第11-13页 |
| 1.2 7-脱氢胆甾醇简介 | 第13-14页 |
| 1.2.1 7-脱氢胆甾醇的重要性 | 第13页 |
| 1.2.2 7-脱氢胆甾醇生产现状 | 第13-14页 |
| 1.2.3 7-脱氢胆甾醇的生物合成 | 第14页 |
| 1.3 合成生物学简介 | 第14-17页 |
| 1.3.1 合成生物学的出现与发展 | 第14-16页 |
| 1.3.2 合成生物学的重要意义 | 第16-17页 |
| 1.4 本课题的主要内容 | 第17-20页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第20-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 实验用菌株 | 第20页 |
| 2.1.2 实验用质粒 | 第20-21页 |
| 2.1.3 培养基配制 | 第21-22页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第23页 |
| 2.2 基因元件的获得 | 第23-27页 |
| 2.2.1 内源基因元件的PCR扩增 | 第23-25页 |
| 2.2.2 外源基因元件的合成 | 第25-27页 |
| 2.3 DNA操作方法 | 第27-32页 |
| 2.3.1 PCR产物的回收 | 第27页 |
| 2.3.2 酶切反应 | 第27-28页 |
| 2.3.3 DNA片段的连接 | 第28页 |
| 2.3.4 大肠转化 | 第28-29页 |
| 2.3.5 大肠质粒提取 | 第29-30页 |
| 2.3.6 酵母转化 | 第30-31页 |
| 2.3.7 酵母质粒提取 | 第31页 |
| 2.3.8 酵母基因组提取 | 第31-32页 |
| 2.4 发酵培养方法 | 第32页 |
| 2.5 产物提取方法 | 第32-33页 |
| 2.6 GC-TOF/MS检测方法 | 第33-34页 |
| 第三章 功能模块的构建与改造 | 第34-45页 |
| 3.1 内源功能模块的构建 | 第34-38页 |
| 3.1.1 内源功能模块的设计 | 第34-36页 |
| 3.1.2 内源功能模块的改造 | 第36-38页 |
| 3.2 外源功能模块的构建 | 第38-43页 |
| 3.2.1 外源功能模块的设计 | 第38页 |
| 3.2.2 外源功能模块的改造 | 第38-43页 |
| 3.3 小结 | 第43-45页 |
| 第四章 酵母底盘细胞的优化 | 第45-52页 |
| 4.1 主要竞争途径麦角固醇生物合成的抑制 | 第45-46页 |
| 4.2 酵母固醇合成途径中关键基因的上调 | 第46-48页 |
| 4.3 内源功能模块中不同启动子组合与底盘细胞的适配性 | 第48-50页 |
| 4.4 小结 | 第50-52页 |
| 第五章 外源功能模块与底盘细胞的适配性研究 | 第52-59页 |
| 5.1 原始底盘细胞与外源功能模块的适配性研究 | 第53-55页 |
| 5.1.1 不同启动子的影响 | 第54-55页 |
| 5.1.2 不同底盘细胞的影响 | 第55页 |
| 5.2 优化后底盘细胞与改造后外源功能模块的适配性研究 | 第55-58页 |
| 5.2.1 不同启动子的影响 | 第56页 |
| 5.2.2 不同基因元件的影响 | 第56-57页 |
| 5.2.3 不同底盘细胞的影响 | 第57-58页 |
| 5.3 小结 | 第58-59页 |
| 第六章 结论与展望 | 第59-61页 |
| 6.1 结论 | 第59-60页 |
| 6.2 展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |